摘要：以4個(gè)品種山葡萄（Vitis amurensis Rupr.）為試驗(yàn)材料，對(duì)比不同品種間果皮花色苷含量的差異。結(jié)果表明，總花色苷含量左山一最高，為13.782 mg/g，顯著高于其他3個(gè)品種，野生山葡萄最低，為9.361 mg/g；單糖苷含量左紅一最高，為4.945 mg/g，野生山葡萄最低，為1.837 mg/g；雙糖苷含量左山一最高，為11.909 mg/g，左紅一最低，為6.703 mg/g。左山一、雙紅、野生山葡萄、左紅一雙糖苷與單糖苷之比分別為6.35∶1、4.48∶1、4.09∶1、1.35∶1。

關(guān)鍵詞：山葡萄（Vitis amurensis Rupr.）； 花色苷；含量比較

中圖分類號(hào)：S663.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2015）13-3171-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.13.026

Comparisons on Anthocyanin Types and Contents of Different Varieties of Vitis amurensis

ZHAO Quan

（Jilin Agricultural Science and Technology College， Jilin 132101， Jilin， China）

Abstract： Taking four Vitis amurensis Rupr. fruits as test materials，the differences of anthocyanins content in fruit skins of different varieties of V. amurensis Rupr. were investigated. Results showed that total anthocyanins content of Zuoshanyi was the highest for 13.782 mg/g，significantly higher than that of other three varieties， the content of wild V. amurensis was the lowest for 9.361 mg/g；The monoglucosides of Zuohongyi was the highest for 4.945 mg/g，the content of wild V. amurensis was the minimum for 1.837 mg/g；The diglucosides content of Zuoshanyi was the highest for 11.909 mg/g， the content of Zuohongyi was the lowest for 6.703 mg/g；The ratio of diglucosides and mono glucosides anthocyanidins for Zuoshangyi， Shuanghong， wild V. amurensis and Zuohongyi were 6.35∶1，4.48∶1，4.09∶1，1.35∶1，respectively.

Key words： Vitis amurensis Rupr.； anthocyanin； comparison of content

山葡萄（Vitis amurensis Rupr.）屬葡萄科葡萄屬植物，具有多酚含量高、含糖量低的特點(diǎn)，主要用于釀酒[1-3]。葡萄按起源中心不同，有歐亞種群、美洲種群和東亞種群，中國東北地區(qū)的吉林、遼寧已經(jīng)大面積種植，同時(shí)林區(qū)野生藏量豐富[4，5]。

花色苷（Anthocyanins）是類黃酮途徑的一個(gè)產(chǎn)物，葡萄中的花色苷分布于果皮、果肉、葡萄子中，果皮中含量最高[6]?；ㄉ帐怯苫ㄉ睾吞切纬傻奶擒眨瑢儆贑6-C3-C6骨架結(jié)構(gòu)。在花色素A環(huán)3位上結(jié)合一個(gè)葡萄糖后形成單糖苷，在3位和5位上分別結(jié)合一個(gè)葡萄糖形成雙糖苷[5]。前人研究表明山葡萄花色素雙葡萄糖苷所占比例大于單葡萄糖苷[7-9]。目前山葡萄花色苷方面的研究主要集中在色素提取、生物合成調(diào)控、抗氧化等方面[10-16]，對(duì)于品種間總花色苷、單雙糖苷及五類花色苷的比較研究鮮見報(bào)道，特別是對(duì)野生資源豐富的山葡萄花色苷和山-歐雜交種花色苷研究報(bào)道很少。

為此，以野生山葡萄選育品種左山一、山葡萄和歐洲（簡(jiǎn)稱山-歐）雜交種左紅一、山葡萄種間雜交種雙紅3個(gè)審定品種和吉林市豐滿區(qū)松花湖沿岸野生山葡萄為試驗(yàn)材料，探討不同品種山葡萄間花色苷種類及含量的差異，以期為山葡萄資源的開發(fā)和綜合利用提供借鑒，同時(shí)對(duì)合理利用野生山葡萄資源和歐亞種葡萄資源提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

供試山葡萄品種為野生山葡萄選育品種左山一、山葡萄和歐洲雜交種左紅一、山葡萄種間雜交種雙紅3個(gè)審定品種，以及吉林市豐滿區(qū)松花湖沿岸野生山葡萄。采樣時(shí)間為2014年9月15日，即東北山葡萄釀酒采收時(shí)期。

