胡 琳，劉吉開，王芳芳

(1.云南民族大學 民族藥資源化學國家民委-教育部重點實驗室，云南 昆明 650500; 2.中國科學院昆明植物研究所 植物化學與西部植物資源持續(xù)利用國家重點實驗室，云南 昆明 650204)

華麗牛肝菌子實體的化學成分

胡 琳1，劉吉開2，王芳芳1

(1.云南民族大學 民族藥資源化學國家民委-教育部重點實驗室，云南 昆明 650500; 2.中國科學院昆明植物研究所 植物化學與西部植物資源持續(xù)利用國家重點實驗室，云南 昆明 650204)

利用硅膠柱層析、高效液相色譜從麗江產華麗牛肝菌子實體的甲醇提取物中分離得到7個化合物，通過波譜學方法分別鑒定為：麥角甾-ergosta-7,22-二烯-3β,5α,6β-triol (1)，麥角甾-4,6,8(14)，22-四烯-3-酮(2).麥角甾-5,7,22-三烯醇-3β-醇(3)，麥角甾-7,22-二烯-3β-醇(4)，D-阿洛醇(5)，大黃素(6)，大黃素甲醚(7).所有化合物均為首次從華麗牛肝菌中分離得到.

華麗牛肝菌；子實體；化學成分

華麗牛肝菌(BoletusmagnificusW.F.Chiu)屬牛肝菌科(Boletaceae)牛肝菌屬(Boletus)真菌[1].該屬真菌多數(shù)可食用，牛肝菌屬真菌的一些種子實體顏色鮮艷，被觸摸或傷后傷處變成藍色，俗稱“見手青”.為此，牛肝菌的色素類物質引起了人們濃厚的興趣，多年的化學成分研究從中分離得到了眾多的色素類物質，主要有多異戊烯基取代的酚性化合物[2-4]、多烯和普爾文酸(pulvinic acids)類物質.牛肝菌傷后變藍就是由于產生了普爾文酸類化合物xerocomus和variegatic acid所致[5].

華麗牛肝菌在我國主要分布在云南、西藏等地，屬樹木外生菌根菌[2]，目前尚不能人工栽培.華麗牛肝菌一般可食用，在云南某些地區(qū)有中毒現(xiàn)象，出現(xiàn)“小人國幻視癥”.該牛肝菌顏色紅艷，傷后瞬間變藍，為了研究其沒有氧化的原始化學成分，我們對其新鮮未受損傷的子實體提取物進行研究，從中分離得到7個已知化合物,經波譜解析分別鑒定為:麥角甾-ergosta-7,22-二烯-3β,5α,6β-triol (1)，麥角甾-4,6,8(14)，22-四烯-3-酮( 2).麥角甾-5,7,22-三烯醇-3β-醇(3)，麥角甾-7,22-二烯-3β-醇(4)，D-阿洛醇(5)，大黃素 (6)，大黃素甲醚 (7).所有化合物均為首次從該種真菌中分離得到.

1 儀器與材料

1.1 樣品來源

參考文獻[14]的方法，在2 mL樣液中加入2 mL 0.1 mmol/L DPPH·溶液，混勻室溫下避光靜置20 min后，在517 nm處測定吸光值，DPPH·清除率按下列公式計算。

胖警官垂下碩大的腦袋，思考片刻，轉頭命令手下：“錄下其余幾個的姓名?！庇沂种付▌⒀愫?，“你，跟我走?！?/p>

華麗牛肝(BoletusmagnifcusW.F.Chiu)新鮮子實體收集于云南麗江地區(qū)老君山，標本由昆明植物研究所分類室王向華女士鑒定，真菌標本收藏于昆明植物研究所隱花植物標本館(HKAS 39209).

