余四娜

(云南省福貢縣動物疫病預(yù)防控制中心,云南福貢 673400)

福貢縣豬細小病毒病的流行情況監(jiān)測與分析

余四娜

(云南省福貢縣動物疫病預(yù)防控制中心,云南福貢 673400)

2012年～2014年,采用豬細小病毒酶聯(lián)免疫吸附試驗,對我縣57個村飼養(yǎng)的部分生豬進行了豬細小病毒監(jiān)測。共監(jiān)測血清樣品687份,結(jié)果:豬細小病毒血清抗體陽性數(shù)112份,陽性率16.30%。通過監(jiān)測,基本查清了我縣豬細小病毒的流行分布情況。

豬;細小病毒;監(jiān)測

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 被檢血清

無菌采集豬耳靜脈或前腔靜脈血液樣品，離心或靜置分離血清，待血清析出后，收集血清，冷藏（冷凍）保存待用。

1.1.2 試劑

檢測試劑均由武漢科前動物生物制品有限責(zé)任公司提供，批號：（2012年、120602，2013年、130301、130402，2014年、140301）

1.2 方法

豬細小病毒ELISA試驗

（1）洗滌液配制 使用前，濃縮的洗滌液應(yīng)恢復(fù)至室溫（20～25℃），半搖動使沉淀的鹽溶解，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋（例如：30ml的濃縮洗滌液加上570ml蒸餾水），稀釋好后的洗滌液在2～8℃可以存放7d。

（2）樣品和對照稀釋

（3）樣品稀釋：在血清稀釋中按1：40的體積稀釋血清樣品（例如：195μl樣品稀釋液中加入5μl待檢血清樣品）。

（4）對照稀釋：在血清稀釋板中按1：4分別稀釋陽性對照和陰性對照（例如：180μl樣品稀釋液中加入60μl對照血清）。

（5）操作步驟

①取抗原包被板，分別將稀釋好的待檢血清和對照各取100uL加入到抗原包被板孔中，待檢樣品做1孔，陰陽性對照各做2孔。輕輕振勻孔中樣品（勿溢出），置37℃溫育30 min。

②甩掉孔中的溶液，每孔中加入稀釋液200μl，靜置3min倒掉，再在吸水紙上拍干，共計洗滌5次。

③每孔加入羊抗豬酶標二抗100μl，置37℃溫育30min。

④洗滌5次，方法同②。

⑤每孔加底物A、B液各1滴（50μl），混勻，室溫避光顯色10min。

⑥每孔加終止液1滴（50μl），10min內(nèi)測定結(jié)果（測定前在震蕩器上輕輕震動一下）。

（6）結(jié)果判定

在酶標儀上測各孔OD630值，試驗成立的條件是陽性對照孔平均OD630值≥0.6，陰性對照孔平均OD630值必須＜0.3。

樣品孔OD630值≥0.4，判為陽性，樣品孔OD630值＜0.4，判為陰性。

2 結(jié)果與分析

2.1 結(jié)果

采用豬細小病毒ELISA抗體檢測試驗，2012年～～2014年共檢測血清樣品687份，檢出陽性血清112份，陽性率為16.30%（112/687），其中：2012年監(jiān)測129份，檢出陽性數(shù)1份，陽性率0.775%（1/129），2013年監(jiān)測304份，檢出陽性數(shù)51份，陽性率16.78%（51/304），2014年監(jiān)測254份，檢出陽性數(shù)60份，陽性率23.62%（60/254）。從2012年～2014年血清樣品檢測情況看，馬吉鄉(xiāng)送檢豬血清樣品111份，陽性數(shù)33份，陽性率29.73；石月亮鄉(xiāng)送檢豬血清樣品66份，陽性數(shù)1份，陽性率1.52%；鹿馬登鄉(xiāng)送檢豬血清79份，陽性數(shù)31份，陽性率39.24%；上帕鎮(zhèn)送檢豬血清樣品95份，陽性數(shù)13份，陽性率13.68%；架科底鄉(xiāng)送檢豬血清樣品157份，陽性數(shù)29份，陽性率18.47%；子里甲鄉(xiāng)送檢豬血清樣品89份，檢出陽性數(shù)5份，陽性率5.62%；匹河鄉(xiāng)送檢豬血清樣品90份，未檢出陽性數(shù)（具體檢監(jiān)測情況見表1、表2、表3）。

