劉驍，謝晶，黃碩琳

(上海海洋大學(xué)食品學(xué)院，上海水產(chǎn)品加工及貯藏工程技術(shù)中心，上海，201306)

魚(yú)類因味道鮮美、營(yíng)養(yǎng)豐富，不僅是人們餐桌上的美味佳肴，也是人們?nèi)粘Ｉ钪袛z取優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)的來(lái)源之一。隨著生活品質(zhì)提高，消費(fèi)者對(duì)魚(yú)類鮮活程度的要求也越高，因此我國(guó)活魚(yú)運(yùn)輸市場(chǎng)份額不斷加大。然而由于產(chǎn)銷地域跨度大、?；罴夹g(shù)不成熟以及運(yùn)輸設(shè)備配置不完善等原因，導(dǎo)致活魚(yú)運(yùn)輸成本高、遠(yuǎn)距離運(yùn)輸耗損率大(超過(guò)10%)以及海水活魚(yú)運(yùn)輸難等問(wèn)題［1-2］，大大制約了活魚(yú)銷售市場(chǎng)的發(fā)展。

目前魚(yú)類運(yùn)輸方式分為有水運(yùn)輸和無(wú)水運(yùn)輸。有水運(yùn)輸主要通過(guò)增加水中溶氧量、適當(dāng)降低水溫、改變鹽度和輔助麻醉等方式提高運(yùn)輸量和存活率［3-5］。無(wú)水運(yùn)輸是一種新型的活魚(yú)運(yùn)輸方法，首先通過(guò)物理或化學(xué)方法使魚(yú)類進(jìn)入休眠狀態(tài)，然后在無(wú)水或霧態(tài)狀態(tài)下進(jìn)行運(yùn)輸［6-8］。而無(wú)論有水或無(wú)水運(yùn)輸都存在一定的缺陷，有水運(yùn)輸由于設(shè)備配置和包裝方式等原因出現(xiàn)缺氧、水質(zhì)惡化以及晃動(dòng)引起魚(yú)體受損，因此較適宜中短途運(yùn)輸;無(wú)水運(yùn)輸物理誘導(dǎo)休眠法技術(shù)不成熟且成本相對(duì)較高，而化學(xué)法主要通過(guò)麻醉劑誘導(dǎo)，市售前需進(jìn)行休藥且存在一定安全風(fēng)險(xiǎn)。因此，開(kāi)發(fā)新的魚(yú)類保活運(yùn)輸方法，確保其在運(yùn)輸和銷售過(guò)程中的?；?、食用安全，是實(shí)現(xiàn)漁業(yè)現(xiàn)代化亟待解決的問(wèn)題。本文綜述了國(guó)內(nèi)外主要應(yīng)用的運(yùn)輸方法，分析總結(jié)了影響魚(yú)類?；钸\(yùn)輸質(zhì)量的主要因素、產(chǎn)生的應(yīng)激反應(yīng)及其研究方法。

1 魚(yú)類?；钸\(yùn)輸?shù)闹饕椒?/h2>

高密度、低死亡率的魚(yú)類運(yùn)輸方法，一直是魚(yú)類保活研究的重點(diǎn)和難點(diǎn)，目前國(guó)內(nèi)外魚(yú)類?；钸\(yùn)輸?shù)闹饕椒ㄓ袃羲?、增氧法、降溫法和麻醉法?/p>

1.1 凈水法

水質(zhì)是魚(yú)類有水?；钸\(yùn)輸中的關(guān)鍵，魚(yú)類的呼吸代謝使水質(zhì)逐漸惡化，如不及時(shí)采取措施會(huì)導(dǎo)致魚(yú)類大量死亡。運(yùn)輸時(shí)可在箱體底部覆蓋適量的膨脹珍珠巖或活性炭可吸附魚(yú)類代謝產(chǎn)生的廢物以凈化水質(zhì)。此外，在一些觀賞魚(yú)的運(yùn)輸中可以嘗試使用硝化細(xì)菌以降解水質(zhì)中有毒氨類物質(zhì)，Dhanasiri等［9］在斑馬魚(yú)的運(yùn)輸中嘗試使用硝化細(xì)菌能夠有效地降低氨類毒素提高水質(zhì)，產(chǎn)品的存活率高達(dá)100%。

1.2 增氧法

增氧法是目前最常用、便捷的魚(yú)類商業(yè)運(yùn)輸方法，其主要存在的形式有2種:曝氣和包裝充氧。曝氣是有水運(yùn)輸中常用增氧措施，既能維持水中溶氧量，又可降低CO2濃度。目前常用的曝氣方式主要有:壓縮氣態(tài)氧、液態(tài)氧、攪拌器和供氧機(jī)等，運(yùn)輸時(shí)根據(jù)距離、時(shí)間選擇曝氣方式，如中短途可選用壓縮氣態(tài)氧和液態(tài)氧、高密度長(zhǎng)時(shí)間的運(yùn)輸可將將供氧機(jī)和攪拌器結(jié)合使用［10］。包裝充氧的使用可追溯到20世紀(jì)50年代，首次使用于觀賞魚(yú)的運(yùn)輸［11］，后來(lái)逐漸發(fā)展成熟，其主要過(guò)程是在排盡空氣的包裝袋中加入適量的水和活魚(yú)，充滿氧氣后封口運(yùn)輸。運(yùn)輸時(shí)為防止包裝袋破損，袋外常用泡沫箱保護(hù)。

