朱光書(shū)，林強(qiáng)，曾燕蓉，崔秋英，邱長(zhǎng)玉，張朝華，朱方容

（廣西壯族自治區(qū)蠶業(yè)技術(shù)推廣總站，南寧市530007）

桑葉產(chǎn)量的高低可以通過(guò)對(duì)調(diào)查對(duì)象進(jìn)行采摘、稱量、計(jì)算獲得，一定程度上還可以用肉眼進(jìn)行評(píng)估。但桑葉的品質(zhì)及飼料效率，則需要用科學(xué)的方法進(jìn)行評(píng)價(jià)。葉質(zhì)鑒定已有數(shù)個(gè)檢測(cè)方法及指標(biāo)，但在桑樹(shù)育種和鑒定程序上，迫切需要一個(gè)與品種的飼料價(jià)值密切相關(guān)，比較簡(jiǎn)明、有效，又便于操作測(cè)試的指標(biāo)和測(cè)定方法［1］。本文就近幾十年來(lái)國(guó)內(nèi)外關(guān)于桑葉質(zhì)的定義、桑葉質(zhì)的測(cè)定方法、不同桑樹(shù)品種的葉質(zhì)鑒定等進(jìn)行綜述。

1 桑葉品質(zhì)的定義

日本竹內(nèi)［2]認(rèn)為桑葉葉質(zhì)包含著三層含義，一是支配食下量的質(zhì)量(第一次葉質(zhì))；二是支配消化量的質(zhì)量(第二次葉質(zhì))；三是消化物本身的質(zhì)量(第三次葉質(zhì))，所謂葉質(zhì)實(shí)際上是這三種質(zhì)量的綜合體。朱方容［3]認(rèn)為葉質(zhì)是指桑葉作為飼料用來(lái)養(yǎng)蠶的品質(zhì)。葉質(zhì)優(yōu)的含義有兩方面內(nèi)容：一是蠶兒喜歡吃、眠起整齊、蠶體發(fā)育快、蠶體強(qiáng)健、全繭量和繭層量高、絲質(zhì)優(yōu)，或者卵量多、制種量高、種質(zhì)好，即桑葉“好吃又有營(yíng)養(yǎng)”；二是桑葉的飼料效率高也稱為葉質(zhì)優(yōu)良。

桑葉含有水分、蛋白質(zhì)、碳水化合物、脂肪、無(wú)機(jī)鹽、維生素等家蠶生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中不可或缺的營(yíng)養(yǎng)素［4-5］。它們的含量在一定程度上決定著葉質(zhì)的優(yōu)劣，而養(yǎng)蠶的飼料效率可以看做桑樹(shù)葉質(zhì)的綜合表現(xiàn)。飼料效率最早出現(xiàn)在飼料價(jià)格較高的畜牧業(yè)，在養(yǎng)蠶業(yè)上歷來(lái)不受大家重視，但隨著人工飼料實(shí)用化的快速發(fā)展，飼料效率才逐步成為學(xué)者們的研究熱點(diǎn)［6］。所謂飼料效率，是指生產(chǎn)物與所需飼料消費(fèi)量之比［7］，又稱繭層飼料效率或者葉絲轉(zhuǎn)化率。品種飼料效率的考評(píng)指標(biāo)，絲繭育是繭層生產(chǎn)效率(繭層量/食下量)，種繭育是蠶卵生產(chǎn)效率(產(chǎn)卵量/食下量)［8］。葉絲轉(zhuǎn)化率構(gòu)成因素有桑葉食下率、消化率、全繭轉(zhuǎn)化率、繭層率。

2 葉質(zhì)評(píng)價(jià)方法

自上世紀(jì)以來(lái)，國(guó)內(nèi)外許多學(xué)者圍繞桑樹(shù)葉質(zhì)的測(cè)試評(píng)價(jià)開(kāi)展了各種養(yǎng)蠶試驗(yàn)，先后提出了利用家蠶幼蟲(chóng)饑餓就眠率鑒定葉質(zhì)、按家蠶絕食生命時(shí)數(shù)鑒定葉質(zhì)優(yōu)劣和使用1張桑葉養(yǎng)蠶來(lái)判斷桑樹(shù)品種間的飼料效率的差異等幾種測(cè)試方法。

