王志江　梁麗麗（山東中醫(yī)藥高等專科學(xué)校，山東 煙臺(tái) 264199）

氣相色譜-質(zhì)譜與化學(xué)計(jì)量學(xué)相結(jié)合進(jìn)行中藥揮發(fā)油成分的分析

王志江梁麗麗
（山東中醫(yī)藥高等?？茖W(xué)校，山東 煙臺(tái) 264199）

本文對(duì)采用氣相色譜-質(zhì)譜與化學(xué)計(jì)量學(xué)相結(jié)合進(jìn)行中藥揮發(fā)油成分分析的主要步驟及相應(yīng)方法進(jìn)行研究，并將該方法應(yīng)用于單味中藥和桃仁-紅花藥對(duì)揮發(fā)油的分析，取得了較為理想的效果。

氣相色譜-質(zhì)譜；中藥揮發(fā)油；化學(xué)計(jì)量學(xué)；桃仁；紅花

由于中藥揮發(fā)油的揮發(fā)性，導(dǎo)致我國(guó)中藥藥效存在不穩(wěn)定性，針對(duì)上述問(wèn)題，我國(guó)對(duì)中藥揮發(fā)油成分的分析研究必不可少，并應(yīng)用相關(guān)的化學(xué)計(jì)量方法保證分析的正確性。

一﹑中藥揮發(fā)油的氣相色譜-質(zhì)譜技術(shù)與化學(xué)計(jì)量學(xué)方法

1 非迭代計(jì)量法。非迭代計(jì)量法采取漸進(jìn)的形式，通過(guò)子窗口的信息，可處理迭代計(jì)量法中面臨的真值難以收斂的難題。其種類有多種，比較常見(jiàn)的有漸進(jìn)因子分析法﹑窗口因子分析法以及直觀推導(dǎo)式演進(jìn)特征投影法等。

2 迭代計(jì)量法。迭代計(jì)量法需要選定一組最為關(guān)鍵的光譜，比如初代矩陣轉(zhuǎn)換﹑自動(dòng)窗口因子分析計(jì)量法等交替正交投影法以及最小二乘法等。在這種方法使用時(shí)，會(huì)遇到真值難以收斂的情況。

二﹑中藥揮發(fā)油研究的主要步驟

1提取揮發(fā)油成分。中藥揮發(fā)油成分的提取可使用水蒸氣蒸餾法。在提取時(shí)，常使用正己烷﹑二甲苯等做溶劑。對(duì)于提取一些易氧化與熱不穩(wěn)定的物質(zhì)，可以選擇采取超臨界流體萃取方法。例如，可以使用此方法萃取紫蘇梗的揮發(fā)油成分。

2設(shè)定氣相色譜-質(zhì)譜的色譜條件。設(shè)定儀器和色譜柱等條件穩(wěn)定，主要考慮程序的升溫條件。通常采取單階與多階段程序升溫。在揮發(fā)油分析時(shí)，一般情況下，單階程序升溫將60℃設(shè)為起始的溫度，將280℃作為終點(diǎn)溫度，設(shè)置升溫速率為4℃/min.而多階程序溫度通常適合寬沸程的試樣。

3使用化學(xué)計(jì)量學(xué)方法分析色譜重疊峰。使用氣相色譜-質(zhì)譜得到總離子流圖，對(duì)于完全分離的色譜峰，可直接使用檢索儀器并使用保留時(shí)間信息確定中藥揮發(fā)油的成分結(jié)構(gòu)。而在出現(xiàn)未完全分離的色譜峰時(shí)，不能單使用檢索儀器，應(yīng)結(jié)合利用化學(xué)計(jì)量方法對(duì)其進(jìn)行定性定量的解析，如圖1所示。

由于譜圖疊合比較嚴(yán)重，我們直接從二維圖中也找不到清晰的選擇性區(qū)域，此時(shí)利用秩圖和特征投影圖給出的信息，可以發(fā)現(xiàn)這是一個(gè)兩組分重疊的數(shù)據(jù)，并能從秩圖上只有一個(gè)特征值大于噪聲水平的區(qū)域以及特征投影圖中從原點(diǎn)出發(fā)的直線段中找到兩個(gè)組分的選擇性區(qū)域。

