李昕月 付俊范 魏曉兵 李自博 車喜慶 周如軍

摘要：就長白山區(qū)人參銹腐病發(fā)生危害進(jìn)行調(diào)查，并選用新型殺菌劑對人參銹腐病菌的毒力及田間防效進(jìn)行了測試，以期為生產(chǎn)上安全高效防治該病提供理論依據(jù)。采用菌絲生長速率法測定11種殺菌劑對人參銹腐病菌的毒力，并進(jìn)行田間防效試驗(yàn)。室內(nèi)毒力測定結(jié)果表明10%世高水分散粒劑、18.7%凱特水分散粒劑和60%百泰水分散粒劑對人參銹腐病菌毒力最強(qiáng)，其EC50/sub>值分別為1.19、20.56、27.77mg/L。田間試驗(yàn)結(jié)果表明10%世高WG、18.7%凱特水分散粒劑和60%百泰水分散粒劑對人參銹腐病防效達(dá)50%以上。人參銹腐病發(fā)病盛期為6月上旬至7月下旬，10%世高水分散粒劑、18.7%凱特水分散粒劑和60%百泰水分散粒劑是目前防治人參銹腐病的有效藥劑。

關(guān)鍵詞：人參銹腐??；殺菌劑；毒力測定；田間防效；毀滅柱孢菌

中圖分類號：S4

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

論文編號：casb14100086

0引言

人參（Panax ginseng C.A.Meyer）是中國傳統(tǒng)的名貴中草藥，具有極高的藥用和經(jīng)濟(jì)價(jià)值，主要分布在中國東北地區(qū)長白山麓。由毀滅柱孢菌[Cylindrocarpon destructans （Zinns.） Scholten]引起的人參銹腐病是人參產(chǎn)區(qū)分布最廣和發(fā)病時間最長的地下病害，從播種到各參齡都有發(fā)生，嚴(yán)重影響人參的產(chǎn)量和品質(zhì)，在遼寧和吉林參區(qū)發(fā)病率一般為20%～30%，造成25%～30%產(chǎn)量損失。近年來盡管對人參銹腐病的研究較多，但國內(nèi)僅限于對人參銹腐病病原菌的生物學(xué)特性、改良參地土壤和拮抗菌篩選等一些比較基礎(chǔ)的研究，并未從根本上解決問題，尤其是在防治方面。目前人參銹腐病主要以化學(xué)藥劑防治為主，由于缺乏系統(tǒng)防控技術(shù)研究，盲目用藥及濫用農(nóng)藥現(xiàn)象時有發(fā)生，極易導(dǎo)致人參產(chǎn)品農(nóng)藥殘留超標(biāo)。本研究對長白山區(qū)人參銹腐病田間發(fā)生危害進(jìn)行了系統(tǒng)調(diào)查，并在植物病害預(yù)防與控制相結(jié)合的理論指導(dǎo)下，從人參銹腐病發(fā)病植株上分離得到致病菌株，針對其生物學(xué)特性選用國內(nèi)外11種新型低毒低殘留殺菌劑對人參銹腐病菌進(jìn)行室內(nèi)毒力測定及田間防效試驗(yàn)，以期為人參銹腐病高效低毒低殘留藥劑篩選提供理論依據(jù)。

1材料和方法

1.1田間發(fā)生危害調(diào)查

2012-2014年陸續(xù)對長白山區(qū)的遼寧桓仁、清原、新賓、寬甸和吉林集安、撫松等人參主產(chǎn)區(qū)進(jìn)行了人參銹腐病發(fā)病危害調(diào)查，調(diào)查方法是每塊參田隨機(jī)選取5個小區(qū)，每小區(qū)選100株，調(diào)查病株率。

1.2供試菌株

人參銹腐病病樣于2013年6月上旬采自吉林省集安市人參基地，在室內(nèi)對其病原菌進(jìn)行分離純化，獲得試驗(yàn)所用的人參銹腐病菌株。

1.3供試藥劑

50%阿克白可濕性粉劑、18.7%凱特水分散粒劑、50%凱澤水分散粒劑、60%百泰水分散粒劑、30%翠澤水劑、70%代森聯(lián)水分散粒劑，50%翠貝水分散粒劑，上述7種新型殺菌劑均由巴斯夫（中國）有限公司生產(chǎn)；80%代森錳鋅可濕性粉劑（陶氏益農(nóng)農(nóng)業(yè)科技（中國）有限公司）；10%世高水分散粒劑（先正達(dá)（中國）投資有限公司）；50%腐霉利可濕性粉劑（江蘇瑞邦農(nóng)藥廠有限公司）；50%多菌靈可濕性粉劑（江陰市農(nóng)藥二廠有限公司）；75%百菌清可濕性粉劑（利民化工股份有限公司）。