華麗牛肝菌新鮮子實體(2.7 kg)室溫下用99%甲醇提取一次，殘渣干后續(xù)用甲醇(5×2 500 mL)超聲加熱(50 ℃)提取，再用CHCl3∶MeOH(體積比1∶1， 5×2 500 mL)超聲提取3次，將所有提取液減壓濃縮合并，加水懸浮，用乙酸乙酯萃取、減壓濃縮得膏狀物Bm-EA(237 g)和水溶液部分Bm-W.Bm-EA用粗硅膠(100目)拌樣，硅膠柱(200～300目，10 cm×120 cm)，石油醚-丙酮梯度洗脫分成15個組分.組分1經反復硅膠柱層析得化合物6(15.8 mg)，7(13.2 mg).組分2[V(石油醚)∶V(丙酮)=10∶1]經氯仿重結晶得化合物3(4.3 mg)；組分3[V(石油醚)∶V(丙酮)=9∶1]經氯仿重結晶得化合物4；組分6[V(石油醚)∶V(丙酮)=8∶2]經反復硅膠柱層析純化和甲醇重結晶得 2(13.5 mg)；組分9～14[V(石油醚)∶V(丙酮)=7∶3,丙酮],經制備薄層層析[20 cm×20 cm；V(氯仿)∶V(甲醇)∶V(醋酸)=95∶5∶8.2；Rf=0.45]得化合物1(65.5 mg)；組分15經HPLC色譜制備得化合物5(56.7 mg， 15%甲醇洗脫).

1.3 提取與分離

化合物1 白色針晶,m.p. 253～255 ℃,IR(KBr)(νmax,cm-1):3400(-OH),1650,1020;EI-MS(rel. int.)m/z:430([M]+,3),412([M-H2O]+,100),394([M-2H2O]+,60),379(67),287(15),269(43),251(50),95,81,69,55;1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ:5.74(1H,s,H-7),5.24(2H,m,H-22,H-23),4.84(1H,m,H-2),4.32(1H,s,H-6),3.01(1H,dd,J=12.0,12.0 Hz,H-4),1.52(3H,s,H-19),1.07(3H,d,J=6.4 Hz,H-21),0.91(3H,d,J=6.4 Hz,H-26,H-27),0.67(3H,s,H-18);13C NMR(100MHz,CDCl3)δ：32.6(C-1),33.8(C-2),67.6(C-3),42.0(C-4),76.1(C-5),74.3(C-6),120.4(C-7),141.6(C-8),43.8(C-9),38.1(C-10),22.4(C-11),40.1(C-12),43.9(C-13),55.2(C-14),23.5(C-15),28.2(C-16),56.5(C-17),12.3(C-18),18.8(C-19),40.4(C-20),19.6(C-21),135.2(C-22),132.5(C-23),42.8(C-24),33.1(C-25),19.9(C-26),21.1(C-27),17.6(C-28).數(shù)據(jù)與文獻[6]對照基本一致，故鑒定化合物1為麥角甾-7,22-二烯-3β,5α,6β-三醇.

熔點用四川大學科儀廠生產的XRC-1型顯微熔點儀測定，未校正.UV由UV 210 A型分光光度計測定.IR由Bio-Rad FTS-135紅外光譜儀測定.NMR由Bruker AM-400和Bruker DRX-500核磁共振儀測定，TMS為內標.MS由VG Auto Spec-3000質譜儀測定.薄層層析硅膠和柱層析硅膠均為青島海洋化工廠產品.用10% H2SO4-乙醇 加熱顯色和用I2蒸汽顯色. 安捷倫1100型高效液相色譜儀，色譜柱為安捷倫ZORBAX SC-C18(9.4 mm×250 mm,5 m)反相柱.