1.2 方法

山葡萄剝皮后將葡萄皮干燥。稱取1.00 g干葡萄皮粉，加入50 mL 1%（V/V）的鹽酸甲醇溶液，于30 ℃避光提取2 h，重復(fù)提取3次，合并提取液，40 ℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，殘留物用甲醇定容至5 mL，-40 ℃保存待測(cè)。本研究花色苷定性建立在中國農(nóng)業(yè)大學(xué)葡萄酒研究中心葡萄與葡萄酒花色苷HPLC-MS/MS指紋譜庫的基礎(chǔ)上，通過對(duì)樣品HPLC-MS/MS圖譜中質(zhì)譜信息和保留時(shí)間與譜庫比對(duì)分析，從而確定各樣品中花色苷的種類與結(jié)構(gòu)。標(biāo)準(zhǔn)品為二甲花翠素-3-葡萄糖苷（Malvidin-3-glucoside）。通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算果皮（干重）中花色苷含量。

總花色苷的測(cè)定參照王華等[17]的方法，530 nm處測(cè)定吸光度；高效液相色譜條件參考趙權(quán)[5]的方法。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同品種山葡萄花色苷的種類

4個(gè)品種山葡萄果皮中共檢測(cè)出13種花色苷，色譜信息如圖1。其中，單糖苷7種，雙糖苷6種。7種單糖苷分別為花青素-3-葡萄糖苷（峰7）、甲基花青素-3-葡萄糖苷（峰10）、甲基花青素-3-葡萄糖苷-4-丙酮酸（峰13）、花翠素-3-葡萄糖苷（峰4）、甲基花翠素-3-葡萄糖苷（峰9）、二甲花翠素-3-葡萄糖苷（峰11）、甲基花翠素香豆?；咸烟擒?4-丙酮酸（峰12）；6種雙糖苷分別為花青素-3，5-雙葡萄糖苷（峰2）、甲基花青素-3，5-雙葡萄糖苷（峰6）、花葵素-3，5-雙葡萄糖苷（峰5）、花翠素-3，5-雙葡萄糖苷（峰1）、甲基花翠素-3，5-雙葡萄糖苷（峰3）、二甲花翠素-3，5-雙葡萄糖苷（峰8）。

2.2 不同品種山葡萄皮中單糖苷含量比較

由圖2可以看出，4個(gè)品種山葡萄單糖苷含量最高的為左紅一，達(dá)4.945 mg/g，其次為雙紅，含量為2.174 mg/g，左山一含量為1.873 mg/g，含量最低的為野生山葡萄，含量為1.837 mg/g。方差分析和多重比較結(jié)果表明，山-歐雜交種左紅一與雙紅、左山一、野生山葡萄3個(gè)品種間含量差異極顯著；雙紅與左山一和野生山葡萄間含量差異顯著；左山一和野生山葡萄間含量差異不顯著。

2.3 不同品種山葡萄皮中雙糖苷含量比較

由圖3可以看出，4個(gè)品種山葡萄雙糖苷含量最高的為左山一，達(dá)11.909 mg/g，其次為雙紅，含量為9.753 mg/g，野生山葡萄的含量為7.524 mg/g，左紅一的含量最低，為6.703 mg/g。方差分析和多重比較結(jié)果表明，左山一雙糖苷含量與雙紅含量差異顯著；與野生山葡萄和左紅一含量差異極顯著；左紅一和野生山葡萄間含量差異不顯著。

2.4 不同品種山葡萄皮中總花色苷含量比較

釀酒葡萄花色苷含量決定著葡萄酒的色澤和風(fēng)味，對(duì)葡萄酒品質(zhì)具有重要的影響。由圖4可以看出，4個(gè)品種山葡萄果皮中總花色苷含量最高的為左山一，為13.782 mg/g，其次為雙紅，為11.927 mg/g，左紅一含量為11.648 mg/g，含量最低的為野生山葡萄，為9.361 mg/g。通過方差分析和多重比較，左山一作為野生選育品種，與野生山葡萄花色苷含量差異極顯著；左山一與種間雜交種雙紅和山-歐雜交種左紅一間含量差異顯著；雙紅和左紅一間含量差異不顯著。

3 小結(jié)