1.3 降溫法

低溫狀態(tài)下魚(yú)類呼吸和代謝速率緩慢，從而提高運(yùn)輸存活率。當(dāng)溫度降低到某一點(diǎn)時(shí)魚(yú)類會(huì)出現(xiàn)休眠狀態(tài)，生命活動(dòng)達(dá)到最低，此時(shí)可對(duì)其進(jìn)行無(wú)水?；钸\(yùn)輸。在無(wú)水保活時(shí)需要合適的降溫速率和時(shí)間，避免溫度大幅變化導(dǎo)致的魚(yú)類細(xì)胞功能紊亂。白艷龍等［7］研究發(fā)現(xiàn)，黃顙魚(yú)在2℃純氧狀態(tài)下可無(wú)水?；?4 h。Zeng等［12］研究發(fā)現(xiàn)，鯽魚(yú)以1℃/h速率降溫可以保護(hù)乳酸脫氫酶和異檸檬酸脫氫酶的活性，無(wú)水?；顣r(shí)間可達(dá)到24 h。戴志遠(yuǎn)等［13］研究表明，活紫貽用真空包裝并置于4℃保藏可以存活9 d。劉偉東［14］研究表明，在3℃條件下大菱鲆無(wú)水保活60 h，存活率達(dá)95%。

1.4 麻醉法

魚(yú)類運(yùn)輸常使用化學(xué)麻醉劑降低其呼吸和代謝強(qiáng)度，抑制其中樞神經(jīng)以緩解操作刺激引起的應(yīng)激反應(yīng)，減少對(duì)魚(yú)的損傷，提高運(yùn)輸質(zhì)量。鮮活水產(chǎn)品運(yùn)輸中常用的麻醉劑有間氨基苯甲酸乙酯甲磺酸鹽(MS-222)、丁香酚和CO2。美國(guó)允許在食用魚(yú)中使用的麻醉劑只有MS-222，且休藥21 d后才允許在市場(chǎng)上銷售［15］。Pramod 等［16］研究得出，MS-222 能有效減緩運(yùn)輸中紫紅鯽的應(yīng)激反應(yīng)，提高運(yùn)輸存活率減少經(jīng)濟(jì)損失。丁香酚因高效、安全、成本低等優(yōu)點(diǎn)成為水產(chǎn)品新型運(yùn)輸麻醉劑。陳德芳等［17］研究表明，丁香酚可作為鯽魚(yú)的一種安全有效的麻醉劑。Velí?ek 等［18］研究表明，30 mg/L 丁香酚對(duì)鯰魚(yú)有明顯的鎮(zhèn)靜效果且無(wú)副作用。Hegyi等［19］研究顯示，虹鱒魚(yú)有水運(yùn)輸中使用丁香酚后，其血糖濃度和皮質(zhì)醇含量明顯下降。Mi等［6］研究發(fā)現(xiàn)，鯽魚(yú)經(jīng)過(guò)丁香酚麻醉，在8℃無(wú)水?；顣r(shí)間可達(dá)38 h，且肌肉質(zhì)量沒(méi)有改變，恢復(fù)后所有的應(yīng)激反應(yīng)也隨之消失。CO2達(dá)到一定濃度時(shí)對(duì)水產(chǎn)品也有麻醉效果，與其他麻醉劑相比優(yōu)點(diǎn)在于不需要休藥期。張恒等［8］研究發(fā)現(xiàn)，在10℃、CO2濃度為700 mg/L時(shí)，鯽魚(yú)無(wú)水?；顣r(shí)間可達(dá)15 h。

目前對(duì)于魚(yú)類有水運(yùn)輸?shù)难芯窟€不夠系統(tǒng)，通常只考慮2或3個(gè)影響因素進(jìn)行優(yōu)化運(yùn)輸方法，尤其針對(duì)不同魚(yú)種在不同運(yùn)輸條件下的禁食時(shí)間研究甚少，對(duì)不不同季節(jié)的魚(yú)類運(yùn)輸研究報(bào)道也較少。因此，綜合考察各因素對(duì)魚(yú)類生理的影響，進(jìn)而優(yōu)化得到有水運(yùn)輸方法對(duì)于保證運(yùn)輸后產(chǎn)品質(zhì)量和食用安全有重要意義。無(wú)水運(yùn)輸作為一種新型的魚(yú)類活體運(yùn)輸方式，其具有低成本、低損耗等優(yōu)點(diǎn)，成為今后魚(yú)類運(yùn)輸?shù)陌l(fā)展趨勢(shì)。

2 影響魚(yú)類?；钸\(yùn)輸質(zhì)量的主要因素

魚(yú)類生命活動(dòng)會(huì)極大地受周圍環(huán)境的影響，因此魚(yú)類?；钸\(yùn)輸?shù)年P(guān)鍵是使魚(yú)適應(yīng)運(yùn)輸環(huán)境或盡量延緩運(yùn)輸環(huán)境的惡化，以達(dá)到提高運(yùn)輸質(zhì)量目的。而影響魚(yú)類保活運(yùn)輸質(zhì)量的因素是多方面的，且互相聯(lián)系、互相影響，它們主要包括:魚(yú)體體質(zhì)、暫養(yǎng)、水質(zhì)和外力脅迫等［20-21］。

