潘美晴，鄭 昊，劉夢(mèng)玉，梁翠茵

首都醫(yī)科大學(xué)燕京醫(yī)學(xué)院，北京 101300

注射用葛根素溶液對(duì)蟾蜍離體心臟功能的影響*

潘美晴，鄭 昊，劉夢(mèng)玉，梁翠茵△

首都醫(yī)科大學(xué)燕京醫(yī)學(xué)院，北京 101300

目的：觀察注射用葛根素溶液對(duì)蟾蜍離體心臟的作用及其機(jī)制。方法：采用斯氏離體蛙心灌流方法，通過(guò)BL420E描記心臟收縮力及心率變化，觀察注射用葛根素溶液對(duì)離體心臟的心肌收縮力和心率的影響，并研究葛根素對(duì)腎上腺素、氯化鈣心肌收縮量效關(guān)系曲線的影響。結(jié)果：注射用葛根素溶液使蟾蜍離體心臟的心肌收縮力減弱，心率減慢。在4.8×10-4～4.8×10-2mol/L濃度范圍內(nèi)，注射用葛根素溶液抑制心肌收縮力的作用與劑量之間呈明顯量效關(guān)系，最大效應(yīng)可使心肌收縮力降低49%；注射用葛根素溶液可使腎上腺素及氯化鈣對(duì)心臟的興奮作用降低。結(jié)論：注射用葛根素溶液可抑制蟾蜍離體心臟的收縮力和心率，其作用可能與其抑制β受體，抑制細(xì)胞外鈣內(nèi)流有關(guān)。

蟾蜍離體心臟；注射用葛根素溶液；作用機(jī)制

葛根素(p u erarin P u er)是從豆科植物野葛Pueraria lobata(wi ld)Oh wi的干燥根中提取的有效成分之一，化學(xué)名為8-β-D-葡萄吡喃糖-4’，7-二羥基異黃酮，分子式為C21H20O9?，F(xiàn)代藥理研究表明，葛根素具有擴(kuò)張微血管、改善微循環(huán)、降低血壓、擴(kuò)張冠脈及腦血管、保護(hù)缺血心肌和心肌缺血再灌注損傷、抗血栓、抗心律失常及抗氧化、抗衰老、改善記憶、抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)等作用[1-2]。本研究采用離體蟾蜍心臟灌流的方法，探討不同濃度注射用葛根素溶液對(duì)離體蟾蜍心臟收縮力和心率的影響及其作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 蟾蜍，雌雄不限，體質(zhì)量50 g/只以上，由北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物部提供；實(shí)驗(yàn)動(dòng)物合格證號(hào)：S C X K（京）2012—0016。

1.2 藥品與試劑 注射用葛根素溶液（山東瑞陽(yáng)制藥有限公司，批號(hào)：13132401）；鹽酸腎上腺素（北京市永康藥業(yè)有限公司，批號(hào)：13030241）；其他試劑均為分析純。

1.3 儀器 FT-100生物張力換能器、B L-420E+生物技能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)均購(gòu)自成都泰盟科技有限公司。

1.4 方法

1.4.1 注射用葛根素溶液對(duì)蟾蜍離體心臟的作用 按斯氏離體蛙心灌流法制備蟾蜍離體心臟，先用3m L任氏液灌流，待心臟搏動(dòng)穩(wěn)定后，記錄收縮曲線，作為對(duì)照組；再分別用濃度為4.8×10-4、9.6×10-4和4.8×10-3、9.6×10-3、4.8×10-2mol/L的注射用葛根素溶液對(duì)心臟進(jìn)行灌流，每組取16只蟾蜍，觀察并記錄加藥前后心肌的收縮力和心率變化情況。

1.4.2 注射用葛根素溶液對(duì)鹽酸腎上腺素興奮心臟作用的影響 分別用濃度為1.52×10-7、1.52×10-6和1.52×10-5、1.52×10-4、1.52×10-3mol/L的鹽酸腎上腺素溶液對(duì)心臟進(jìn)行灌流，得到鹽酸腎上腺素對(duì)蟾蜍心臟收縮的量效關(guān)系曲線，再用4.8×10-2mol/L的注射用葛根素溶液孵浴15分鐘，重新加入鹽酸腎上腺素溶液，使其終濃度分別為1.52×10-7、1.52×10-6和1.52×10-5、1.52×10-4、1.52×10-3mol/L，記錄心臟收縮曲線的變化。

1.4.3 氯化鈣溶液對(duì)蟾蜍離體心臟的作用 分別用濃度為1×10-6、1×10-5和1×10-4、1×10-3、1×10-2mol/L的氯化鈣溶液對(duì)心臟進(jìn)行灌流，得到氯化鈣對(duì)蟾蜍心臟收縮的量效關(guān)系曲線，再用4.8×10-2mol/L的注射用葛根素溶液孵浴15分鐘，重新加入氯化鈣溶液，使其終濃度分別為1×10-6、1×10-5和1×10-4、1×10-3、1×10-2mol/L，記錄心臟收縮曲線的變化。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)采用S P SS 17.0軟件分析。計(jì)量資料以(±s)表示，采用t檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 注射用葛根素溶液對(duì)蟾蜍離體心臟的作用 不同濃度的注射用葛根素溶液可抑制蟾蜍心臟收縮力及心率，隨著注射用葛根素溶液濃度的增加，蟾蜍心肌收縮力逐漸減少，對(duì)心肌收縮的抑制率逐漸增加，濃度為4.8×10-2mol/L時(shí)對(duì)心肌收縮的抑制率達(dá)49.2%，見(jiàn)表1。

