黃深惠，黃旭華，王霞，石美寧，唐亮

（廣西壯族自治區(qū)蠶業(yè)科學研究院，南寧市 530007）

家蠶微粒子病防治藥物研究進展

黃深惠，黃旭華，王霞，石美寧，唐亮

（廣西壯族自治區(qū)蠶業(yè)科學研究院，南寧市 530007）

通過對防治家蠶微粒子病藥物進行了綜述，分別從蠶業(yè)生產(chǎn)中常用的消毒藥物和治療藥物的種類、作用效果、作用機理進行全面分析，為合理使用防治微粒子病藥物提供科學依據(jù)，并為開發(fā)新型防治家蠶微粒子病藥物提出新思路。

家蠶微粒子病；防治藥物

家蠶微粒子病是家蠶最主要的傳染性疾病之一，是能夠通過胚種傳染的毀滅性疫病。微粒子病的暴發(fā)對蠶種生產(chǎn)造成極大的威脅，嚴重時可造成巨大的經(jīng)濟損失。家蠶微粒子病的防治，在生產(chǎn)上主要通過淘汰帶毒母蛾和藥物防治的措施，使用的藥物分別為消毒藥物和治療藥物。國內(nèi)外有關家蠶微粒子病防控的藥物研究有很多，并取得了一定的研究成果。本文從家蠶微粒子病防控藥物的種類、作用效果及作用機理方面的研究進展進行綜述，希望為蠶業(yè)生產(chǎn)及科研上防治家蠶微粒子病提供理論依據(jù)。

1 消毒藥物

1.1 消毒藥物的種類

蠶業(yè)生產(chǎn)上用于防控家蠶微粒子病的消毒藥主要為氯制劑和醛制劑兩種。氯制劑主要包括：漂白粉、漂白精、二氯異氰脲酸鈉、三氯異氰脲酸等，其中三氯異氰脲酸和二氯異氰脲酸鈉可以作為煙熏劑使用；醛制劑主要包括甲醛溶液、多聚甲醛粉、聚甲醛煙熏劑。

1.2 主要幾種消毒藥物的機理及作用效果

1.2.1 氯制劑的作用機理及作用效果 氯制劑目前是蠶業(yè)生產(chǎn)上使用最廣泛、種類最多的一種消毒劑。氯制劑溶于水后產(chǎn)生未解離的次氯酸，次氯酸不帶電荷，分子量小，容易侵入病原微生物細胞內(nèi)與蛋白質(zhì)發(fā)生氧化作用，破壞磷酸脫氫酶，使糖代謝失調(diào)從而導致病原死亡。次氯酸的化學性質(zhì)不穩(wěn)定，很快分解釋放出新生態(tài)氧和氯氣，新生態(tài)氧與病原微生物細胞原漿結(jié)合，將病原微生物細胞蛋白質(zhì)氧化，引起病原微生物死亡。氯制劑中的氯本身也可使病原微生物細胞膜的通透性發(fā)生改變，并能與其細胞膜蛋白結(jié)合，干擾細胞新陳代謝，引起病原微生物死亡［1］。

目前在蠶業(yè)生產(chǎn)上常用的含氯消毒劑主要有漂白粉、漂粉精、二氧化氯、二氯異氰脲酸鈉、三氯異氰脲酸、次氯酸鈉等。對于某些氯制劑溶液呈弱酸性或堿性不強的情況，在蠶業(yè)生產(chǎn)消毒時常用堿性物質(zhì)與該氯制劑復配后使用效果更佳，如三氯異氰脲酸與碳酸氫鈉或磷酸三鈉混合使用，二氯異氰脲酸鈉與石灰等強堿性物質(zhì)混合使用，既可以增強氯制劑的溶解性，又可以增強消毒劑殺滅病原的效果。另外，三氯異氰脲酸和二氯異氰脲酸鈉也常常作為煙熏消毒劑使用，能夠消毒蠶室的整個空間，對于空間不大且密閉的蠶房消毒效果最佳。