2.1 魚(yú)體體質(zhì)

不同種類的魚(yú)生活習(xí)性各異，對(duì)環(huán)境耐受程度也不同，如黑魚(yú)能適應(yīng)少水缺氧環(huán)境具有耐運(yùn)輸?shù)奶攸c(diǎn)，鯉魚(yú)較鰱魚(yú)在運(yùn)輸中不易受到驚嚇因此可減少物理?yè)p傷［22］。即使同種魚(yú)類也有苗體、幼體、新體和成體之分，相同運(yùn)輸量下耗氧量也不同，運(yùn)輸時(shí)應(yīng)根據(jù)不同生長(zhǎng)時(shí)期的魚(yú)類制定適宜的運(yùn)輸方案。運(yùn)輸存活率也由魚(yú)類自身健康狀況決定，待運(yùn)鮮活魚(yú)類應(yīng)盡量選擇體表無(wú)損傷、體質(zhì)健壯、無(wú)病有活力的個(gè)體［23］。

2.2 暫養(yǎng)

人工養(yǎng)殖或捕撈的魚(yú)不宜直接運(yùn)輸，需進(jìn)行一段時(shí)間的停餌暫養(yǎng)，一方面降低運(yùn)輸過(guò)程中魚(yú)類呼吸代謝延緩水質(zhì)惡化，另一方面可減少捕撈導(dǎo)致的應(yīng)激反應(yīng)，達(dá)到提高運(yùn)輸質(zhì)量的目的。有研究表明，日本竹莢魚(yú)在捕撈后經(jīng)過(guò)8 d左右的停餌蓄養(yǎng)可顯著增加運(yùn)輸存活率［24］。暫養(yǎng)環(huán)境條件主要由產(chǎn)品品種、運(yùn)輸方法決定，如淡水魚(yú)類暫養(yǎng)最佳密度在20～45 kg/m3，時(shí)間一般為2 d［23］，而低溫運(yùn)輸可在暫養(yǎng)期對(duì)魚(yú)類提前進(jìn)行低溫馴化，使其逐漸適應(yīng)低溫環(huán)境，減少溫度驟變帶來(lái)的有害應(yīng)激。

2.3 溫度

魚(yú)類為變溫動(dòng)物，其生理狀況受環(huán)境溫度的影響。每種水生生物都有相應(yīng)的生存溫度帶和最佳生存溫度，當(dāng)超出生存溫度范圍時(shí)，生物體會(huì)出現(xiàn)一系列的不良反應(yīng)，導(dǎo)致機(jī)體免疫力低下甚至死亡［25］;而在生存溫度范圍內(nèi)，隨著溫度的降低，魚(yú)類的呼吸代謝緩慢，耗氧量減少，CO2和氨類等代謝物產(chǎn)量降低，因此在活魚(yú)運(yùn)輸過(guò)程中常采用降溫措施以提高運(yùn)輸效率。研究表明運(yùn)輸水溫適當(dāng)降低10℃，多數(shù)水產(chǎn)品的耗氧量和氨類物質(zhì)產(chǎn)量降低50%［3］。Golombieski等［26］研究發(fā)現(xiàn)，在15℃條件下運(yùn)輸銀鯰魚(yú)的存活率明顯高于20℃和25℃下的。

2.4 水質(zhì)

水不僅是魚(yú)類進(jìn)行氣體和離子交換的媒介，也是其代謝廢物的稀釋劑，優(yōu)質(zhì)水是維持水生生物健康生存的必須條件。

(1)水的來(lái)源。運(yùn)輸用水的來(lái)源可以分為:養(yǎng)殖水、地表水、地下水和自來(lái)水。其中養(yǎng)殖水營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)過(guò)多不宜用于運(yùn)輸;地表水包括江、湖和海水等，其擁有良好的含氧量且CO2和N2也不高，但會(huì)增加養(yǎng)殖魚(yú)類感染致病菌和毒素幾率，因此適應(yīng)于在此水域捕撈的魚(yú)類運(yùn)輸;地下水溶氧量較低而CO2和N2偏高，可能還有H2S和Fe2+;自來(lái)水中含有氯氣對(duì)魚(yú)類體表和呼吸有一定危害［27］。因此運(yùn)輸時(shí)根據(jù)魚(yú)的來(lái)源選擇水源，并進(jìn)行一定的處理，如地下水或自來(lái)水作為暫養(yǎng)和運(yùn)輸用水應(yīng)提前進(jìn)行曝氣、日照等處理。

