劉永霞

（西城區(qū)展覽路醫(yī)院，北京 100044）

抗Dia合并抗E抗體致交叉配血不合的臨床分析

劉永霞

（西城區(qū)展覽路醫(yī)院，北京 100044）

目的探討交叉配血中抗Dia合并抗E抗體致配血不合的原因。方法對該院1例因抗Dia合并抗E抗體致多次配血不合的患者進(jìn)行分析。通過血型鑒定、直接抗人球蛋白試驗、不規(guī)則抗體篩查、吸收放散實驗來確定患者的血型、可能的不規(guī)則抗體、細(xì)胞譜反應(yīng)格局。結(jié)果患者血型正定型：抗A抗體（－）、抗B抗體（－）；反定型：Ac（＋＋＋＋）、Bc（＋＋＋＋）、RBC（－）、Oc（－）；Rh血型定型：抗c抗體（－）、抗C抗體（＋＋＋＋）、抗D抗體（＋＋＋＋）、抗e抗體（＋＋＋＋）、抗E抗體（－）。直接抗人球蛋白試驗（－）。患者血清中含有抗E、抗c抗體。結(jié)論患者血清中的不規(guī)則抗體是導(dǎo)致交叉配血不合的重要原因。

交叉配血； 抗Dia抗體； 抗E抗體

1 資料與方法

1.1 一般資料 患者，男，65歲，入院時的主訴為“反復(fù)嘔血，黑便15年，再發(fā)1d”?；颊呷朐?d前患者出現(xiàn)心悸、頭昏、牙齦出血、氣促、腹痛等癥狀，同時排黑便約300mL，嘔血約200mL，無發(fā)熱，無暈厥。在患者當(dāng)?shù)蒯t(yī)院檢查，血紅蛋白（Hb）20g/L，給予“奧曲肽”治療病癥無好轉(zhuǎn)，然后轉(zhuǎn)入本院急診科，急診科以“肝硬化失代償期、上消化道出血”收入本院消化內(nèi)科?；颊咚摺⒕?、飲食欠佳，大便情況如上所述。既往有多次輸血史，輸血液制品（包括洗滌紅細(xì)胞在內(nèi)）均出現(xiàn)輸血不良反應(yīng)，如寒戰(zhàn)、畏寒、Hb尿、皮疹等。查體情況如下：脈搏90次/分，體溫36.7℃，舒張壓58mm Hg、舒張壓102mm Hg，呼吸22次/分，眼瞼膜和全身皮膚黏膜蒼白，表現(xiàn)出極重度貧血貌。血常規(guī)檢查顯示，Hb 15g/L，RBC 0.85×1012/L，血細(xì)胞比容（HCT）8%。潛血試驗（＋＋）。臨床常采用輸血來改善患者的貧血癥狀。本科室對該患者血樣進(jìn)行正、反定型的血型鑒定，結(jié)果顯示該患者紅細(xì)胞血型抗體篩選試驗Ⅰ號表現(xiàn)為陰性，Ⅱ、Ⅲ號均表現(xiàn)為陽性，血型O型，為Rh（D）陽性。對患者進(jìn)行交叉配血試驗時發(fā)現(xiàn)，采用凝聚胺配血法時出現(xiàn)主側(cè)凝集現(xiàn)象，然而次側(cè)并沒有出現(xiàn)凝集現(xiàn)象，且進(jìn)行鹽水配血法試驗的結(jié)果為陰性，與多個獻(xiàn)血者交叉配血均不合。

1.2 試劑 譜細(xì)胞、篩選細(xì)、抗A、B、D抗體標(biāo)準(zhǔn)血清以及抗人球蛋白試劑均由上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司生產(chǎn)；凝聚胺試劑盒采用珠海貝索生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)產(chǎn)品；血型不規(guī)則抗體篩選卡、Rh血型定型試劑卡均由長春博迅生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)。本實驗自制A、B和O型的RBC，自制過程如下：用氯化鈉注射液將3個同型獻(xiàn)血者的血液進(jìn)行3次洗滌，將壓積紅細(xì)胞的取出，采用0.9%氧化鈉生理鹽水配制3%～5%RBC懸液。