表1 不同濃度注射用葛根素溶液對(duì)離體蟾蜍心肌收縮力及心率的影響（n=16)

2.2 注射用葛根素溶液對(duì)鹽酸腎上腺素興奮心臟的作用 不同濃度的鹽酸腎上腺素溶液可劑量依賴性增加心肌收縮力，增加心率。加入4.8×10-2mol/L的注射用葛根素溶液孵浴，再依次加入不同濃度的鹽酸腎上腺素溶液，心肌收縮力及心率仍可劑量依賴性增加，而收縮力增加率顯著變小，見(jiàn)表2。

2.3 注射用葛根素溶液對(duì)氯化鈣興奮心臟的作用 不同濃度的氯化鈣溶液可劑量依賴性增加心肌收縮力，增加心率。加入4.8×10-2mol/L的注射用葛根素溶液孵浴，再依次加入不同濃度的氯化鈣溶液，心肌收縮力及心率仍可劑量依賴性增加，而心肌收縮力增加率與單獨(dú)應(yīng)用氯化鈣比較顯著縮小，見(jiàn)表3。

表2 注射用葛根素溶液溶液對(duì)鹽酸腎上腺素興奮心臟作用的影響（n=16)

表3 注射用葛根素溶液對(duì)氯化鈣興奮心臟作用的影響（n=16)

3 討論

本研究顯示注射用葛根素溶液能使心肌收縮力下降，心率減慢，并呈劑量依賴性。當(dāng)用注射用葛根素溶液進(jìn)行孵浴后，氯化鈣對(duì)離體蟾蜍心臟心肌收縮力的興奮率顯著降低，心率亦有所降低，表明注射用葛根素溶液對(duì)蟾蜍離體心臟的心肌收縮力及心率的抑制作用與其抑制心肌細(xì)胞鈣內(nèi)流有關(guān)，與文獻(xiàn)報(bào)道一致[3-4]。當(dāng)用注射用葛根素溶液孵浴后，腎上腺素對(duì)離體蟾蜍心臟心肌收縮力的興奮率降低，心率亦有所降低，表明葛根素對(duì)蟾蜍離體心臟的心肌收縮力及心率的抑制作用與心肌的β受體有關(guān)，與文獻(xiàn)報(bào)道一致[5-6]。注射用葛根素溶液可抑制蟾蜍離體心臟的收縮力和心率，其作用機(jī)制可能與其作用于蟾蜍心臟的β受體抑制細(xì)胞外的鈣離子內(nèi)流，減少細(xì)胞內(nèi)鈣有關(guān)。

[1] 王海珍.葛根素應(yīng)用研究進(jìn)展［J］.山東中醫(yī)雜志，2013，32（7）：516-517.

[2] 張淑娟，王振濤，韓麗華,等.葛根素注射液對(duì)心肌梗塞后大鼠缺血心肌血管新生及VEGFmRNA表達(dá)的影響研究［J］.時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2011,22(2):391-392.

［3］ 張玲，許薇，孫媛.葛根素對(duì)糖尿病大鼠心功能及心肌細(xì)胞內(nèi)鈣離子的影響［J］.中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志，2012，20(6):532－535．

［4］ 唐瑜.葛根素對(duì)腦缺血再灌注損傷神經(jīng)元L－型鈣通道的影響［J］.中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2007，5(1):38－40.

[5] 劉詩(shī)英，王衛(wèi)真，吳志勇，等.葛根素對(duì)異丙腎上腺素誘導(dǎo)的大鼠心肌組織轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1和血漿血管緊張素Ⅱ的影響［J］.實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2012，28（18）：3018-3021.

[6] 劉詩(shī)英，王夢(mèng)洪，鄭澤琪.葛根素對(duì)異丙腎上腺素誘導(dǎo)的心肌纖維化和心肌結(jié)締組織生長(zhǎng)因子表達(dá)的影響［J］.臨床心血管病雜志，2008，24（9）：682－685．

Influence of Puerarin for Injection on Isolated Heart Function of Toad

PANMeiqing,ZHENG Hao,LIU Mengyu,LIANG Cuiyin△
CapitalMedical University Yanjing Medical College,Beijing 101300,China

Objective:To observe the function and itsmechanism of puerarin for injection on isolated heart function of toad.Methods:Through adopting Steinmann isolated frog heartperfusion,the influence of puerarin for injection onmyocardial contractility and heart rate of isolated heartwere observed by tracing heart contractility of the changesofheart ratew ith BL420E,simultaneously,the influence of puerarin for injection on adrenaline,calcium chloride and myocardial contractility dose-effect relationship curve.Results:Puerarin for injection weakened myocardial contractility of toad isolated heartand heart rate.In the range between 4.8×10-4and 4.8×10-2mol/L,a clear dose-effect relationship was demonstrated between the function of puerarin for injection inhibitingmyocardialcontractility and the dose,themaximum effect could reducemyocardial contractility by 49%;Puerarin for injection could decrease agitation induced by adrenaline and calcium chloride of the heart.Conclusion:Puerarin for injection could inhibit the contractility and heart rate of toad isolated heart,its functionm ightbe related to inhibitingβreceptorand intracellular calcium efflux.

isolated heartof toad;puerarin for injection;mechanism ofaction

R339.4

A

1004-6852(2015)07-0015-03

2014-10-25

首都醫(yī)科大學(xué)2013年第二課堂項(xiàng)目（編號(hào)dekt2013079）。

潘美晴（1993—），女，學(xué)生。研究方向：中藥管理。

△通訊作者：梁翠茵（1965—），女，副教授。研究方向：心血管藥理學(xué)。