(2)鹽度。魚(yú)類生活的水環(huán)境常與體液是不等滲的，海水魚(yú)的體液滲透濃度低于它們生活的海水，而淡水魚(yú)的體液比介質(zhì)的滲透濃度高，所以對(duì)于魚(yú)類來(lái)說(shuō)滲透調(diào)節(jié)非常重要，魚(yú)體內(nèi)滲透調(diào)節(jié)失衡可引起機(jī)體功能紊亂，嚴(yán)重的甚至導(dǎo)致其死亡。由于淡水魚(yú)的高滲特性，在運(yùn)輸過(guò)程中比海水魚(yú)更易出現(xiàn)滲透調(diào)節(jié)失衡，因此常在運(yùn)輸水體中添加食鹽(NaCl)。研究發(fā)現(xiàn)鯉魚(yú)使用含9 g/L NaCl的水運(yùn)輸可明顯提高運(yùn)輸存活率［28］，大量研究表明，在運(yùn)輸水中適當(dāng)添加鹽有利于淡水魚(yú)運(yùn)輸［29-30］;但 Gomes等［31］研究發(fā)現(xiàn)，巨舌滑魚(yú)幼魚(yú)在塑料袋包裝運(yùn)輸時(shí)添加NaCl不僅沒(méi)有減少應(yīng)激還導(dǎo)致滲透壓調(diào)節(jié)障礙。因此淡水魚(yú)運(yùn)輸時(shí)應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況添加鹽。

(3)溶氧量。水生動(dòng)物主要以水為媒介呼吸代謝消耗O2，因此水中溶氧量對(duì)魚(yú)類運(yùn)輸起關(guān)鍵作用。水中的溶解氣體與空氣達(dá)到平衡時(shí)出現(xiàn)飽和狀態(tài)，當(dāng)溶解氣體大于平衡濃度時(shí)出現(xiàn)過(guò)飽和，魚(yú)在過(guò)飽和水中易得氣泡?。?2］。有研究表明，魚(yú)在氧飽和度達(dá)到200%的水中運(yùn)輸時(shí)不會(huì)導(dǎo)致氣泡病，但鰓蓋活動(dòng)頻率會(huì)降低，易造成血液中CO2含量升高，影響魚(yú)的正常生理狀態(tài)，因此運(yùn)輸?shù)淖罴讶苎趿繎?yīng)維持在或接近完全飽和［33］。隨運(yùn)輸時(shí)間延長(zhǎng)水中的溶氧量會(huì)不斷減少，CO2含量會(huì)不斷增加，當(dāng)CO2濃度達(dá)到一定程度時(shí)，魚(yú)自身排出CO2量會(huì)降低，引起高碳酸血癥和酸中毒，嚴(yán)重時(shí)導(dǎo)致其昏厥甚至死亡［27］。因此可根據(jù)運(yùn)輸時(shí)長(zhǎng)采取適當(dāng)降溫、曝氣等措施。

(4)氨氮物質(zhì)。魚(yú)在長(zhǎng)時(shí)間運(yùn)輸過(guò)程中，排泄物及黏液等不能及時(shí)凈化會(huì)造成水體渾濁，這些有毒物質(zhì)不僅使魚(yú)出現(xiàn)氨中毒，形成的懸濁物還會(huì)附著于魚(yú)的鰓部，造成魚(yú)體攝氧困難［21，28］。因此在遠(yuǎn)距離運(yùn)輸時(shí)可考慮中途換水或使用過(guò)濾裝置延緩水質(zhì)惡化。

2.5 外力脅迫

魚(yú)類在運(yùn)輸過(guò)程中還受一些外界脅迫如捕撈、搬運(yùn)、噪音和顛簸的影響。López等［34］研究表明，虹鱒魚(yú)經(jīng)過(guò)5 min搬運(yùn)，其體內(nèi)激素水平會(huì)升高并影響肝臟內(nèi)糖原和脂類生成，而要恢復(fù)正常水平至少需要8 h。Wysocki等［35］將歐洲鱸魚(yú)和鯉魚(yú)置于噪音環(huán)境中，經(jīng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)其皮質(zhì)醇急驟升高。運(yùn)輸密度也是制約活魚(yú)運(yùn)輸效率的重要因素。在有限的水質(zhì)條件下，高密度運(yùn)輸?shù)暮难蹩旌痛罅緾O2生成會(huì)導(dǎo)致魚(yú)類缺氧，且鱗片和黏液的物理磨損會(huì)使魚(yú)免疫力下降而引起疾病［36-37］，因此一定要慎重選擇活魚(yú)運(yùn)輸?shù)拿芏取?/p>

3 運(yùn)輸過(guò)程對(duì)魚(yú)體健康狀況的影響

魚(yú)類運(yùn)輸過(guò)程中環(huán)境的不斷變化如水質(zhì)惡化、溫度波動(dòng)及機(jī)械振動(dòng)等，會(huì)引起魚(yú)類的應(yīng)激反應(yīng)［4，21］。應(yīng)激反應(yīng)是生物體適應(yīng)生存環(huán)境得以生存和發(fā)展的基礎(chǔ)。適度應(yīng)激能提高魚(yú)類對(duì)環(huán)境的適應(yīng)能力;而過(guò)度應(yīng)激會(huì)導(dǎo)致機(jī)體行為和生理功能的紊亂。魚(yú)類在運(yùn)輸過(guò)程首先會(huì)產(chǎn)生游動(dòng)方式、呼吸頻率等行為變化，然后其生理產(chǎn)生相應(yīng)變化。