1.3 方法 （1）血型鑒定分別采用玻片法和試管法鑒定ABO血型的正定型反定型，采用卡式法對Rh血型進(jìn)行鑒定。（2）直接抗人球蛋白試驗（ICT）按《輸血科（血庫）臨床技術(shù)操作規(guī)程與標(biāo)準(zhǔn)化管理實用全書》內(nèi)容進(jìn)行操作［5］。（3）對不規(guī)則抗體篩查利用微柱凝膠法進(jìn)行試驗，依據(jù)微柱凝膠檢測卡所帶說明書進(jìn)行操作。結(jié)果分析：用排除法確定陰性結(jié)果，可能包含法對陽性結(jié)果進(jìn)行確定。（4）吸收放散試驗：對標(biāo)準(zhǔn)的CcDee、CCDEe紅細(xì)胞和標(biāo)準(zhǔn)的O型利用生理鹽水進(jìn)行3次洗滌后與等量的患者血清混合，置37℃的恒溫箱中使吸收1h，每隔10 min搖動試管1次，使RBC對抗體進(jìn)行充分吸收，對上層血清進(jìn)行離心上層即為吸收后血清；將吸收的RBC采用37℃生理鹽水進(jìn)行3次洗滌，采取乙醚放散法制備放散液。將患者放散液、血清吸收后的血清分別與自身RBC反應(yīng)，進(jìn)行ICT，與譜細(xì)胞在鹽水介質(zhì)（NS）、凝聚胺（Poly）中反應(yīng)，按各自的說明書進(jìn)行操作。

2 結(jié) 果

2.1 血型鑒定 患者血型，Rh血型定型：抗D（＋＋＋＋）、抗C（＋＋＋＋）、抗c（－）、抗E（－）、抗e（＋＋＋＋）；正定型：抗A（－）、抗B（－），反定型：Ac（＋＋＋＋）、Bc（＋＋＋＋）、Oc（－）、RBC（－）。

2.2 DCT檢測結(jié)果為陰性。

2.3 不規(guī)則抗體篩查 從篩檢RBC與患者血清反應(yīng)的格局初步判斷患者血清中可能存在著抗－c和抗－E抗體，見附表1（見《國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志》網(wǎng)站主頁“論文附件”）。

2.4 吸收放散試驗 譜細(xì)胞中含有c、E抗原的RBC與患者血清在NS中出現(xiàn)陰性結(jié)果，而在凝聚胺法和抗人球蛋白法中均出現(xiàn)陽性結(jié)果，見表1。因此患者血清中含有IgG性質(zhì)的抗－c和抗－E抗體。

2.5 輸血及效果 本科室對患者選用O型紅細(xì)胞懸液和Rh CCDee進(jìn)行交叉配血操作，凝聚胺法和鹽水配血法主次側(cè)均無凝集和溶血現(xiàn)象?；颊咻斎?U紅細(xì)胞懸液并未出現(xiàn)輸血不良反應(yīng)，且HCT由8%上升到15%，Hb由15g/L上升到40g/L，RBC由0.85×1012/L上升到1.65×1012/L。

3 結(jié) 論

接受輸血者自身血清中存在的不規(guī)則抗體是致使交叉配血出現(xiàn)不合現(xiàn)象的一個主要的原因［6］。除ABO血型系統(tǒng)以外的其他血型系統(tǒng)引發(fā)的交叉配血不合往往是由于妊娠或多次輸血是造成患者體內(nèi)產(chǎn)生與供血者紅細(xì)胞相結(jié)合的IgG抗體［7］，使患者產(chǎn)生遲發(fā)型免疫反應(yīng)。自身免疫性疾病患者會出現(xiàn)因自身抗體的原因?qū)е陆徊媾溲缓?，在此種情況下，主側(cè)和次側(cè)均可凝集，出現(xiàn)這種情況是應(yīng)盡量避免輸血。藥物、冷凝集素以及血漿蛋白紊亂等會使紅細(xì)胞聚集，使交叉配血結(jié)果受到影響，造成交叉配血不合。此種情況表現(xiàn)為主側(cè)凝集，可利用生理鹽水對紅細(xì)胞進(jìn)行洗滌來消除影響。

交叉配血出現(xiàn)不合現(xiàn)象的原因，可以分為免疫性和非免疫兩大類［8］。免疫性致使出現(xiàn)交叉配血不合現(xiàn)象表現(xiàn)為主側(cè)和次側(cè)均凝集。血清蛋白紊亂、清蛋白和球蛋白比例倒置或部分藥品破壞紅細(xì)胞表面的zeta電位會引起非免疫性交叉配血不合［9］。非免疫原因?qū)е碌慕徊媾溲缓现饕憩F(xiàn)為主側(cè)凝集。