利用家蠶幼蟲(chóng)饑餓就眠率鑒定葉質(zhì)首先由日本學(xué)者竹內(nèi)好武［9]提出。具體是在稚蠶期使用不同品種的桑葉喂予正常喂葉量的70%，止桑一定時(shí)間后調(diào)查稚蠶的就眠情況，就眠整齊、就眠率高的桑葉因小蠶淘汰少、減蠶率低、生命率高，其葉質(zhì)較優(yōu)，反之則葉質(zhì)差。蔣猷龍［10]的方法與竹內(nèi)的略有不同。其具體是讓孵化后的若干個(gè)收蟻量相同的小區(qū)蟻蠶在28℃的環(huán)境下喂予不同品種的桑葉，食桑40 h后絕食30 h，然后數(shù)出不同試驗(yàn)區(qū)的就眠蠶頭數(shù)，得出就眠率，認(rèn)為就眠率的高低能確定桑葉品質(zhì)。即就眠率高，蠶兒入眠整齊，桑葉葉質(zhì)優(yōu)；反之則葉質(zhì)差。其他各齡期的蠶兒也可開(kāi)展同樣的試驗(yàn)。

周若梅、謝德松［11］按家蠶絕食生命時(shí)數(shù)來(lái)鑒定葉質(zhì)優(yōu)劣。采用不同葉位（以著葉角度30°～46°為第1位葉，依次向下數(shù)取葉位）的桑葉飼養(yǎng)一定時(shí)間后停止給桑，使蠶兒饑餓，然后定時(shí)調(diào)查絕食生命時(shí)數(shù)，按絕食生命時(shí)數(shù)的長(zhǎng)短來(lái)判別葉質(zhì)的優(yōu)劣。葉質(zhì)差絕食生命時(shí)數(shù)短，葉質(zhì)好則生命時(shí)數(shù)長(zhǎng)。

黑田、吉武等［2]在桑葉飼料效率的研究中發(fā)現(xiàn)，5齡第一日的蠶糞量與整個(gè)5齡期的消化率之間呈高度的負(fù)相關(guān)，據(jù)此提出用一張桑葉養(yǎng)蠶來(lái)判斷桑品種飼料效率的差異。從須藤等［12]的試驗(yàn)中，可看出5齡蠶糞量與葉位—葉質(zhì)與產(chǎn)繭量、繭層量間的密切關(guān)系。比這更早一些，還有過(guò)利用蟻蠶食桑6 h后的排糞量來(lái)鑒定葉質(zhì)的報(bào)道［2］。綜合這些試驗(yàn)可以認(rèn)為，蠶的排糞量作為一種簡(jiǎn)便易行的葉質(zhì)與飼料效率測(cè)定法，值得繼續(xù)探索［2］。

2.1 化學(xué)營(yíng)養(yǎng)分析法

桑葉中含有豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，他們與蠶體生長(zhǎng)發(fā)育密切相關(guān)。生長(zhǎng)期桑葉中水分、干物質(zhì)分別約占75%～82%、18%～25%，桑葉干物質(zhì)中的化學(xué)成分隨桑樹(shù)品種、采收季節(jié)、產(chǎn)地、桑樹(shù)營(yíng)養(yǎng)狀況的不同有明顯差異，主要包括粗蛋白（26.2%～36.4%）、粗脂肪（3.2%～3.5%）、粗纖維（9.3%～10.7%）、灰分（7.2%～8.1%）、可溶無(wú)氮物（43.0%～54.4%）、碳水化合物（12.2%～20.4%）［13］，同時(shí)還富含鈣、鎂、磷、鐵、鋅、鈉、銅等多種的礦物質(zhì)元素，尤其鈣、鉀含量高，每1000 g桑葉（干基計(jì)）中含有鈣2699mg，鎂362mg，鉀31001mg，鐵44.1mg，磷238mg，鈉39.9mg鋅6.1 mg［14］。