圖1

三﹑在實(shí)際揮發(fā)油研究中的具體應(yīng)用

1在單味中藥材揮發(fā)油研究的應(yīng)用。在用化學(xué)計(jì)量方法對(duì)揮發(fā)油進(jìn)行輔助研究時(shí)，一般使用直觀推導(dǎo)式演進(jìn)特征投影法即HELP的色譜重疊峰解析方法。比如李雅文分析仙鶴草中揮發(fā)油成分時(shí)，使用固定尺寸移動(dòng)窗口因子分析方法﹑主成分分析方法等方法分別對(duì)重疊色譜峰的背景秩和進(jìn)行了分析和扣除，并利用HELP方法，借助NIST質(zhì)譜庫(kù)，運(yùn)用總體積積分法進(jìn)行分析，鑒定出了仙鶴草揮發(fā)油的50個(gè)組分，主要是單萜和醇類化合物，其含量達(dá)到了揮發(fā)油總含量的90.53%。

2在藥對(duì)揮發(fā)油研究的應(yīng)用。藥對(duì)作為單味藥到復(fù)方的連線，具備了中藥配伍的基本特點(diǎn)。在煎煮時(shí)，藥對(duì)容易發(fā)生還原﹑氧化﹑水解﹑縮合等復(fù)雜化學(xué)反應(yīng)，以及容易發(fā)生增溶作用等物理變化，導(dǎo)致某些單味藥的藥量增加，而某些單味藥的藥量減少或者消失。以下是對(duì)桃仁，紅花這兩種單味藥的配伍后揮發(fā)油成本變化的實(shí)驗(yàn)研究：（1）儀器和試劑的選擇。采用日本島津公司的QP2010型的相色譜儀-質(zhì)譜儀；采用河南南陽(yáng)藥材公司的桃仁﹑紅花兩種單味藥；使用北京化工廠提供的正己烷。（2）提取藥對(duì)揮發(fā)油。將各100g的紅花與桃仁取出來(lái)，然后與水成1：7方式混合，加熱煮沸后，將沸騰時(shí)間保持40min，然后依據(jù)我國(guó)藥典中揮發(fā)油的測(cè)定方法采用甲法對(duì)其進(jìn)行提取，最后將取出來(lái)的揮發(fā)油與正己烷相溶后放入冰箱中保存。同時(shí)用此方法來(lái)對(duì)單味藥的揮發(fā)油進(jìn)行提取。（3）設(shè)置氣相色譜-質(zhì)譜的條件。設(shè)定色譜柱為OV-130m0.25mm，色譜柱的起始溫度設(shè)定為40℃，以2℃/min的加熱速度加熱到120℃，然后再以10℃/min的加熱速度加熱到230℃，在230℃保持加熱時(shí)間20min。設(shè)定進(jìn)口溫度為250℃﹑界面溫度為280℃﹑He載氣流為1.0ml/min﹑EI源電子能為量70ev，以及對(duì)其它相關(guān)條件進(jìn)行相應(yīng)設(shè)定。

結(jié)語(yǔ)

通過(guò)實(shí)際應(yīng)用可以發(fā)現(xiàn)，利用相色譜-質(zhì)譜與化學(xué)計(jì)量學(xué)相結(jié)合的方法，可以成功的完成對(duì)中藥揮發(fā)油成分的分析。利用化學(xué)計(jì)量學(xué)方法對(duì)重疊色譜峰進(jìn)行解析，可以保證揮發(fā)油成分分析的準(zhǔn)確性和定量性，保證研究結(jié)果的正確性。

[1]騰海英，曲麗萍，李曉林，等．氣相色譜-質(zhì)譜結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)方法分析中藥揮發(fā)油成分的研究進(jìn)展[J]．藥學(xué)實(shí)踐雜志，2010，28（04）．

[2]李曉如，梁逸曾，郭方遒，等．氣相色譜/質(zhì)譜-化學(xué)計(jì)量學(xué)法分析測(cè)定藥對(duì)桃仁-紅花揮發(fā)油[J]．分析化學(xué)，2007，35（04）．

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宋麗麗，女，山東中醫(yī)藥高等?？茖W(xué)校，講師，郵編：264199