1.4抑菌實(shí)驗(yàn)

采用生長速率法進(jìn)行真菌對藥劑的敏感性測定。在無菌條件下將人參銹腐病菌轉(zhuǎn)接至PDA培養(yǎng)基，20C恒溫培養(yǎng)10天后，在菌落邊緣打5.0mm的菌餅備用。分別吸取一定體積的不同濃度藥液加入融化冷卻至45℃的PDA培養(yǎng)基中，配成使用濃度，以無菌水作為對照，凝固后，將菌餅接種在含有相對應(yīng)濃度藥劑的PDA平板上，每個濃度設(shè)3次重復(fù)。20℃恒溫培養(yǎng)10天后，對照菌落直徑超過5.0cm時用十字交叉法測量菌落直徑，計(jì)算出該濃度下化學(xué)藥劑的相對抑菌率。

抑制率=[（對照菌落直徑-處理菌落直徑）/對照菌落直徑]xl00%…………………………………… （1）

統(tǒng)計(jì)出各藥劑不同濃度對各供試病原菌的抑菌效果。

1.5田間藥效試驗(yàn)

試驗(yàn)在沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)中草藥園中進(jìn)行，種植前采用刺傷法進(jìn)行病原菌侵染，共設(shè)7個處理（藥劑及質(zhì)量濃度見表2，清水處理為對照），每個處理3次重復(fù)，初期采用參根蘸藥方式進(jìn)行防治，1周后再進(jìn)行灌根給藥處理。種植后15天檢測出苗率，秋后按照對角線采樣抽取每個重復(fù)的20株人參進(jìn)行染病情況調(diào)查，對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。人參銹腐病病害分級標(biāo)準(zhǔn)參照王士杰等：0級，參根無??；Ⅰ級，病斑占參根表面積的10%以下；Ⅱ級，病斑占參根表面積的10%-30%；Ⅲ級，病斑占參根表面積的30%-50%；Ⅳ級，病斑占參根表面積的50%以上。通過公式計(jì)算銹腐病的病情指數(shù)（公式2）和藥劑防治效果（公式3）。

病情指數(shù)=∑（發(fā)病級別×各級病根數(shù)）/（調(diào)查參根數(shù)×最高病級值）×100………………………………（2）

防治效果=（對照區(qū)病情指數(shù)-處理區(qū)病情指數(shù)）/對照區(qū)病情指數(shù)×100%………………………………（3）

2結(jié)果與分析

2.1發(fā)生危害調(diào)查

田間調(diào)查發(fā)現(xiàn)，人參銹腐病是發(fā)生最普遍、危害最嚴(yán)重的人參根部病害之一，可為害各齡參根，田間發(fā)病率為15%-30%。6月上旬至7月下旬為發(fā)病盛期，也是人參連作的主要障礙（圖1）。

該病從早春參苗出土至枯萎期或休眠期均有不同程度的感染或發(fā)病。發(fā)病初期在侵染點(diǎn)呈現(xiàn)黃褐色小斑點(diǎn)，后隨病情擴(kuò)展，表現(xiàn)為近圓形或不規(guī)則形病斑，病部邊緣稍隆起、中部略凹陷，病健部界限明顯。發(fā)病較輕時，參根表皮完好，僅表皮下幾層細(xì)胞受害，不深入根肉內(nèi)部；當(dāng)受害嚴(yán)重時，表皮破壞呈現(xiàn)銹斑狀，且深入根肉組織成褐色病變，病斑處積聚大量銹粉狀物，呈現(xiàn)干腐狀，使側(cè)根，甚至主根橫向腐爛，最終可腐爛死亡。越冬幼芽受害后，呈褐色小斑點(diǎn)，后逐漸擴(kuò)大至內(nèi)部，使其不能出土，在地下腐爛死亡，形成嚴(yán)重缺苗（圖2）。