當(dāng)交叉配血試驗中出現(xiàn)有不配合現(xiàn)象時，首先應(yīng)考慮供血者和受血者的ABO定型是否有錯，且必要時進(jìn)行抗體篩查和Rh血型鑒定試驗。其次，應(yīng)注意是否存在特異性未知的同種抗體或是特異性同種抗體。人類紅細(xì)胞膜上抗原性最強(qiáng)的兩種血型系統(tǒng)為ABO和Rh血型。Rh抗原中以D抗原為最強(qiáng)，僅次于A和B抗原的抗原強(qiáng)度，接下來依次為E、C、c、e［10］。Rh抗體中除天然的抗－C和抗－E外，多由外界的RBC免疫刺激所產(chǎn)生，其中多數(shù)為IgG。免疫早期也會出現(xiàn)少部分的IgM型。本例患者Rh血型為CCDee，缺乏c和E抗原，在長期的輸血過程中，由于含有c和E抗原的RBC被輸入患者體內(nèi)，其自身機(jī)體產(chǎn)生了免疫性抗c和抗E抗體，當(dāng)再次輸血時，就會出現(xiàn)交叉配血不合現(xiàn)象。在臨床治療中，當(dāng)出現(xiàn)配血不合情況時，不能簡單地輸注O型洗滌RBC，因為，此種血液只對ABO血型系統(tǒng)具有較高的安全性，但對其他血型系統(tǒng)會產(chǎn)生免疫性血管外溶血性輸血反應(yīng)。

綜上所述，由于血清中RBC抗原的復(fù)雜性和不規(guī)則抗體，建議對反復(fù)輸血患者進(jìn)行Rh系統(tǒng)5種抗原配型和不規(guī)則抗體篩查試驗，以保證輸血的有效和安全。

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Case analysis of incompatibility in blood crossmatching induced by anti－Dia and anti－E antibodies

LiuYongxia
（Zhanlanlu Hospital of Xicheng District，Beijing100044，China）

ObjectiveTo investigate the reason of anti－Dia combined with anti－E antibodies inducing incompatibility in blood crossmatching.MethodsRetrospectively analyse a case of patient treated in the hospital，whose blood crossmatching failed for several times.Through blood typing，direct Coombs test，irregular antibody screening，adsorption and elution experiments to determine the patient′s blood type，possible irregular antibodies，cell spectral response pattern.ResultsForward blood typing：anti－A antibody（－），anti－B antibodies（－）；Reverse blood typing：Ac（＋＋＋＋），Bc（＋＋＋＋），RBC（－），Oc（－）；Rh blood grouping：anti－c antibody（－），anti－C antibody（＋＋＋＋），anti－D antibody（＋＋＋＋），anti－e antibody（＋＋＋＋），anti－E antibody（－），direct Coombs test（－）.Patient′s serum contained anti－E and anti－c antibodies.ConclusionIrregular antibodies in the serum of patients is an important cause of crossmatch discord.

crossmatching blood； anti－Dia antibodies； anti－E antibodies交叉配血是確定能否輸血的重要依據(jù)，在血型鑒定的基礎(chǔ)上，以交叉配血試驗來進(jìn)一步證實供血者和受血者之間是否存在血型不合的問題，以保證受血者的輸血安全。進(jìn)行交叉配血試驗時，兩側(cè)均不凝集可輸血；若獻(xiàn)血者紅細(xì)胞與受血者血清主側(cè)不發(fā)生凝集，但是次側(cè)凝集時，在必要情況下可慢速、少量輸血［1］；若獻(xiàn)血者紅細(xì)胞與受血者血清主側(cè)發(fā)生凝集就必須禁止輸血。導(dǎo)致交叉配血不合的原因主要有：受血者自身血清中存在免疫性疾病產(chǎn)生的抗體或是由于妊娠、反復(fù)輸血等產(chǎn)生不規(guī)則抗體；藥物、冷凝集素以及血漿蛋白紊亂等可致使紅細(xì)胞出現(xiàn)聚集現(xiàn)象，并對交叉配血結(jié)果產(chǎn)生干擾，導(dǎo)致交叉配血出現(xiàn)不合［2－4］。筆者回顧性分析了本院1例因抗－Dia合并抗E抗體致配血出現(xiàn)多次不合的患者，并對原因進(jìn)行分析，以有效避免因交叉配血不合而導(dǎo)致的輸血治療延誤。

10.3969/j.issn.1673－4130.2015.03.035

A

1673－4130（2015）03－0369－02

2014－08－15）

劉永霞，女，副主任檢驗醫(yī)師，主要從事臨床輸血與檢驗的研究。