1.2 儀器與試劑

2 結構鑒定

土壤酸堿度（pH值）是反映土壤化學性質的重要指標之一，對土壤養(yǎng)分有效性、土壤微生物區(qū)系分布以及土壤重金屬元素的活性均有顯著影響。2011-2015年間，浦口區(qū)耕地土壤酸堿度呈下降趨勢，從2011年的6.30下降到2015年的6.18，年平均下降0.02，總體上呈現(xiàn)酸化趨勢，特別是在丘陵山區(qū)的監(jiān)測點下降更加明顯，這與長期施用酸性肥料、水土流失等有關。平原圩區(qū)大多呈微酸性至中性反應，沿江下圩地區(qū)脫鈣過程尚末完成，pH值較高，大多在7.5以上，越向江邊靠近，pH值越高，并有弱石灰反應至強烈反應不等，有些土壤剖面中已形成石灰結核。

化合物2黃色針晶(石油醚/丙酮);m.p.112.5～114 ℃;IR(KBr)(νmax,cm-1):1676(C=O)，1638,1589(C=C),1 270,1 225,965 cm-1;EI-MS(70eV)m/z(rel. int.):392([M]+,70),377([M-CH3]+,7),349(10),268(100),253(45),214(48),173(30),109(35),81(52),69(70),55(73);1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ:6.58(1H,d,J=9.4 Hz,H-7),6.00(1H,J=9.4 Hz,H-6 ),5.70(1H,s,H-4),5.24(1H,dd,J=15.2,7.2 Hz,H-23),5.18(1H,dd,J=15.2,7.2 Hz，H-22),2.53-1.21(18H,m,steroid necleus),1.03(3H,d,J=6.6 Hz,H-21),0.97(3H,s,H-19),0.93(3H,s,H-18),0.90(3H ,d,J=6.8 Hz,H-28),0.82(3H,d,J=6.8 Hz,H-27),0.81(3H,d,J=6.6 Hz,H-26);13C NMR(100 MHz，CDCl3).199.2(C-3),156.04)(C-14),134.9(C-22),133.9(C-7),132.5(C-23),124.4(C-8，6),122.9(C-4),55.7(C-17),44.3(C-9),43.95(C-13),42.8(C-24),39.3(C-20),36.7(C-10),35.6(C-15),34.1(C-1，12),33.1(C-25),25.3(C-11),27.7(C-16),21.2(C-21),19.6(C-26),19.96(C-27),18.95(C-2，18),17.61(C-28)，16.62(C-19).13C NMR數(shù)據(jù)與文獻[7]對照一致，鑒定化合物2為麥角甾-4,6,8( 14),22-四烯-3-酮.

日軍見偷襲不成，惱羞成怒，一起朝最近的女兵石屋掃射。子彈已經在李曉英居住的石屋周圍迸出了火花。陳山利飛奔的腳步，恨不得一下飛到李曉英面前，為她擋槍遮彈。

化合物5無色針晶;m.p. 154.5～156 ℃;[α]D21=0°(c0.003 60,H2O)為內消旋，已知無光學活性的糖醇只有D-阿洛醇和D-半乳醇(galactitol)，其熔點的文獻值分別為150～151 ℃和188.5 ℃[10]，而實測值154.5～156 ℃與D-阿洛醇的基本一致； IR(KBr)(νmaxcm-1)：3 271,2 959,2 936,1 461,1 377,1 351,1 332,1 304,1 092,1 025,932,890,874,712,624；1H NMR(400 MHz，C5D5N)δ:4.36(q，4H),4.54(m,7H),4.86(d,3H)；13C NMR(100 MHz，DMSO-d6)δ:73.45(d,C-3,C-4),72.33(d,C-2,C-5),65.54(t,C-1,C-6)； EI-MS (70 eV)m/z(rel. int.)：183([M+H]+,36.4),146(15.2),133(70),115(25.8),103(73),93(53),85(49.5),74(84),73(100),61(89).根據(jù)上述波譜數(shù)據(jù)和理化性質，該化合物的結構被確定為D-阿洛醇.

