孫 巖，孫長(zhǎng)杰，劉 冰

（吉林大學(xué)第一醫(yī)院，吉林長(zhǎng)春130021）

人類胃液中EB病毒的檢測(cè)

孫 巖，孫長(zhǎng)杰，劉 冰＊

（吉林大學(xué)第一醫(yī)院，吉林長(zhǎng)春130021）

EB病毒（Epstein－barr vinus）與許多人類惡性腫瘤的發(fā)生有密切相關(guān)，這些腫瘤包括Burkitt淋巴瘤，霍奇金惡性淋巴瘤，非霍奇金惡性淋巴瘤、胃癌、鼻咽癌及一些部位的淋巴上皮瘤樣癌［1－3］。自Burke于1990年首次報(bào)告EB病毒與胃癌相關(guān)以來(lái)，部分學(xué)者相繼在淋巴上皮瘤樣胃癌及其他類型的胃癌細(xì)胞中檢測(cè)出EB病毒。本文對(duì)經(jīng)臨床病理確診的胃癌、胃潰瘍及非胃潰瘍疾病的胃液標(biāo)本進(jìn)行了檢測(cè)，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料和方法

1.1 一般材料

經(jīng)臨床病理確診的胃癌、胃潰瘍及非胃潰瘍疾病的胃液共124例，其中胃癌40例，胃潰瘍45例，非潰瘍疾病39例患者，年齡在19－70歲之間（平均56歲）。男67例，女57例。

1.2 提取DNA的方法

吸取胃液0.5ml于1.5ml的Eppendort中離心（7500轉(zhuǎn)／20min），將上清棄取。加入ATL1800 μl及20μl proteinaseK，稍離心，置55℃水浴1小時(shí)30分鐘后直至透明。再加入AL1及AL2共200μl（AL1 160μl＋AL2 240μl），經(jīng)離心后置水浴10 min，待冷卻后加入（CH3）2OH210ml，輕輕混合3 min，再重復(fù)以上步驟。離心所得的液體即是提取的DNA。

1.3 聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）

PCR試劑盒購(gòu)自生物試劑有限公司，操作按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

2 結(jié)果

2.1 PCR擴(kuò)增產(chǎn)物分析

擴(kuò)增產(chǎn)物是121bp，EB病毒DNA陽(yáng)性對(duì)照出現(xiàn)預(yù)期結(jié)果，見(jiàn)圖1。

2.2 EB病毒DNA檢出情況

胃癌、胃潰瘍、非胃潰瘍疾病的胃液EB病毒DNA檢出情況見(jiàn)表1。

圖1 PCR擴(kuò)增產(chǎn)物

124例胃液標(biāo)本中EB病毒DNA陽(yáng)性9例（6%）；其中胃癌有5例檢測(cè)出EB病毒陽(yáng)性（12.5%），HP（Helicobacter pylori）陽(yáng)性（93%）。潰瘍病胃液標(biāo)本EB病毒DNA陽(yáng)性4例（7%），HP陽(yáng)性（66%），非潰瘍疾病胃液標(biāo)本EB病毒均為陰性，HP陽(yáng)性（30%）。

表1 檢驗(yàn)結(jié)果

3 討論

EB病毒是與人類密切相關(guān)的病毒之一，世界上幾乎所有的成人都被其感染過(guò)。EB病毒與人類的許多惡性腫瘤有關(guān)。文獻(xiàn)報(bào)道EB病毒主要存在于具有廣泛淋巴細(xì)胞侵犯的特殊類型胃癌組織中，其陽(yáng)性率可高達(dá)80%以上［4］，文獻(xiàn)報(bào)道在普通型的胃癌組織中也有EB病毒存在，其陽(yáng)性率在不同地區(qū)差別很大［5，6］。但是，目前為止對(duì)于胃潰瘍及非胃潰瘍疾病報(bào)道極少。

本組病例用聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）方法檢測(cè)本地區(qū)經(jīng)臨床病理確診的胃癌、胃潰瘍及非胃潰瘍疾病的共124例胃液標(biāo)本中EB病毒DNA陽(yáng)性9例（6%）；其中胃癌有5例EB病毒陽(yáng)性（12.5%），HP陽(yáng)性（93%）。

本組45例潰瘍病胃液標(biāo)本EB病毒DNA陽(yáng)性4例（7%），HP陽(yáng)性（66%）。提示EB病毒陽(yáng)性的潰瘍病有可能是發(fā)展為胃癌的潛在高危人群。Fukayanma［7］等認(rèn)為EB病毒可通過(guò)被激活的攜帶EB病毒的淋巴細(xì)胞，感染胃的表面上皮。EB病毒可能是有些病毒相關(guān)型胃癌發(fā)生的一個(gè)因素，而用原位雜交的方法檢測(cè)EB病毒抗體或可用作篩檢EB病毒相關(guān)胃癌的高危人群。非胃潰瘍疾病的胃液標(biāo)本中EB病毒均為陰性，HP陽(yáng)性（30%）。但Shousha［8］等報(bào)道19例各種類型的胃癌組織中，僅在其中1例淋巴上皮瘤樣組織中檢出病毒，而在11例癌旁正常胃黏膜或十二指腸中有7例被檢出有散在的含有EB病毒。

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2014－04－29）

1007－4287（2015）09－1530－02

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