以上幾種含氯消毒劑對家蠶微孢子的殺滅效果，在國內(nèi)已有不少研究。黃旭華等［2］用漂白粉精、優(yōu)氯凈、強氯精、次氯酸鈉對家蠶微孢子進行殺滅試驗，發(fā)現(xiàn)4種消毒劑對微孢子的消毒效果比較一致，有效濃度為0.5%時于10 min內(nèi)均可達到殺滅效果。黃旭華等［3］用二氧化氯對家蠶微粒子孢子進行消毒殺滅試驗，發(fā)現(xiàn)二氧化氯對家蠶微孢子蟲具有強烈的殺滅作用，在懸浮液中對游離微孢子蟲直接作用的情況下二氧化氯濃度在30 mg/mL時作用6 min即可完全殺滅家蠶微孢子蟲，明顯優(yōu)于漂白粉。

王彥文等［4］研制出以氯制劑為主劑，配以高效增效劑的復合型消毒藥劑廣消威，當有效成分為0.1 %時，對家蠶微孢子的消毒效果達100%，明顯優(yōu)于漂白粉。廣消威能破壞家蠶微孢子的外部形態(tài)和內(nèi)部構(gòu)造，由于微孢子的結(jié)構(gòu)遭到破壞，導致大量可溶性糖外滲，微孢子蛋白一級結(jié)構(gòu)也遭到破壞，分解成一些小分子蛋白質(zhì)，大分子蛋白質(zhì)的數(shù)量變少，使微孢子失去發(fā)芽能力而不能浸染家蠶細胞。

王玉華等［5］用亞迪欣（主要成分為三氯異氰脲酸、磷酸三鈉）對家蠶微孢子進行消毒試驗，3 200倍溶液對家蠶微孢子蟲消毒5 min可以達到100%的消毒效果，該產(chǎn)品含有磷酸三鈉，可以加速三氯異氰脲酸的溶解，使產(chǎn)品變得更穩(wěn)定有效。彭仕培等［6］用復方漂粉精（消毒王）進行試驗，將消毒劑配成濃度為0.56%的消毒液，對家蠶微粒子的消毒效果達100%，其消毒效果優(yōu)于有效氯為1%的漂白粉溶液。

黃旭華等［7］利用一種電解生成的含氯消毒液對家蠶病原體進行殺滅效果試驗，發(fā)現(xiàn)以含有效氯980 mg/L的該消毒液分別作用15 min和6 min，對懸液內(nèi)蘇云金桿菌和白僵菌孢子可完全殺滅；用含有效氯為392 mg/L的該消毒液作用8 min，對懸液內(nèi)家蠶微孢子達到完全殺滅的效果；用含有效氯392 mg/L的該消毒液作用15 min，對家蠶核型多角體病毒能達到完全殺滅。試驗證明該電解含氯消毒液對家蠶常見致病微生物殺滅效果較好。

1.2.2 醛制劑的作用機理及效果 常用的甲醛劑型是液態(tài)的福爾馬林和固態(tài)的甲醛。甲醛具有很強的還原性，可以奪取家蠶微孢子內(nèi)的氧，還能與微孢子內(nèi)蛋白質(zhì)中的氨基起作用，導致家蠶微孢子蛋白質(zhì)變性從而達到殺滅微孢子的目的。福爾馬林即甲醛的飽和水溶液，一般含35%～40%甲醛，可以用于蠶室、蠶具消毒，還可以用于蠶種表面消毒，能夠有效殺滅微粒子孢子、多角體病毒、白僵菌、綠僵菌、曲霉菌等常見家蠶致病原。試驗表明2%福爾馬林與石灰水混合制成的消毒液對微粒子孢子有很好的消毒效果，大大縮短了消毒時間［8］。聚甲醛可以用于蠶體蠶座消毒，如以多聚甲醛為主要成分制成的“防病1號”，即我們常說的“小防”、“大防”，可以用于小蠶和大蠶的蠶體消毒。用多聚甲醛做成煙熏消毒劑，也可以起到很好的消毒效果。

2 治療藥物

2.1 治療藥物的種類

家蠶微粒子病是目前能夠確切證明可以利用藥物治療的兩種蠶病之一（另一種是細菌病），國內(nèi)外學者為開發(fā)動物微孢子蟲病治療藥物進行了諸多研究。Ting H.Hsiao 等［9］于1973年發(fā)現(xiàn)了苯來特對象鼻蟲微粒子病具有明顯治療作用后，科研人員先后發(fā)現(xiàn)了其他化學藥物對家蠶微粒子病有一定的治療作用，如： 多菌靈、阿苯達唑、青蒿末、庫利納普、煙曲霉素、甲基托布津、茴香霉素、德拉吉爾、哈萊物、特里霍波爾、苯萊特、哈霉素以及磺胺脒等，其中多菌靈經(jīng)過大量的試驗和應用，證明其對家蠶微粒子病有很好的治療效果，并由廣東省農(nóng)科院農(nóng)產(chǎn)品加工與蠶業(yè)研究所于1979年開發(fā)成為市場產(chǎn)品“防微靈”一直沿用至今，主要用于對桑園桑葉的噴灑吸收，家蠶食下添藥桑葉能達到治療家蠶微粒子病效果，該藥對國內(nèi)防治家蠶微粒子病發(fā)揮了巨大作用［10 ］。