桑葉中各種營(yíng)養(yǎng)成分的測(cè)定方法，早期一般采用直接干燥法測(cè)定桑葉含水率，凱氏定氮儀測(cè)定粗蛋白，按GB/T 5009.10-2003測(cè)定粗纖維［15］，B-811全自動(dòng)脂肪測(cè)定儀測(cè)定粗脂肪，干灰化法測(cè)定灰分［16］，蒽酮比色法測(cè)定可溶性糖［17］，其中鮮桑葉的多糖用制備法測(cè)定［18］；利用高錳酸鉀滴定法測(cè)定鈣的含量，釩鉬酸銨比色法測(cè)定磷的含量［19］，原子吸收分光光度計(jì)可測(cè)定樣品中的銅、鋅、鐵、錳、鈉、鎂、鈣和鉀等礦物質(zhì)含量［20］，氨基酸自動(dòng)分析儀可分析測(cè)定氨基酸的種類和含量。當(dāng)前常用GB/T 6438-2007測(cè)定飼料中的灰分，GB/T6435-2006測(cè)定飼料中的水分和其他物質(zhì)的含量，GB/T6434-2006測(cè)定飼料中粗纖維的含量，GB/T6433-2006測(cè)定飼料中粗脂肪的含量，GB/T 6432-1994測(cè)定飼料中粗蛋白含量，GB/T5009.8-2008測(cè)定食品中蔗糖含量；由于碳水化合物包括糖、寡糖和多糖，其在被測(cè)物中的含量可采用加法或減法得到。加法是淀粉和糖的總和即為碳水化合物的量，減法則是被測(cè)物總質(zhì)量為1000，依次減掉水分、蛋白質(zhì)、脂肪、灰分及膳食纖維的質(zhì)量即為碳水化合物的量。

2.2 桑葉養(yǎng)蠶生物鑒定法

使用參試品種的桑葉全程養(yǎng)蠶，按養(yǎng)蠶結(jié)果評(píng)價(jià)葉質(zhì)的優(yōu)劣叫桑葉養(yǎng)蠶生物鑒定法。它被認(rèn)為是目前桑葉飼料價(jià)值最直接、最可靠、最全面的鑒定方法。朱光書(shū)等用桑葉養(yǎng)蠶生物鑒定法的具體過(guò)程是從收蟻起1～3齡或1～4齡同室同一大區(qū)用同一桑品種的桑葉飼養(yǎng)，4齡或5齡起蠶選取雌蠶分成多個(gè)試驗(yàn)小區(qū)分別用供試桑樹(shù)雜交組合(品種)的適熟桑葉飼養(yǎng)，給桑方法采用指數(shù)限制給桑法，熟蠶上蔟時(shí)記錄不同時(shí)間段各小區(qū)的熟蠶頭數(shù)，調(diào)查各小區(qū)4齡或5齡幼蟲(chóng)的平均經(jīng)過(guò)時(shí)間；上蔟后第7 d調(diào)查每小區(qū)的收繭量、結(jié)繭頭數(shù)、死籠率、全繭量、繭層量、繭層率等，計(jì)算出萬(wàn)蠶產(chǎn)繭量、萬(wàn)蠶繭層量、5齡1000 kg桑葉產(chǎn)繭量、5齡1000 kg桑葉產(chǎn)繭層量、5齡日產(chǎn)全繭量、5齡日產(chǎn)繭層量并進(jìn)行綜合比較，篩選出葉質(zhì)優(yōu)良的桑樹(shù)雜交組合［21-22］。

3 桑葉養(yǎng)蠶生物鑒定法的關(guān)鍵點(diǎn)

桑葉養(yǎng)蠶生物鑒定法應(yīng)處理好幾個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)，一是選擇適宜的飼育溫度；二是分區(qū)飼養(yǎng)后確定合適的給桑量；三是保證5齡蠶的同一性別；四是養(yǎng)蠶和桑葉化學(xué)成分測(cè)定要采同一葉位的桑葉。