3.1 魚(yú)類行為的應(yīng)激反應(yīng)

魚(yú)類在運(yùn)輸過(guò)程中受到搬運(yùn)和晃動(dòng)會(huì)出現(xiàn)跳躍、躲避、側(cè)翻等行為，容易產(chǎn)生機(jī)體損傷或呼吸困難。通過(guò)觀察水生生物的行為變化可從側(cè)面反映一定的應(yīng)激程度［38］。然而，Nomura 等［39］通過(guò)水下錄像觀察大西洋小鮭魚(yú)在運(yùn)輸船中的行為變化，發(fā)現(xiàn)魚(yú)類游動(dòng)基本正常、偶爾出現(xiàn)回避行為，而血液中皮質(zhì)醇含量明顯增加，表明行為反應(yīng)與血液指標(biāo)反映的生理變化不一定存在正相關(guān)。Van等［40］以逃跑行為、呼吸頻率建立行為反應(yīng)參數(shù)，研究發(fā)現(xiàn)能在低氧環(huán)境及恢復(fù)過(guò)程中存活的虹鱒魚(yú)較為安靜，而死亡的虹鱒魚(yú)在死前會(huì)產(chǎn)生劇烈的躲避和掙扎，并且體內(nèi)皮質(zhì)醇和兒茶酚胺的含量明顯升高。

3.2 魚(yú)類生理的應(yīng)激反應(yīng)

魚(yú)類的生理應(yīng)激反應(yīng)主要分為3個(gè)階段:首先是由下丘腦-垂體-腎上腺和腎上腺髓質(zhì)組織構(gòu)成的神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)的變化，體內(nèi)釋放激素;其次，由上一階段釋放的激素引起滲透壓平衡、能量代謝和免疫系統(tǒng)的改變;最后是魚(yú)類適應(yīng)刺激，其生理機(jī)能恢復(fù)正常，或無(wú)法適應(yīng)應(yīng)激源出現(xiàn)生長(zhǎng)速率、繁殖能力和免疫能力降低等變化［41-43］。魚(yú)類生理應(yīng)激研究常用的量化指標(biāo)主要有血液生理生化、氧化應(yīng)激和免疫學(xué)等。

(1)血液生理生化指標(biāo)。研究魚(yú)類血液可以了解其在逆境條件下血液成分的變化，分析引起這些變化的因素，進(jìn)而了解魚(yú)類?；钸\(yùn)輸?shù)臋C(jī)制。魚(yú)類的血液成分會(huì)受到運(yùn)輸過(guò)程中的捕撈、搬運(yùn)、缺氧以及水質(zhì)惡化的影響［34-35，43］。在魚(yú)類應(yīng)激檢測(cè)與評(píng)價(jià)中應(yīng)用最多、研究最深的血液指標(biāo)是皮質(zhì)醇激素，其有高穩(wěn)定性且變化程度同應(yīng)激源的強(qiáng)度和持續(xù)時(shí)間呈正相關(guān)［44］，使其成為評(píng)價(jià)應(yīng)激反應(yīng)的首要指標(biāo)。彭士明等［45］以血液中皮質(zhì)醇含量評(píng)價(jià)運(yùn)輸密度對(duì)銀鯧幼魚(yú)的影響。血糖含量能反映能量代謝的變化，血糖變化時(shí)效較皮質(zhì)醇慢且易被測(cè)定［46］，因此血糖也被廣泛用于監(jiān)測(cè)魚(yú)類應(yīng)激反應(yīng)代謝變化，如鯽魚(yú)在適應(yīng)低溫?zé)o水環(huán)境時(shí)血糖濃度明顯下降［12］。此外，血細(xì)胞總數(shù)、血淋巴蛋白濃度、乳酸、脂類以及一些酶類的變化，某種程度也反映應(yīng)激過(guò)程中水產(chǎn)品生理功能的變化情況，常作為評(píng)價(jià)水產(chǎn)品應(yīng)激狀況的輔助指標(biāo)［21-12］。

(2)氧化應(yīng)激指標(biāo)?；钚匝?reactive oxygen species，ROS)對(duì)維持細(xì)胞活性起關(guān)鍵作用，但魚(yú)類在缺氧、高溫和惡劣的水環(huán)境下產(chǎn)生的大量ROS則因不能有效地分解，而使細(xì)胞產(chǎn)生損傷，導(dǎo)致氧化應(yīng)激反應(yīng)［47］。氧化應(yīng)激是研究魚(yú)類應(yīng)激反應(yīng)的重要分支，對(duì)于魚(yú)類運(yùn)輸導(dǎo)致氧化應(yīng)激的研究興起較晚，但發(fā)展比較快。目前氧化應(yīng)激主要以丙二醛、酶抗氧化系統(tǒng)及相關(guān)酶的基因表達(dá)(如超氧化物歧化酶、過(guò)氧化氫酶)、非酶抗氧化系統(tǒng)(如谷胱甘肽)等作為量化指標(biāo)，它能較好地反映魚(yú)類氧化應(yīng)激反應(yīng)狀況［48］。此外，細(xì)胞中ROS的積聚也是引起熱休克現(xiàn)象的重要因素，會(huì)增加應(yīng)激蛋白(heatshock protein，HSPs)的表達(dá)，而HSPs可以激活超氧化物歧化酶、過(guò)氧化氫酶等，同時(shí)可以抑制線粒體膜的去極化以減緩細(xì)胞的損傷［49］。HSPs還是細(xì)胞蛋白質(zhì)和脂類代謝的伴侶分子，一定程度上反映了魚(yú)體抵御不良刺激的能力，在這方面的研究主要以 HSP90、HSP70為主［50］。

