宋春萍　劉和平

摘要：目的 對(duì)固相凝集試驗(yàn)檢測(cè)血小板抗體的臨床價(jià)值進(jìn)行探討。方法 將我院2012年1月～2013年5月血液科收治的血小板減少患者112例作為臨床觀察對(duì)象并進(jìn)行回顧性分析，探討固相凝集試驗(yàn)檢測(cè)血小板抗體的臨床價(jià)值。結(jié)果 本組患者中血小板抗體呈陽(yáng)性患者共79例，占比為70.53%，其中再生障礙性貧血19例，急性白血病15例，慢性白血病9例，骨髓異常增生6例；另外血小板減少癥30例且自身抗體、同種異型抗體以及同種異型抗體與自身抗體時(shí)都出現(xiàn)了陽(yáng)性表現(xiàn)，其他癥狀均表現(xiàn)為單一同種異型抗體陽(yáng)性。結(jié)論 固相凝集試驗(yàn)檢測(cè)血小板抗體對(duì)于血小板減少患者的治療有著十分重要的意義，可以此分辨患者出現(xiàn)的不同血小板抗原刺激，在診斷治療中可作為重要臨床參考。

關(guān)鍵詞：固相凝集試驗(yàn)；血小板抗體；血小板抗原

血小板抗原存在于人類血小板之上，對(duì)于不同個(gè)體而言這些抗原會(huì)表現(xiàn)出一定的多態(tài)性，正是由于上述特性導(dǎo)致了擁有不同血小板抗原的群體在進(jìn)行相互輸血時(shí)會(huì)出現(xiàn)較為嚴(yán)重的免疫反應(yīng)，從而造成輸血無(wú)效以及血小板減少癥狀[1]。我院對(duì)2012年1月～2013年5月血液科收治的血小板減少患者112例進(jìn)行了回顧性分析，采取固相凝集試驗(yàn)檢測(cè)患者血小板抗體情況，取得了一定的成果現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取我院2012年1月～2013年5月血液科收治的血小板減少患者112例作為臨床觀察對(duì)象，該組患者中男50例，女62例，年齡7～81歲，平均年齡為（42.3±4.7）歲。造成血小板減少的主要致病因素為血小板減少癥、白血病以及障礙性貧血等。

1.2方法

1.2.1實(shí)驗(yàn)儀器及試劑 TD-3B型血清多用離心機(jī)；血小板抗體檢測(cè)試劑盒以及血小板抗體篩檢細(xì)胞。

1.2.2實(shí)驗(yàn)步驟 ①樣本預(yù)處理。收集患者新鮮靜脈血3ml，采用離心機(jī)進(jìn)行離心（離心時(shí)間為10min，轉(zhuǎn)速參數(shù)設(shè)定為200r/min），離心完成后取上清液進(jìn)行抗體篩檢。之后進(jìn)行血小板提取，收集抗凝新鮮全血3ml作為樣本，采用離心機(jī)離心（離心時(shí)間為10min，轉(zhuǎn)速參數(shù)設(shè)定為200r/min），取上層血漿進(jìn)行混合，將濃度調(diào)節(jié)為是適宜范圍內(nèi)，將樣品于20～25℃下保存，然后進(jìn)行檢測(cè)。②血小板抗體檢測(cè)。以固相凝集試驗(yàn)對(duì)患者血小板抗體進(jìn)行檢測(cè)。血小板同種/同種異型抗體檢測(cè)：在將血小板抗體篩檢細(xì)胞置于反應(yīng)孔底部（采用離心固定），將患者血清加入其中并置入抗人IgG[2]，離心，取樣，觀察結(jié)果；自身游離血小板抗體檢測(cè)：將患者血小板抗體置于反應(yīng)孔底部（采用離心固定），置入患者血清反應(yīng)，加入指示紅細(xì)胞以及抗人IgG，離心，取樣，觀察結(jié)果；自身結(jié)合血小板抗體檢測(cè)：將患者血小板抗體懸液置入反應(yīng)孔底部（采用離心固定），離心，取樣，觀察結(jié)果。