3.1 飼育溫度

中島正雄［23］的研究表明，改變催青和幼蟲(chóng)的飼育條件，而5齡期在相同的給桑量和同一環(huán)境條件下飼養(yǎng)，繭層生產(chǎn)效率差異并不明顯；沈衛(wèi)德［24]在關(guān)于5齡飼育溫度對(duì)飼料干物質(zhì)的攝取和利用的影響報(bào)道中指出，消化率、繭層率均是偏高溫度飼養(yǎng)區(qū)(30℃)的高于偏低溫度區(qū)(20℃)的，但全繭轉(zhuǎn)化率卻是30℃飼養(yǎng)區(qū)低于20℃區(qū)的，最終偏低溫度飼養(yǎng)區(qū)的飼料效率(繭層生產(chǎn)效率)有略高于偏低溫度區(qū)的傾向；長(zhǎng)島榮一等［25]在分析環(huán)境因素對(duì)飼料效率的影響中認(rèn)為5齡期的溫度對(duì)繭層生產(chǎn)效率影響較小，其中5齡前三日22℃，后期25℃的飼育區(qū)的繭層生產(chǎn)效率最高(11.17%)，5齡每隔兩日升溫(22℃～25℃～28℃)飼育區(qū)的最低(11.00%)；長(zhǎng)島榮一等［26]通過(guò)實(shí)驗(yàn)得到桑葉飼料效率最高的飼養(yǎng)溫度是22℃～25℃；朱光書(shū)等［21-22］在關(guān)于桑樹(shù)多倍體雜交組合葉質(zhì)養(yǎng)蠶測(cè)試分析中最終選擇25℃作為5齡蠶的飼養(yǎng)溫度。

3.2 養(yǎng)蠶的給桑量

分區(qū)飼養(yǎng)時(shí)的給葉量與實(shí)驗(yàn)結(jié)果的科學(xué)性和客觀性密切相關(guān)。周韻琴［27]的研究表明掌握好實(shí)驗(yàn)的給桑量可有效提高飼料效率。要控制好給桑量首先要應(yīng)用科學(xué)的給葉方法，黑田等［2]在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)指數(shù)限制給桑法可以比較客觀地反映各品種間飼料效率的差異。向仲懷和長(zhǎng)島榮一［28］在家蠶飼料效率的遺傳學(xué)研究中指出限量給桑法有提高飼料效率的作用。實(shí)驗(yàn)中如何選擇給桑指數(shù)，莊大恒［29]通過(guò)實(shí)驗(yàn)認(rèn)為在一天四回育中，按鮮物計(jì)給桑指數(shù)在0.2～0.5內(nèi)，給桑量大則飼料效率較低，但給桑指數(shù)0.2區(qū)的產(chǎn)繭量和繭層量較低是由于食桑不足產(chǎn)生的，按干物質(zhì)計(jì)給桑指數(shù)0.3區(qū)的全繭轉(zhuǎn)化率和繭層轉(zhuǎn)換率較高；李奕仁等［2］認(rèn)為喂葉時(shí)蠶體重×0.3的值可作為5齡期每回喂蠶的給桑量，這樣操作既可以滿足各種品種食桑的基本要求又可以把品種間、試驗(yàn)區(qū)間的食下率控制在大致相仿的水平。朱光書(shū)等［21-22］在一日三回育的養(yǎng)蠶實(shí)驗(yàn)中，每天早上喂葉前稱量蠶體重，早上和中午的喂葉量為蠶體重×0.4～蠶體重×0.5、晚上喂葉量為蠶體重×0.8～蠶體重×1.0；5齡末期則要根據(jù)實(shí)際情況相應(yīng)減少。

3.3 供試材料蠶的選擇

通過(guò)養(yǎng)蠶生物鑒定法對(duì)桑樹(shù)葉質(zhì)、飼料效率進(jìn)行評(píng)價(jià)的試驗(yàn)需要注意的另一關(guān)鍵點(diǎn)是參試家蠶個(gè)體間的差異。不管使用桑葉養(yǎng)蠶還是人工飼料養(yǎng)蠶，4齡眠蠶或5齡起蠶體重與食下量、繭層量、全繭量及飼料效率之間均存在一定程度上的正相關(guān)。據(jù)李奕仁等［2］的測(cè)試，把4齡眠蠶體重按輕、中、重分別調(diào)查，其繭層轉(zhuǎn)化率指數(shù)雌蠶為輕∶中∶重=97∶1000∶1000；雄，93∶94∶1000；以雌蠶作1000，雄蠶的指數(shù)為輕∶中∶重=1007∶1005∶112。因此在小區(qū)試驗(yàn)中必須把雌、雄性別進(jìn)行區(qū)分以保證同一性別，并調(diào)整控制供試材料蠶的起始體重趨于一致。朱光書(shū)等［21-22］一直選用雌蠶進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，即4齡或5齡起蠶餉食前精選出個(gè)體大小大致相同的雌蠶供試，基本做到雌蠶率達(dá)到98%以上，體重誤差不超過(guò)2%，實(shí)驗(yàn)結(jié)果客觀、科學(xué)。