試驗(yàn)結(jié)果表明，總花色苷含量最高的為野生選育的品種左山一，高達(dá)13.782 mg/g，顯著高于其他3個(gè)品種，野生山葡萄的含量最低，為9.361 mg/g；單糖苷含量最高的為左紅一，達(dá)4.945 mg/g，野生山葡萄的含量最低，為1.837 mg/g；雙糖苷含量最高的為左山一，達(dá)11.909 mg/g，左紅一的含量最低，為6.703 mg/g。通過試驗(yàn)結(jié)果可以看出，野生選育品種左山一、山葡萄和山葡萄種間雜交種雙紅、山葡萄和歐洲雜交種左紅一這3個(gè)生產(chǎn)上已經(jīng)推廣種植的品種，總花色苷含量高于野生山葡萄，其原因可能是人工栽培品種在施肥、除草、病害防治方面技術(shù)比較成熟，而野生山葡萄缺少肥水系統(tǒng)管理以及周圍林木及雜草等危害所致。左山一、雙紅、野生山葡萄雙糖苷與單糖苷之比分別為6.35∶1、4.48∶1、4.09∶1，以雙糖苷為主要成分，而山-歐雜交種左紅一雙糖苷與單糖苷之比為1.35∶1。由此可以看出，山葡萄和歐洲葡萄雜交后，花色苷種類和比例發(fā)生了變化，單糖苷所占比例增加，基本達(dá)到1∶1，這與段長(zhǎng)青等[8]的研究結(jié)果相一致。通過明確不同品種山葡萄花色苷的種類和含量，可以釀造不同風(fēng)味和品質(zhì)的葡萄酒，對(duì)提高東北山葡萄酒的品質(zhì)和市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力可起到積極作用，同時(shí)也可為山葡萄育種提供理論依據(jù)和借鑒。

參考文獻(xiàn)：

[1] 張金柱，戴永平，王萬民.山葡萄資源開發(fā)及利用[J].中國林副特產(chǎn)，2002（5）：256-257.

[2] 方 志.山葡萄與山葡萄酒[J].釀酒科技，2003（6）：93-94.

[3] 王 軍，葛玉香，包怡紅.東北山葡萄品種特性比較[J].東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2004，32（1）：29-31.

[4] 李春陽，許時(shí)嬰，王 璋.從葡萄廢棄物中提取分離多酚類生物活性物質(zhì)[J].食品科技，2004（6）：88-93.

[5] 趙 權(quán).葡萄酚類物質(zhì)及其生物合成相關(guān)結(jié)構(gòu)基因表達(dá)[D].哈爾濱：東北林業(yè)大學(xué)，2010.

[6] 劉闖萍，王 軍.葡萄花色苷的生物合成[J].植物生理學(xué)通訊，2008，44（2）：363-377.

[7] 鄧軍哲，屈慧鴿.葡萄花色素的研究概況[J].中外葡萄與葡萄酒，1996（2）：25-27.

[8] 段長(zhǎng)青，賀普超，康靖全.中國葡萄野生種花色素雙糖苷的研究[J].西北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1997，25（5）：23-28.

[9] 唐傳核，彭志英.天然花色苷類色素的生理功能及應(yīng)用前景[J].冷飲與速凍食品工業(yè)，2000，6（1）：26-28.

[10] 趙 佳.藍(lán)果忍冬酚類物質(zhì)的提取、鑒定及抗氧化性研究[D].哈爾濱：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)，2010.

[11] 李淑芹，李延冰，都昌杰.藍(lán)靛果中黃酮類成分初探及總含量測(cè)定[J].東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1996，27（3）：99-101.

[12] 向延菊，鄭先哲，王大偉.野生漿果資源——藍(lán)靛果忍冬利用價(jià)值的研究現(xiàn)狀及應(yīng)用前景[J].東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2005，36（5）：669-671.

[13] 劉海峰，楊成君，趙 權(quán)，等.山葡萄中類黃酮3-羥化酶基因（F3H）cDNA的克隆和分析[J].植物生理學(xué)通訊，2009，45（12）：1186-1190.

[14] 劉海峰.山葡萄花色苷生物合成相關(guān)結(jié)構(gòu)基因克隆與表達(dá)[D].哈爾濱：東北林業(yè)大學(xué)，2010.

[15] 楊天天，王曉平，楊成君，等.山葡萄轉(zhuǎn)色期果皮轉(zhuǎn)錄因子MYB基因的克隆與分析[J].江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2013，29（5）：1136-1142.

[16] 付曉偉.山葡萄及其雜種Myb相關(guān)基因的分析[D].北京：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院，2014.

[17] 王 華，菅 蓁，郭耀東.葡萄果皮花色素苷提取工藝的研究[J].西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2008，36（2）：129-134.