1.3結(jié)果判定 陽(yáng)性：若指示紅細(xì)胞在反應(yīng)孔底部平鋪則為陽(yáng)性；指示紅細(xì)胞與反應(yīng)孔底部部分結(jié)合，但結(jié)合區(qū)域較陰性更大即為弱陽(yáng)性。陰性：指示紅細(xì)胞并未與反應(yīng)孔底部結(jié)合，在中央位置聚集即為陰性。

2 結(jié)果

見表1。

從表1可以看出由血小板減少癥導(dǎo)致的血小板減少患者無(wú)論是自身抗體、同種異型抗體還是同種異型抗體與自身抗體同時(shí)存在時(shí)都出現(xiàn)了陽(yáng)性表現(xiàn)，而其他病癥表現(xiàn)為單一同種異型抗體陽(yáng)性。

3 討論

人類血小板抗原主要分為兩類，一類是為非特異性抗原或血小板相關(guān)抗原，與AB0血型系統(tǒng)和HLA有關(guān)，另一類是血小板特異的抗原[3]。人類血小板特異性抗原（HPA）有5個(gè)血型系統(tǒng)和l0個(gè)抗原，為HPA-1（Zw）、HPA-2（Ko系統(tǒng)）、HPA-3、HPA-4、HPA-5[4]。正是由于這些特意性抗原的存在導(dǎo)致了不同類型患者相互輸血時(shí)會(huì)出現(xiàn)排異反應(yīng)并導(dǎo)致血小板減少癥狀。

從研究結(jié)果來(lái)看本組患者中血小板抗體呈陽(yáng)性患者共79例，占比為70.53%，與相關(guān)文獻(xiàn)及報(bào)道[5]保持一致。其中再生障礙性貧血19例，急性白血病15例，慢性白血病9例，骨髓異常增生6例；另外血小板減少癥30例且自身抗體、同種異型抗體以及同種異型抗體與自身抗體時(shí)都出現(xiàn)了陽(yáng)性表現(xiàn)，其他癥狀均表現(xiàn)為單一同種異型抗體陽(yáng)性。經(jīng)過(guò)分析認(rèn)為患者之所以出現(xiàn)血小板減少主要是由于血小板輸注過(guò)多導(dǎo)致，這會(huì)對(duì)免疫系統(tǒng)造成刺激從而使患者產(chǎn)生抗體，若抗體分泌過(guò)多則會(huì)與血小板膜糖蛋白融合，并使得補(bǔ)體系統(tǒng)被激活，這將導(dǎo)致血小板功能紊亂并使得血小板減少。

采取固相凝集試驗(yàn)檢測(cè)血小板抗體主要是通過(guò)指示紅細(xì)胞形態(tài)進(jìn)行判別。實(shí)驗(yàn)中將血小板懸液離心后將會(huì)于反應(yīng)孔底部產(chǎn)生血小板單層，然后置入血清并孵育。若血清中存在血小板抗體則會(huì)與血小板單層產(chǎn)生結(jié)合作用，然后加入指示紅核細(xì)胞將能夠與之結(jié)合[6]。結(jié)合上述研究結(jié)果可以看出血小板減少癥所導(dǎo)致的血小板減少患者數(shù)量較多，其中陽(yáng)性患者共30例，陽(yáng)性率為78.95%。此類患者出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)主正是由于自身免疫病導(dǎo)致[7]，當(dāng)患者自身產(chǎn)生抗體時(shí)會(huì)造成血小板受到破壞，即便進(jìn)行正常輸血也無(wú)法達(dá)到治療目的甚至?xí)又孛庖咦饔?，給患者的生命安全帶來(lái)一定程度的威脅[8]。故此借助固相凝集試驗(yàn)對(duì)血小板抗體進(jìn)行檢測(cè)則能夠避免無(wú)效輸血情況并排除自身免疫反應(yīng)，以此來(lái)保證患者治療的適應(yīng)性以及安全性。

綜上固相凝集試驗(yàn)檢測(cè)血小板抗體可作為患者治療方案制定參考并分辨出患者出現(xiàn)的不同血小板抗原刺激，可提高治療安全性并可作為診斷參考依據(jù)，具有重要的臨床價(jià)值，值得推廣。

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編輯/許言