3.4 桑葉葉位的選取

試驗(yàn)中因采摘各參試品種桑葉時(shí)選取葉位不統(tǒng)一而使實(shí)驗(yàn)結(jié)果差別顯著，這是由于桑葉的成熟老嫩不一營(yíng)養(yǎng)成分含量不同造成的。須藤等［12]開(kāi)展了“桑的葉位―葉質(zhì)差異與蠶的成長(zhǎng)、繭質(zhì)之間的關(guān)系”的試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)桑葉中的含N量與葉位呈高度負(fù)相關(guān)即含N量隨葉位的增大(自上而下)而減少。

4 葉質(zhì)研究案例

自上世紀(jì)以來(lái)，國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)桑葉葉質(zhì)的研究孜孜不倦，成績(jī)不俗。在對(duì)影響飼料效率因素的研究中，福田紀(jì)文［30］發(fā)現(xiàn)桑葉質(zhì)量的重要指標(biāo)繭層量雖由0.2 g提高到0.6 g但這是靠多吃桑葉來(lái)提高的，單位用桑量所獲產(chǎn)量幾十年來(lái)基本上沒(méi)有變化。莊大桓等［31］分析我國(guó)幾十年蠶品種變遷后指出主要經(jīng)濟(jì)指標(biāo)提高顯著但桑品種飼料效率幾乎沒(méi)有提高，認(rèn)為提高桑樹(shù)品種的飼料效率意義重大。徐俊良［32-33］認(rèn)為桑樹(shù)品種是影響葉絲轉(zhuǎn)換率的主要因素，即葉質(zhì)是影響飼料效率最重要的因素。長(zhǎng)島榮一［26］通過(guò)實(shí)驗(yàn)得到了飼料效率的提高首先必須是桑和蠶品種的改良的結(jié)論。

對(duì)于桑樹(shù)化學(xué)成分的研究，王志剛等［34］的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：對(duì)飼料效率起首要作用的是粗蛋白含量、其次是可溶性糖含量，可溶性糖與粗纖維的互作對(duì)飼料效率影響最小。町井等［35］在桑葉飼料效率及其與桑葉N含量和氨基酸含量的關(guān)系的研究中得到繭層生產(chǎn)效率與桑葉含N量高度相關(guān)且與氨基酸含量也有較高的相關(guān)性，特別是與蛋氨酸、組氨酸、蘇氨酸有高度相關(guān)性的結(jié)果。

關(guān)于桑樹(shù)品種飼料效率的研究報(bào)道，朱方容等［36］調(diào)查6個(gè)桑品種養(yǎng)蠶的經(jīng)濟(jì)性狀，結(jié)果飼料效率最優(yōu)的為廣東桑，其次為沙2×倫109，7737最差。向仲懷［6］在多倍體桑飼料效率的研究中證明四倍體一之瀨桑葉的飼料效率明顯優(yōu)于二倍體一之瀨的。呂志強(qiáng)等［37］對(duì)浙江省148份桑樹(shù)種質(zhì)資源開(kāi)展葉質(zhì)養(yǎng)蠶生物鑒定，春季實(shí)驗(yàn)的結(jié)果是20個(gè)早熟品種的百公斤桑葉繭層量與對(duì)照湖桑197相比差異不明顯；中、晚熟桑品種中董嶺枝多桑、湖桑2號(hào)和湖桑5號(hào)的百公斤桑葉繭層量比對(duì)照提高10%以上；秋季實(shí)驗(yàn)結(jié)果是參鑒品種的百公斤桑葉繭層量沒(méi)有明顯高于對(duì)照。朱光書(shū)等［21-22］開(kāi)展的桑樹(shù)多倍體雜交組合葉質(zhì)鑒定實(shí)驗(yàn)初步選出M1×93514、93200×桂誘P58、M2×2058、M1×9104、M2×93146、M2×93133和M1×94126等幾個(gè)綜合表現(xiàn)較優(yōu)的組合。