(3)免疫學(xué)指標(biāo)。應(yīng)激反應(yīng)導(dǎo)致的機(jī)體免疫能力的改變是因?yàn)榧?xì)胞因子和激素的互相調(diào)控。研究人員已通過(guò)白細(xì)胞數(shù)目、溶菌酶活性、白細(xì)胞介素、腫瘤壞死因子和吞噬細(xì)胞的呼吸爆發(fā)等免疫學(xué)指標(biāo)對(duì)不同刺激下魚(yú)類的免疫功能變化進(jìn)行了大量研究［51-52］。這方面研究對(duì)揭示活魚(yú)運(yùn)輸過(guò)程中免疫系統(tǒng)與疾病之間調(diào)控及損傷機(jī)制方面有重要作用。

研究魚(yú)類運(yùn)輸過(guò)程中應(yīng)激的發(fā)生及危害，并進(jìn)行及時(shí)有效地監(jiān)測(cè)，從而探索相應(yīng)的緩解措施，對(duì)優(yōu)化運(yùn)輸方法、提高運(yùn)輸質(zhì)量等方面具有重要意義。

4 問(wèn)題與展望

目前魚(yú)類?；钸\(yùn)輸亟待解決的問(wèn)題和研究方向包括:

(1)目前魚(yú)類應(yīng)激反應(yīng)的監(jiān)測(cè)技術(shù)與方法主要以生理反應(yīng)為主，但采樣過(guò)程中的捕撈、搬運(yùn)、麻醉等措施會(huì)對(duì)魚(yú)體造成額外的刺激，為更真實(shí)、客觀地反映魚(yú)類運(yùn)輸過(guò)程中應(yīng)激狀況，可通過(guò)諸如行為、形態(tài)變化結(jié)合生理應(yīng)激建立易于直接觀察臨床癥狀的一套便捷、實(shí)用的監(jiān)測(cè)方法。

(2)無(wú)水運(yùn)輸是通過(guò)降低溫度或使用麻醉劑使魚(yú)類進(jìn)入休眠狀態(tài)，然后在較低溫度的無(wú)水或霧態(tài)狀態(tài)下進(jìn)行運(yùn)輸，然而不同魚(yú)種休眠所需要的溫度和麻醉劑量不同，即使相同魚(yú)種不同季節(jié)所耐受的低溫和麻醉劑量也不同。因此，為保證無(wú)水運(yùn)輸質(zhì)量，需對(duì)不同魚(yú)種在不同季節(jié)的低溫休眠溫度、最佳降溫速率、最適麻醉劑量以及相應(yīng)的包裝方式進(jìn)行研究。此外，目前魚(yú)類運(yùn)輸所用的麻醉劑都存在一定缺陷，如需要休藥恢復(fù)或成本高，可通過(guò)研究我國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中具有鎮(zhèn)靜效果的草藥，比如酸棗仁、薄荷等開(kāi)發(fā)新型安全、高效的麻醉劑。

(3)魚(yú)類無(wú)水保活技術(shù)的研究相對(duì)較多，而針對(duì)無(wú)水?；顧C(jī)制的研究甚少，除利用血液、氧化應(yīng)激和免疫學(xué)等指標(biāo)反映以外，還可利用蛋白質(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué)以及基因組學(xué)等技術(shù)進(jìn)行深入研究，篩選出無(wú)水?；钕嚓P(guān)的標(biāo)志物。

［1］ 吳慧曼.淡水活魚(yú)現(xiàn)代流通的裝備技術(shù)集成與模式優(yōu)化研究［D］.北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)，2014:1-2.

［2］ 朱健康.活海鮮流通產(chǎn)業(yè)化的運(yùn)輸方法和技術(shù)［J］.福建水產(chǎn)，2007，6(2):54-57.

［3］ Iwama G W，Pickering A D，Sumpter J P，et al.Fish Stress and Health in Aquaculture［M］.London:Cambridge University Press，2011:35-72.

［4］ Heery K.Fish transport in the aquaculture sector:An overview of the road transport of Atlantic salmon in Tasmania［J］.Journal of Veterinary Behavior:Clinical Applications and Research，2009，4:163-168.

［5］ Topic P N，Strunjak P I，Coz R R，et al.Tricaine methanesulfonate(MS-222)application in fish anaesthesia［J］.Journal of Applied Ichthyology，2012，28(4):553-564.

［6］ Mi H，Qian C，Mao L.Quality and biochemical properties of artificially hibernated crucian carp for waterless preservation［J］.Fish Physiology and Biochemistry，2012，38(6):1721-1728.