表1 2012～2014年豬細小病毒監(jiān)測情況

表2 2011-2014年豬細小病毒陽性率對比圖

表3 2012年～2014年鄉(xiāng)鎮(zhèn)豬細小病毒監(jiān)測情況

2.2 分析

從豬細小病毒ELISA抗體檢測試驗結(jié)果來看，我縣除匹河鄉(xiāng)未檢出豬細小病毒陽性血清外其余鄉(xiāng)鎮(zhèn)均有檢出陽性數(shù)。該病在我縣感染的原因有以下幾點：一是在引種時，檢疫把關(guān)不嚴，防制措施不得力。為促進我縣養(yǎng)豬業(yè)的快速發(fā)展，有關(guān)部門在不了解原產(chǎn)地疫情狀況及牲畜免疫背景情況下從外縣引進大批種豬用仔豬扶持給農(nóng)戶飼養(yǎng)，從而給本病的流行傳播創(chuàng)造了條件；二是由于自然條件差，農(nóng)戶飼養(yǎng)管理跟不上等因素，致使豬抵抗力下降，病原乘虛而入，引發(fā)了本病的發(fā)生；三是養(yǎng)殖農(nóng)戶防疫意識差，疫情觀念不強，對引進的種豬沒有進行嚴格的隔離觀察和預(yù)防接種。

3 討論

（1）從2012～2014年豬細小病毒ELISA抗體檢測試驗結(jié)果來看，我縣豬細小病毒ELISA抗體檢測試驗檢出陽性數(shù)112份，陽性率為16.72 %，除匹河鄉(xiāng)未檢出陽性數(shù)外其余鄉(xiāng)鎮(zhèn)均有檢出陽性數(shù)。豬細小病毒屬于二類動物疫病。

（2）由于豬細小病毒病對各種不同年齡、性別的家豬和野豬均易感。傳染源主要來自感染細小病毒的母豬和帶毒的公豬，后備母豬比經(jīng)產(chǎn)母豬易感染，病毒能通過胎盤垂直傳播，而帶毒豬所產(chǎn)的活豬可能帶毒排毒時間很長甚至終生。感染種公豬也是該病最危險的傳染源，可在公豬的精液、精索、附睪、性腺中分離到病毒，種公豬通過配種傳染給易感母豬，并使該病傳播擴散。

（3）強化生物安全體系建設(shè)，環(huán)境條件、硬件設(shè)施要滿足豬生長、繁殖的要求，衛(wèi)生（衛(wèi)生要求保持清潔、干燥、通風(fēng)）、消毒（常見的消毒藥有氫氧化鈉、3%來蘇爾、含氯消毒粉、甲醛、生石灰等）、隔離（隔離期一般為2～4周）、無害化處理（對病死畜無害化處理的方法一般是深埋或燒毀）等疫病防控制度不但要健全更重要的是落實。

（4）把好引種關(guān)。引種往往是導(dǎo)致豬細小病毒病發(fā)生的重要原因，引種前應(yīng)了解被引進場豬群是否有豬細小病毒感染，懷孕母豬是否有繁殖障礙臨床表現(xiàn)，母豬群是否做過疫苗預(yù)防接種，不能單純以引進種（母）豬PPV血清抗體檢測陰性為標準，引進的種（母）豬應(yīng)先飼養(yǎng)在隔離場（廄）進行隔離觀察，兩周后無異常混群飼養(yǎng)。

（5）豬細小病毒病目前尚無有效的治療方法，有流產(chǎn)、死胎及產(chǎn)木乃伊臨床表現(xiàn)時應(yīng)在飼料或飲水中添加廣譜抗菌類藥物（如青霉素、氨芐西林等）控制“產(chǎn)后”感染。

（6）制定科學(xué)和切實有效的免疫接種計劃，做好免疫接種。豬細小病毒只有一個血清型且免疫原性良好，疫苗接種種公豬及種母豬對預(yù)防母豬感染豬細小病毒所引起的流產(chǎn)、死胎、產(chǎn)木乃伊等臨床表現(xiàn)有著良好的效果。

[1] 曹三杰，文心田.應(yīng)用斑點免疫金染色法檢測豬細小病毒病抗體的研究[J]. 中國獸醫(yī)雜志，2003，39（11）：3-6.

[2] 諸亞平，趙長城.豬細小病毒病流行的調(diào)查與防疫研究[J].畜牧與飼料科學(xué)，2009，30（1）：114-115.