5 結(jié)論

5.1 桑葉養(yǎng)蠶生物鑒定法是測(cè)定桑葉的飼料效率最直接、最可靠的方法

就桑葉用于養(yǎng)蠶而言，用桑葉養(yǎng)蠶生物鑒定法測(cè)定桑葉的飼料效率最直接、可靠，但要處理好飼養(yǎng)溫度、給桑量、桑葉葉位及統(tǒng)一蠶的性別等幾個(gè)問(wèn)題，如能結(jié)合桑葉的養(yǎng)蠶結(jié)果和化學(xué)營(yíng)養(yǎng)成分進(jìn)行葉質(zhì)評(píng)價(jià)將更加完善。

5.2 桑葉潔凈度也是評(píng)價(jià)桑葉葉質(zhì)的一個(gè)重要指標(biāo)

家蠶對(duì)桑葉的潔凈水平要求高，如果食下的桑葉受到有害氣體、重金屬、灰塵及病原微生物等有害、有毒物的污染，就會(huì)影響蠶的食桑，影響蠶的體質(zhì)和健康，甚至蠶兒的生命將受到嚴(yán)重威脅。因此在桑葉質(zhì)量的考評(píng)指標(biāo)中除百公斤桑葉產(chǎn)繭量、百公斤桑葉產(chǎn)繭層量、繭絲轉(zhuǎn)換率及蛋白質(zhì)、碳水化合物、纖維、脂肪等成分的含量幾個(gè)重要指標(biāo)外，桑葉的潔凈度也應(yīng)作為評(píng)價(jià)生產(chǎn)用桑葉質(zhì)的一個(gè)重要指標(biāo)。

5.3 進(jìn)一步開(kāi)展多用途桑品質(zhì)研究

桑葉除了作為蠶的飼料外，還可以作為畜牧養(yǎng)殖的飼料資源。不同用途的桑葉，其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)是不同的，作為畜牧養(yǎng)殖的飼料桑，其葉質(zhì)營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)是粗蛋白、粗脂肪、糖及纖維的含量，與蠶的營(yíng)養(yǎng)要求有一定差異。今后，為了開(kāi)發(fā)桑葉的新用途，還要針對(duì)其用途開(kāi)展桑的品質(zhì)研究。

［1］楊今后.桑品種飼料價(jià)值葉質(zhì)鑒定指標(biāo)的討論［J］.江蘇蠶業(yè)，1993，15（1）:20-22.

［2］李奕仁.桑葉葉質(zhì)判斷中的層次、方法與問(wèn)題［J］.國(guó)外農(nóng)學(xué)（蠶業(yè)），1988，9（2）:7-11.

［3］朱方容，林強(qiáng)，胡樂(lè)山，等.人工四倍體桑種質(zhì)的葉質(zhì)評(píng)價(jià)［J］.廣西蠶業(yè)，1999，36（3）:1-7.

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［7］吉武成美，徐俊美.蠶的育種和生產(chǎn)率的提高［J］.蠶桑通報(bào)，1982，29（3）:58-61.

［8］楊明觀，屠振力.桑蠶飼料效率有關(guān)性狀的遺傳率和相關(guān)關(guān)系［J］.蠶桑通報(bào)，1990，37（3）:22-24.

［9］竹內(nèi)好武.日蠶雜，1959，28（6）：450-451.

［10］蔣猷龍.蠶的就眠［J］.蠶桑通報(bào)，1977，24（4）:34-36.

［11］周若梅，謝德松.按家蠶絕食生命時(shí)數(shù)的葉質(zhì)鑒定［J］.蠶業(yè)科學(xué)，1982，8（4）:186-192.

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