［7］ 白艷龍，譚昭儀，邸向乾，等.黃顙魚(yú)無(wú)水保活技術(shù)研究［J］.食品工業(yè)科技，2013，34(1):334-337.

［8］ 張恒，汪玉祥，冒森莉，等.淡水魚(yú)碳酸休眠法無(wú)水?；钸\(yùn)輸技術(shù)［J］.水產(chǎn)科技情報(bào)，2008，35(5):236-240.

［9］ Dhanasiri A K S，Kiron V，F(xiàn)ernandes J M O，et al.Novel application of nitrifying bacterial consortia to ease ammonia toxicity in ornamental fish transport units:trials with zebrafish［J］.Journal of Applied Microbiology，2011，111(2):278-292.

［10］ Harmon T S.Methods for reducing stressors and maintaining water quality associated with live fish transport in tanks:a review of the basics［J］.Reviews in Aquaculture，2009，1(1):58-66.

［11］ Lim L C，Dhert P，Sorgeloos P.Recent developments and improvements in ornamental fish packaging systems for air transport［J］.Aquaculture Research，2003，34(11):923-935.

［12］ Zeng P，Chen T，Shen J.Effects of cold acclimation and storage temperature on crucian carp(Carassius auratus gibelio)in a waterless preservation［J］.Fish Physiology and Biochemistry，2013，12:1-10.

［13］ 戴志遠(yuǎn)，張燕平，張虹，等.紫貽貝低溫?zé)o水保活過(guò)程中的生化變化［J］.中國(guó)食品學(xué)報(bào)，2004，4(3):16-19.

［14］ 劉偉東.大菱鲆(Scophthalmus maximus)?；畹幕A(chǔ)研究［D］.青島:中國(guó)海洋大學(xué)，2009:30-43.

［15］ Schnick R R.Zero withdrawal anesthetic for all finfish and shellfish:need and candidates［J］.Fisheries，2006，31(3):122-126.

［16］ Pramod P K，Ramachandran A，Sajeevan T P，et al.Comparative efficacy of MS‐222 and benzocaine as anaesthetics under simulated transport conditions of a tropical ornamental fish Puntius filamentosus(Valenciennes)［J］.Aquaculture Research，2010，41(2):309-314.

［17］ 陳德芳，汪開(kāi)毓，肖丹，等.丁香酚對(duì)鯽魚(yú)麻醉效果的研究［J］.水產(chǎn)科技情報(bào)，2010，37(6):288-291.

［18］ Velí?ek J，W?asow T，Gomulka P，et al.Effects of clove oil anaesthesia on European catfish(Silurus glanis L.)［J］.Acta veterinaria Brno，2006，75(1):99-106.

［19］ Hegyi A，Urbányi B，Kovács M，et al.Investigation of potential stress parameters in rainbow trout(Oncorhynchus mykiss)［J］.Acta Biologica Hungarica，2010，61(1):24-32.

［20］ 米紅波，侯曉榮，茅林春.魚(yú)蝦類?；钸\(yùn)輸?shù)难芯颗c應(yīng)用進(jìn)展［J］.食品科學(xué)，2013，34(13):365-369.

［21］ Fotedar S，Evans L.Health management during handling and live transport of crustaceans:a review［J］.Journal of Invertebrate Pathology，2011，106(1):143-152.

［22］ 閻太平，劉亞?wèn)|.提高活魚(yú)運(yùn)輸成活率的方法與措施［J］.現(xiàn)代農(nóng)業(yè)，2006(5):54-56.

［23］ GB/T 27638-2011.活魚(yú)運(yùn)輸技術(shù)規(guī)范［S］.

［24］ Tanaka R，F(xiàn)ukushima H，Maeda T，et al.Effect of shortterm holding without feeding after capture on reduction in oxidative stress and maintenance of lipid and amino acid contents in Decapterus maraudsi［J］.North American Journal of Aquaculture，2013，75(4):562-571.

［25］ Vinagre C，Madeira D，Narciso L，et al.Effect of temperature on oxidative stress in fish:Lipid peroxidation and catalase activity in the muscle of juvenile seabass(Dicentrarchus labrax)［J］.Ecological Indicators，2012，23:274-279.

［26］ Golombieski J I，Silva L V F，Baldisserotto B，et al.Transport of silver catfish(Rhamdia quelen)fingerlings at different times，load densities，and temperatures［J］.Aquaculture，2003，216(1):95-102.

［27］ Portz D E，Woodley C M，Cech J J.Stress-associated impacts of short-term holding on fishes［J］.Reviews in Fish Biology and Fisheries，2006，16(2):125-170.

［28］ Islam M N，Hossain M A.Mortality rate of fish seeds(Labeo rohita)during traditional transportation system in the northwest bangladesh［J］.Journal of Scientific Research，2013，5(2):383-392.

［29］ Cech J J，Bartholow S D，Young P S.Hopkins TE Striped bass exercise and handling stress in freshwater:physiological responses to recovery environment［J］.Transactions of the American Fisheries Society，1996，125(2):308-320.

［30］ Swanson C，Mager RC，Doroshov I.Use of salts，anesthetics，and polymers to minimize handling and transport mortality in delta smelt［J］.Transactions of the American Fisheries Society，1996，125(2):326-329.