化合物4無色針晶 (氯仿/甲醇)，m.p.147～149 ℃;EI-MS(rel. int.):398([M]+,17),380([M-H2O]+,6),363(35),303(8),251(20),152(30),107(24),95(35),81(43),69(65);13C NMR(100Hz,CDCl3)δ:139.6(C-8),135.1(C-22),131.9(C-23),117.4(C-7),71.0(C-3),55.9(C-17),55.1(C-14),49.4(C-9),43.3(C-13),42.8(C-24),40.5(C-20),40.2(C-5),39.4(C-12),38.0(C-4),34.2(C-10),33.1(C-25),31.5(C-6),30.5(C-1),29.6(C-2),28.1(C-16),22.9(C-15),21.5(C-11),21.1(C-21),19.9(C-28)，19.6(C-27),17.6(C-26),13.0(C-19),12.1(C-18).13C NMR數(shù)據(jù)與文獻[9]對照基本一致，故鑒定化合物4為麥角甾-7,22-二烯-3β-醇.

化合物3C28H44O;無色針晶(石油醚/氯仿);m.p.154～156 ℃；EI-MS(rel. int.)m/z:396([M]+,100),378([M-H2O]+,7),363(79),337(43),253(38),157(37),143(46),109(29),95(32),81(56),69(84),55(87).1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ:5.56(1H,m),5.37(1H,m),5.18(2H,m,H-22,23),3.62(1H,m,H-3),1.02(3H,d,J=6.8 Hz,H-4),0.91(3H,s,H-19),0.90(3H,d,J=6.4 Hz,H-21),0.78(3H,d,J=6.4 Hz,H-26,H-27),0.67(3H,s,H-18);13C NMR(100 MHz,CDCl3)δ:141.41(C-8),139.9(C-5),135.7(C-22),132.1(C-23),119.7(C-6),116.4(C-8),70.54(C-3),55.8(C-17),54.7(C-14),46.4(C-9),43.0(C-24),42.9(C-13),40.9(C-12),40.5(C-12),39.2(C-1),38.5(C-10),37.1(C-4),33.2(C-25),32.1(C-2),28.4(C-16),23.1(C-15),21.2(C-11,C-12),20.0(C-27),19.7(C-26),17.7(C-28),16.4(C-19),12.3(C-18).13C NMR數(shù)據(jù)與文獻[8]對照一致.故鑒定化合物3為麥角甾-5,7,22-三烯醇-3β-醇.

化合物6橙紅色針晶(甲醇)，m.p.255～257 ℃;IR(KBr)(νmaxcm-1):3 429(OH),1 684(free C=O),1 632(chelated C=O),1 558,1 541,1 485;UVλmaxEtOH:221(4.4),253(1.9),266(2.1),290(2.5);EI-Msm/z:270[M+H]+;1H NMR(600 MHz,DMSO-d6)δ:12.07(1H,s,8-OH),12.00(1H,s,1-OH),11.43(1H,s,6-OH),7.47(1H,s,H-4),7.15(1H,d,J=2.4 Hz,H-5),7.10(1H,d,J=1.2 Hz,H-2),6.58(1H,d,J=2.4 Hz,H-7),2.48(3H,s,CH3);13C NMR(125 MHz,DMSO-d6)δ189.7(C-9),181.4(C-10),165.6(C-8),164.9(C-1),161.4(C-6),148.3(C-3),135. 1(C-14),132.8(C-11),124.2(C-7),120.5(C-5),113.4(C-12),109.0(C-13),108.8(C-4),108.0(C-2),21.5(6-CH3).數(shù)據(jù)與文獻[11]對照基本一致，鑒定化合物6為大黃素.