2.2 主要幾種治療藥物的機理及作用效果

2.2.1 苯并咪唑類藥物的機理及作用效果 防微靈的有效成分為多菌靈，其治療家蠶微粒子病的機理是抑制病原體在蠶體內(nèi)的營養(yǎng)增殖。多菌靈屬于苯并咪唑類藥物，研究發(fā)現(xiàn)微孢子的β-微管蛋白基因是苯并咪唑類藥物的靶基因，在苯并咪唑類藥物的作用下，β-微管蛋白基因可能會產(chǎn)生趨向性，通過把苯并咪唑類藥物結(jié)合到微孢子的β-微管蛋白上，阻止微孢子細胞的有絲分裂，從而抑制微孢子的分裂增殖。

劉仕賢等［11］的研究結(jié)果表明，防微靈對家蠶微粒子病的治療效果主要表現(xiàn)在對家蠶微孢子發(fā)育過程中裂殖體增殖階段的抑制作用，這一階段是在微孢子發(fā)芽后24～72 h之間。楊彪［12］使用多菌靈為原料，自行開發(fā)了可以增加粘附吸收的輔劑，二者混合，制成“克微寶”，能夠有效增加桑葉對多菌靈的吸收，治療效果佳。

錢永華等［13］用防微靈、蒿甲醚、三眠素和硫酸喹嚀對家蠶微粒子病進行治療試驗，這4種藥物均對家蠶微孢子體外的發(fā)育、增殖產(chǎn)生出不同程度的抑制效果，作用效果最為敏感的時期為家蠶微孢子發(fā)育過程中裂殖體增殖至微孢子母細胞形成期（接種后24～72 h）。

魯興萌等［14］用丙硫苯咪唑?qū)倚Q微粒子孢子進行試驗，發(fā)現(xiàn)用5.6×105mL-孢子的家蠶微孢子懸液（8 400個孢子/頭蠶）的濃度以下添食家蠶時，丙硫苯咪唑能很好地抑制微粒子孢子的增殖。沈中元等［15］開發(fā)出一種以丙硫苯咪唑為主要成分的可濕性粉劑“克微一號”，試驗用濃度為1×105個/mL的微孢子蟲液涂抹在桑葉上，然后給試驗蠶添毒約6 h，當使用質(zhì)量濃度高于0.5 mg/mL時，可以獲得完全治愈的效果，發(fā)現(xiàn)該藥物不僅對食下感染的微粒子病病蠶有很好的治療效果，而且對經(jīng)卵傳染的微粒子病也具有較好的治療作用，顯示出該藥治療微粒子病有很好的市場前景。楊瓊等［16］用阿苯達唑進行家蠶微粒子病治療試驗，以防微靈主劑多菌靈實用濃度作為治療效果對照，發(fā)現(xiàn)阿苯達唑的治療效果與多菌靈接近。

多菌靈和丙硫苯咪唑都屬于苯并咪唑類，都對家蠶微孢子有很好的治療作用，它們在化學結(jié)構(gòu)上極為相似，都含有苯并咪唑環(huán)，從構(gòu)效關系上推測，含有苯并咪唑環(huán)的化學藥物可能對家蠶微粒子孢子都有一定的治療效果。因此，在研究防治家蠶微粒子病的藥物篩選過程中，我們可以沿著這樣思路，從苯并咪唑類化學藥物中篩選出防治家蠶微粒子病的新藥。

2.2.2 青蒿素類藥物的作用機理及作用效果 劉正紅等［17］用“原蟲凈”進行試驗，使用的“原蟲凈”是以青蒿素為原料的藥物。發(fā)現(xiàn)添食“原蟲凈”后，蠶體無論原來的帶毒程度如何，各階段的檢測均為陰性，而不添食對照區(qū)，在蛾期或多或少的存在微粒子孢子，說明“原蟲凈”在蠶業(yè)生產(chǎn)上有明顯的防治微粒子病效果。