［31］ Gomes L C，Edsandra C C，Richard P B，et al.Use of salt during transportation of air breathing pirarucu juveniles(Arapaima gigas)in plastic bags［J］.Aquaculture，2006，256(1):521-528.

［32］ Noga E J.Fish Disease:Diagnosis and Treatment［M］.Hoboken:John Wiley ＆ Sons，2010:107-108.

［33］ Harmon T S.Methods for reducing stressors and maintaining water quality associated with live fish transport in tanks:a review of the basics［J］.Reviews in Aquaculture，2009，1(1):58-66.

［34］ López P M A，Hernández P J，Gesto M，et al.Short-term time course of liver metabolic response to acute handling stress in rainbow trout(Oncorhynchus mykiss)［J］.Comparative Biochemistry and Physiology Part A:Molecular＆Integrative Physiology，2014，168:40-49.

［35］ Wysocki L E，Dittami J P，Ladich F.Ship noise and cortisol secretion in European freshwater fishes［J］.Biological Conservation，2006，128(4):501-508.

［36］ Ruane N M，Komen H.Measuring cortisol in the water as an indicator of stress caused by increased loading density in common carp(Cyprinus carpio)［J］.Aquaculture，2003，218(1):685-693.

［37］ Braun N，Nu?er A P O.Stress in Pimelodus maculatus(Siluriformes:Pimelodidae)at different densities and times in a simulated transport［J］.Zoologia(Curitiba)，2014，31(1):101-104.

［38］ Huntingford F A，Adams C，Braithwaite V A，et al.Current issues in fish welfare［J］.Journal of fish biology，2006，68(2):332-372.

［39］ Nomura M，Sloman K A，Von K，et al.Physiology and behaviour of Atlantic salmon smolts during commercial land and sea transport［J］.Physiology ＆ Behavior，2009，96(2):233-243.

［40］ Van R M，Pit D S S，Balm P H M，et al.Behavioral strategy and the physiological stress response in rainbow trout exposed to severe hypoxia［J］.Hormones and Behavior，1996，30(1):85-92.

［41］ Barton B A.Stress in fishes:a diversity of responses with particular reference to changes in circulating corticosteroids［J］.Integrative and Comparative Biology，2002，42(3):517-525.

［42］ 趙建華，楊德國(guó)，陳建武，等.魚(yú)類應(yīng)激生物學(xué)研究與應(yīng)用［J］.生命科學(xué)，2011，23(4):394-401.

［43］ Anusha K D，Jorge M F，Viswanath K.Acclimation of zebrafish to transport stress［J］.Zebrafish，2013，10(1):87-98.

［44］ Fanouraki E，Mylonas C C，Papandroulakis N，et al.Species specificity in the magnitude and duration of the acute stress response in Mediterranean marine fish in culture［J］.General and Comparative Endocrinology，2011，173(2):313-322.

［45］ 彭士明，施兆鴻，李杰，等.運(yùn)輸脅迫對(duì)銀鯧血清皮質(zhì)醇、血糖、組織中糖元及乳酸含量的影響［J］.水產(chǎn)學(xué)報(bào)，2011，6(35):831-837.

［46］ Lays N，Iversen M M T，F(xiàn)rantzen M，et al.Physiological stress responses in spotted wolffish(Anarhichas minor)subjected to acute disturbance and progressive hypoxia［J］.Aquaculture，2009，295(1):126-133.

［47］ Paital B.Antioxidant and oxidative stress parameters in brain of Heteropneustes fossilis under air exposure condition;role of mitochondrial electron transport chain［J］.Ecotoxicology and Environmental Safety，2013，95:69-77.

［48］ Olsvik P A，Kristensen T，Waagb? R，et al.mRNA expression of antioxidant enzymes(SOD，CAT and GSH-Px)and lipid peroxidative stress in liver of Atlantic salmon(Salmo salar)exposed to hyperoxic water during smoltification［J］.Comparative Biochemistry and Physiology Part C:Toxicology ＆ Pharmacology，2005，141(3):314-323.

［49］ Madeira D，Narciso L，Cabral H N，et al.Influence of temperature in thermal and oxidative stress responses in estuarine fish［J］.Comparative Biochemistry and Physiology Part A:Molecular ＆ Integrative Physiology，2013，166(2):237-243.

［50］ Roberts R J，Agius C，Saliba C，et al.Heat shock proteins(chaperones)in fish and shellfish and their potential role in relation to fish health:a review［J］.Journal of Fish Diseases，2010，33(10):789-801.

［51］ Costas B，Concei?ao L E C，Aragao C，et al.Physiological responses of Senegalese sole(Solea senegalensis Kaup，1858)after stress challenge:Effects on non-specific immune parameters，plasma free amino acids and energy metabolism［J］.Aquaculture，2011，316(1):68-76.

［52］ ZHANG Y Y，LIU B，GE X P，et al.The influence of various feeding patterns of emodin on growth，non-specific immune responses，and disease resistance to Aeromonas hydrophila in juvenile Wuchang bream(Megalobrama amblycephala)［J］.Fish ＆ Shellfish Immunology，2014，36(1):187-193.