2.2抑菌試驗(yàn)

利用11種殺菌劑對人參銹腐病菌菌絲生長抑制對比試驗(yàn)，經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析得出每種藥劑的相關(guān)系數(shù)、EC₅₀值和毒力回歸方程，如表l所示。供試藥劑對人參銹腐病菌都表現(xiàn)出一定的抑制作用，但不同的藥劑之間有明顯差異，并且不同藥劑在不同濃度下抑菌效果不同，在較高濃度下，多數(shù)藥劑均有一定的抑菌作用。其中10%世高WG、18.7%凱特WG和60%百泰WG對病原菌抑制效果相對較好，以10%世高WG防治效果為最好，在濃度為100mg/L時抑菌率達(dá)到87.47%，其EC₅₀值為1.19mg/L；其次是60%百泰WG和18.7%凱特WG，抑菌率分別為73.83%和64.33%，EC₅₀值分別為20.56mg/L和27.77mg/L；而50%凱澤WG對病原菌的抑制效果最差，500mg/L的濃度下抑菌率僅為12.44%，其EC₅₀值達(dá)到552694280mg/L。

2.3田間藥劑防治效果

經(jīng)過染病處理的苗栽經(jīng)過蘸藥和l周后的灌根給藥處理后人參出苗率有一定的提高，但沒有達(dá)到完全預(yù)防的作用，其中使用10%世高WG和18.7%凱特WG的試驗(yàn)處理與其他5組比較差異顯著，出苗率在80%以上，其他藥劑都在60%～80%之間，清水對照的出苗率為46.67%（表2）。試驗(yàn)結(jié)果表明人參銹腐病病原菌可以侵染芽孢從而影響人參的出苗率，降低人參產(chǎn)量。表2中7組藥劑處理病情指數(shù)在40左右，其中10%世高WG的病情指數(shù)較低為26.08，防效達(dá)到60.15%（與其他6組比較差異顯著），但還是比較低的，沒有達(dá)到預(yù)期的防治效果。這種現(xiàn)象可能由多種因素引起，表明給藥方式對防治效果有較大影響，同時也說明經(jīng)分離得到的人參銹腐病病原菌有較強(qiáng)的致病力。

3結(jié)論與討論

本試驗(yàn)采用菌絲生長速率法室內(nèi)測定了11種殺菌劑對人參銹腐病菌的抑制作用，從中篩選出10%世高WG、18.7%凱特WG和60%百泰WG 3種對人參銹腐病菌抑制效果較好的藥劑，其EC₅₀值較低。田間藥效試驗(yàn)結(jié)果表明10%世高WG和18.7%凱特處理出苗率最高為83.33%，世高防效最好達(dá)60.15%。其中10%世高WG、18.7%凱特WG和60%百泰WG 3種藥劑在生產(chǎn)上對人參銹腐病防治未見報(bào)道。

人參銹腐病是發(fā)生普遍、危害嚴(yán)重、防治最難的人參根部病害之一，可為害各齡參根，是人參連作的主要障礙。目前尚無防治人參銹腐病的專用特效農(nóng)藥，因此本研究篩選新型殺菌劑防控該病對發(fā)展無公害人參生產(chǎn)具有重要意義。本研究表明l0%世高WG、18.7%凱特WG和60%百泰WG 3種藥劑對人參銹腐病具有較好防效，雖然防效偏低僅為50%以上，藥效結(jié)果不夠理想，還需做復(fù)配試驗(yàn)等更多嘗試，但對極難防治的該病仍具有較大指導(dǎo)意義。Yu等認(rèn)為引起人參銹腐病的主要原因在于土壤中有害微生物的大量繁殖，前期苗床無害化處理非常關(guān)鍵。因此提前對土壤進(jìn)行消毒，并且在人參移栽過程中蘸藥處理防治銹腐病侵染，是人參生產(chǎn)中的重要措施。試驗(yàn)所用藥劑均為低毒農(nóng)藥，在使用化學(xué)農(nóng)藥防治人參銹腐病的過程中應(yīng)合理輪換、交替或混合使用，以避免抗藥性的產(chǎn)生，本研究可為實(shí)際生產(chǎn)中人參銹腐病的防治工作提供更好的借鑒。