李文桂等［18］試驗證明二氫青蒿素治療后卡氏肺孢子蟲肺炎（PCP）大鼠模型肺部病理學變化，試驗大鼠用60 mg/kg二氫青蒿素治療后，觀察到肺組織炎癥明顯減輕，中卡氏肺孢子蟲包囊數(shù)目顯著減少，滋養(yǎng)體表膜和核膜破裂，Pc包囊中也出現(xiàn)空泡，囊內(nèi)小體變性壞死，表明二氫青蒿素可殺死卡氏肺孢子蟲滋養(yǎng)體和包囊，減輕肺組織的炎癥反應。臨床醫(yī)學表明，青蒿素對瘧原蟲有很好的治療效果，其作用機理可能是瘧原蟲破壞大鼠血液紅細胞并吞噬其血紅蛋白后，瘧原蟲體內(nèi)的血紅蛋白酶，主要含半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶將吞噬的血紅蛋白降解為游離型氨基酸，并釋放出游離的二價鐵離子和血紅素；二價鐵離子能夠催化二氫青蒿素的過氧橋致使其裂解，產(chǎn)生出大量以青蒿素炭原子為中心的活性氧和自由基，它們將修飾或抑制瘧原蟲生長所需要的大分子物質(zhì)或破壞瘧原蟲生物膜結(jié)構(gòu)，導致瘧原蟲死亡。

以上文獻表明青蒿素類藥物對家蠶微孢子和肺孢子蟲、瘧原蟲都一定的治療效果，家蠶微孢子蟲和肺孢子蟲、瘧原蟲都具有原蟲相似的生理特性。這或許可以讓我們找到一個研究防治微粒子病藥物的新方向，同一種藥物對相似的病原是否都有一定的作用效果？對家蠶微孢子蟲相似的原蟲類起作用的藥物是否對家蠶微孢子蟲有一定的治療效果？我們可以考慮從有效作用于類似家蠶微孢子病原的藥物中篩選出防治家蠶微粒子病的藥物。

3 展望

3.1 篩選與研發(fā)更合適的藥物應用于家蠶微粒子病防治

在蠶業(yè)已經(jīng)使用一系列的消毒藥物應用于環(huán)境消毒預防家蠶微粒子病的發(fā)生；也篩選出一些有效的治療藥物應用于治療家蠶微粒子病。不同的消毒藥劑具有不同的性能，如含氯消毒劑的有效性（殺菌活力）比較全面，但穩(wěn)定性比較差，腐蝕性較強；醛制劑穩(wěn)定性好，腐蝕性低，但有效性較差，有強烈刺激性。針對不同的消毒對象，需要選擇不同的消毒劑并應用不同的消毒方式，才取得較好的消毒效果。在應用化學藥物治療家蠶微粒子病方面，選擇適合的使用藥物方法對治療效果至關重要，現(xiàn)行常用的方法是在桑園噴灑藥物溶液，使桑葉吸收藥物，再通過飼喂家蠶達到治療效果，但該方法增加了養(yǎng)蠶成本；另一種方法是利用桑葉直接浸泡于藥液中，晾干后飼喂家蠶，但該方法操作繁瑣，蠶座濕度大，容易引起其他病害發(fā)生。因此，目前迫切需要篩選性能更佳消毒劑和治療藥物，并研發(fā)出適合藥物使用方式應用于家蠶微粒子病防治。

3.2 添加藥物，綜合防治多種蠶病

家蠶在生長過程中，感染微粒子孢子的同時，還可能感染各類細菌、病毒，或者是先感染了細菌、病毒，家蠶體質(zhì)下降后，更容易感染微粒子孢子，使家蠶微粒子病防治變得更加復雜。如果使用單一措施防治家蠶微粒子病，沒有對家蠶細菌病、病毒病進行防治，那么蠶體由于感染了細菌或病毒造成抵抗力下降，體質(zhì)變?nèi)?，治療微粒子病的難度會加大。因此，在開發(fā)治療家蠶微粒子病藥物的同時應該考慮其他蠶病發(fā)生的可能，在防治微粒子病藥物中添加抗細菌病或抗病毒病藥物，同時防治多種蠶病，蠶體健壯的同時抵抗力也增高，可以提高防治家蠶微粒子病的效果。