化合物7黃色針晶(丙酮)，m.p.235～236 ℃,EI-MSm/z:270[M+H]+;1H NMR(500 MHz,DMSO-d6)δ:11.92(1H,s,1-OH),11.85(1H,s,8-OH),7.76(1H,dd,J= 2.0/8.0 Hz,H-5),7.64(1H,J=8.0/8.0 Hz,H-6),7.63(1H,d,J=1.2 Hz,H-4),7.34(1H,dd,J=2.0/8.0 Hz,H-7),7.23(1H,d,J=1.2 Hz,H-2),4.60(2H,s,CH2OH);13C NMR(125 MHz,DMSO-d6)δ;191.6(C-9),181.3(C-10),161.5(C-1),161.3(C-8),153.7(C-3),137.3(C-6),133.2(10α),133.0(4α),124.4(C-7),120.6(C-5),119.3(C-2),117.1(C-4),115.8(9α),114.3(8α),62.0(CH2OH). 數(shù)據(jù)與文獻[12]對照基本一致，鑒定化合物7為大黃素甲醚.

3 結語

對采自云南麗江的華麗牛肝菌新鮮子實體進行了化學成分研究，從中分離得到7個化合物，其中4個麥角甾類衍生物 (化合物1～4)，1個糖醇類化合物(化合物5)和2個蒽醌類色素(化合物6、7).所有化合物均為首次從華麗牛肝菌新鮮子實體中分離得到，為了解該菌的化學成分提供參考.

對在線監(jiān)控來說，主要在機電一體化技術支持下，能夠讓煤礦作業(yè)得到有效監(jiān)控與管理，構成部分有電動機、供油設備和傳動系統(tǒng)等。監(jiān)控系統(tǒng)可以從設備狀態(tài)出發(fā)，在發(fā)現(xiàn)有異常現(xiàn)象以后可以自動報警，并將設備具體位置發(fā)送給管理人員，以達到警示的作用。這樣就極大減輕了工作人員工作量，煤礦設備日常維護效率也變得更高，管理人員通過及時采取解決措施，可以最大限度減少經濟損失。此外，還可以對煤礦設備進行有效的故障診斷，將故障原因查找出來以后，通過采取一定解決方法，確保不影響正常的煤礦生產。

牛肝菌等顏色鮮艷真菌新鮮子實體中的色素類物質類型豐富，引人興趣.已有研究表明一些血紅色真菌如朱紅絲膜菌(Dermocybesanguinea)含有大量的酸性蒽醌類色素物質，而大黃素正是這些色素物質的生源前體[13].本文研究結果顯示，華麗牛肝菌未受傷子實體中主要的色素類物質是蒽醌類成分，這為了解牛肝菌的原生色素提供了參考.

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(責任編輯 王 琳)

Chemical constituents in the fruiting bodies ofBoletusmagnificusW.F.Chiu

HU Lin1,LIU Ji-kai2,WANG Fang-fang1

(1.Key Laboratory of Chemistry in Ethnic Medicinal Resources,State Ethnic Affairs commission and Ministry of Education,Yunnan Minzu University,Kunming,Yunnan 650500,China;2.State Key Laboratory of Phytochemistry and plant resources in West China Kunming Institute of Botany,China Academy of Science,Kunming 650204,China)

Seven compounds were isolated and purified from the fruiting bodies ofBoletusmagnificuscollected from Lijiang Prefecture of Yunnan province,with the help of the silica gel column chromatography (CC) and HPLC methods. The structures of these compounds were elucidated by the spectral analysis as follows: ergosta-7,22-dien-3β,5α,6β-triol(1),ergosta-4,6,8,(14),22-tetraen-3-one(2),ergosta-5,7,22-trien-3β-ol(3),ergosta-7,22-dien-3β-ol(4),D-allitol(5),emodin(6) and physcion(7). All the compounds were isolated from the fruiting bodies of B.magnificus for the first time.

BoletusmagnificusW. F. Chiu; fruiting bodies; chemical constituents

2014年云南民族大學獲得國家自然科學基金資助項目

2014-11-24.

云南省技術創(chuàng)新暨產業(yè)發(fā)展基金(2011XB011).

胡琳(1976-)，女，博士,副教授，碩士生導師.主要研究方向:民族藥用植物的開發(fā)利用.

S685.12;R284.1

A

1672-8513(2015)02-0094-04