3.3 中西藥聯(lián)合使用或是今后微粒子病防治的突破口

在人類防病和畜牧業(yè)疫病控制的過程中，中西藥聯(lián)合使用起到更好的防病效果，那么在蠶業(yè)生產(chǎn)上，使用中藥和西藥聯(lián)合使用也有可能會得到更好的防病效果，在開發(fā)防治家蠶微粒子病藥物的時候，我們可以考慮中西藥聯(lián)合使用作為一個研究方向，尋找新的突破口。

［1］任凱，解猛，姜文漢，等.常用化學消毒劑的作用機理［J］.中國衛(wèi)生工程學，2004，3（1）：55-56.

［2］黃旭華，朱方容，石美寧，等.4種蠶業(yè)常用含氯消毒劑的性能比較試驗［J］.廣西農(nóng)業(yè)科學，2008，39（2）：243-247.

［3］黃旭華，陸瑞好，石美寧，等.二氧化氯（ClO2）在桑葉消毒上的應用研究［J］.廣西農(nóng)業(yè)科學，2010，41（7）：714-718.

［4］王彥文，牟志美，高繪菊，等.廣消威對家蠶微孢子的消毒效果及機理研究［J］.蠶業(yè)科學，2002，28（2）：164-167.

［5］王玉華，陳國瑚，黃可威，等.亞迪欣對家蠶病原體的消毒效果研究［J］.蠶業(yè)科學，2003，29（1）：72-77.

［6］彭仕培，萬永繼.復方漂粉精（消毒王）對家蠶病原微生物作用的顯微觀察及消毒效果試驗［J］.四川蠶業(yè)，2008，（36）4：13-18.

［7］黃旭華，朱方容，王珍，等.一種電解生成含氯消毒液對家蠶病原體的殺滅效果［J］.中國消毒學雜志，2011，28（4）：412-417.

［8］李榮琪，馬德，陸雪芳.福爾馬林的幾種實用消毒方法［J］.江蘇蠶業(yè)，1982，4（4）：8-13.

［9］Ting H.Hsiao，Catherine Hsiao.A novel drug for controlling a microsporidan disease of the alfalfa weevil［J］.J.Invertebr.Pathol.1973，22：303-304.

［10］貢成良，朱軍貞，潘中華，等.家蠶微粒子病藥物治療研究初探［J］.江蘇蠶業(yè)，1999，21（2）：9-12.

［11］劉仕賢，方定堅，廖森泰，等.防微靈治療家蠶微粒子病研究［J］.廣東農(nóng)業(yè)科學，1993，25（4）：40-43.

［12］楊彪.家蠶微粒子病添食治療藥物“克微寶”研究與應用情況［J］.四川蠶業(yè)，1998，26（1）：16-18.

［13］錢永華，王建芳，黃金山，等.幾種化學藥劑對家蠶微孢子蟲在家蠶BmN 細胞中發(fā)育、增殖的抑制［J］.廣西蠶業(yè)，2001，38（4）：1-7.

［14］魯興萌，金偉，五一舟，等.丙硫咪唑等藥劑對家蠶微粒子病的治療作用［J］.中國蠶業(yè)，2000，21（1）：19-21.

［15］沈中元，徐莉，張志芳，等.克微 1 號治療家蠶微粒子病研究［J］.中國蠶業(yè)，1997，18（3）：11-13.

［16］楊瓊，邢東旭，廖森泰，等.家蠶微粒子病治療藥物的研究［J］.廣東蠶業(yè)，2010，44（3）：35-37.

［17］劉正紅，楊發(fā)祥.“原蟲凈”預防家蠶微粒子病的試驗初報［J］.蠶桑茶葉通訊，2007，31（5）：5.

［18］李文桂，陳雅棠，劉成偉，等.雙氫青蒿素治療大鼠卡氏肺孢子蟲肺炎后的肺臟病理變化觀察［J］.動物醫(yī)學進展，2004，25（1）：4-7.

C；

1006-1657（2015）03-0061-5

2015-4-10；

2015-5-22

廣西壯族自治區(qū)蠶業(yè)科學院青年基金項目（No.201306）。

黃深惠（1983—），男，碩士，農(nóng)藝師，主要從事蠶藥研制與蠶病防治。E-mail：shhuang1032@126.com