于洪濤

關(guān)于CIK細(xì)胞療法對(duì)肝癌患者免疫功能產(chǎn)生的影響研究

于洪濤

目的 對(duì)CIK細(xì)胞療法對(duì)肝癌患者免疫功能產(chǎn)生的影響進(jìn)行探究。方法 選取2013—2014年30例肝癌術(shù)后病人作為研究對(duì)象，在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上聯(lián)合使用CIK細(xì)胞免疫方法進(jìn)行治療，對(duì)病人治療前后外周血液T細(xì)胞亞群與NK細(xì)胞及Thl/Th2細(xì)胞因子水平進(jìn)行對(duì)比分析。結(jié)果 治療后病人外周血液中CD3+、CD4+、NK細(xì)胞及Th1/Th2細(xì)胞因子水平均顯著優(yōu)于治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論 CIK細(xì)胞免疫治療可明顯提升肝癌患者免疫功能。

CIK細(xì)胞療法；肝癌；免疫功能；影響

肝癌患者免疫功能低下，導(dǎo)致這類手術(shù)治療效果不甚理想，易復(fù)發(fā)，因此，急需尋找新的治療方式在控制病情的同時(shí)提高患者的免疫功能[1]。作為腫瘤綜合治療的最新模式，生物治療受到臨床各界的普遍關(guān)注。目前多采用腫瘤浸潤(rùn)性淋巴細(xì)胞(TIL)、細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK)及樹(shù)突狀細(xì)胞(DC)等進(jìn)行腫瘤的生物治療。CIK細(xì)胞是新型免疫活性細(xì)胞的一種，具有增殖快、殺瘤譜廣、殺瘤活性高等優(yōu)勢(shì)。本研究對(duì)CIK細(xì)胞療法對(duì)肝癌患者的免疫功能的影響進(jìn)行進(jìn)一步分析，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2013—2014年30例肝癌術(shù)后病人作為研究對(duì)象，均經(jīng)病理學(xué)檢查、B超、臨床癥狀等確診，并行肝癌根除術(shù)。其中男性18例，女性12例；年齡分布為38～65歲，平均年齡為(49.4±4.2)歲；排除其他系統(tǒng)疾病及合并重要臟器損害的患者。

1.2 方法 病人術(shù)后均給予保肝等常規(guī)治療，同時(shí)聯(lián)合CIK細(xì)胞免疫治療。主要試劑：北京雙鷺?biāo)帢I(yè)有限公司提供的白介素(IL)-2，上?？寺∷帢I(yè)有限公司提供的干擾素IFN，上海立菲藥業(yè)生產(chǎn)的無(wú)血清培養(yǎng)基，采用PE及FITC進(jìn)行雙色熒光抗體標(biāo)記。用CIK培養(yǎng)液對(duì)外周血單個(gè)核細(xì)胞進(jìn)行重懸，補(bǔ)加C1液，后補(bǔ)加C2、C3液，置于溫度為37℃的環(huán)境下，第3天后根據(jù)培養(yǎng)情況進(jìn)行補(bǔ)液。把培養(yǎng)成熟的CIK細(xì)胞進(jìn)行離心后，洗滌3次，溶于100 mL生理鹽水中，同時(shí)進(jìn)行質(zhì)量監(jiān)控，合格后可回輸。將CIK細(xì)胞分6次回輸，1次/d，時(shí)間不超過(guò)半小時(shí)，6 d為1個(gè)療程，細(xì)胞總數(shù)超過(guò)1×1010個(gè)。對(duì)患者治療前后外周血液T細(xì)胞亞群與NK細(xì)胞及Th1/Th2細(xì)胞因子水平進(jìn)行對(duì)比。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件包SPSS 18.0對(duì)所有數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，組間比較采用t檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

外周血液CD3+、CD4+含量、Th1/Th2細(xì)胞因子的比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05，表1)。

表1 治療前后患者血液免疫因子含量對(duì)比

3 討論

CIK這類細(xì)胞既具備T細(xì)胞的表面標(biāo)志，也存在NK細(xì)胞的表面標(biāo)志，對(duì)治療免疫不完全應(yīng)答的肝癌具有重要的臨床價(jià)值[2]。相關(guān)臨床實(shí)踐證實(shí)，CIK細(xì)胞以MHC限制對(duì)靶細(xì)胞進(jìn)行殺傷，同時(shí)DC可以MHC限制將抗原遞呈至CIK細(xì)胞中的T淋巴細(xì)胞，在極大程度上擴(kuò)增了細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞，可有效清除腫瘤細(xì)胞，發(fā)揮了較強(qiáng)的細(xì)胞毒性作用，在極大程度上延緩或阻滯了腫瘤的復(fù)發(fā)。

相關(guān)研究表明，CIK細(xì)胞可直接殺傷腫瘤細(xì)胞，通過(guò)不同機(jī)制對(duì)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行識(shí)別后其中的黏附因子與腫瘤細(xì)胞結(jié)合后可分泌大量BLT酯酶顆粒，這些顆粒穿過(guò)靶細(xì)胞膜后，可引起腫瘤細(xì)胞的裂解[3]。另外，CIK細(xì)胞在激活時(shí)可通過(guò)FcR向細(xì)胞間排出胞質(zhì)毒性顆粒，這些顆粒直接穿透到封閉的靶細(xì)胞中進(jìn)行胞吐，使腫瘤細(xì)胞出現(xiàn)裂解。進(jìn)入體內(nèi)的CIK細(xì)胞可分泌大量細(xì)胞因子，如Th1、Th2等炎性細(xì)胞因子，炎性細(xì)胞因子具有較強(qiáng)的抗腫瘤的作用，在正常情況下，體內(nèi)Th1/Th2細(xì)胞因子處于相對(duì)平衡的狀態(tài)，如Th1低表達(dá)，Th2高表達(dá)時(shí)，有利于腫瘤的發(fā)展[4]。一般而言，腫瘤患者體內(nèi)CD3+、CD4+、NK細(xì)胞顯著低于健康人，但是腫瘤細(xì)胞自身可分泌免疫抑制性物質(zhì)，降低了機(jī)體的應(yīng)答效應(yīng)，有助于腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移[5]。本研究中，肝癌術(shù)后病人行CIK細(xì)胞療法后，外周血CD3+、CD4+、NK細(xì)胞及Th1/Th2細(xì)胞因子水平均顯著優(yōu)于治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，提示機(jī)體免疫功能增強(qiáng)，殘留腫瘤細(xì)胞清除效果良好，機(jī)體的抗腫瘤能力得到有效的強(qiáng)化。

CIK細(xì)胞療法治療肝癌，有利于患者免疫功能的提高及生存期的延長(zhǎng)，有利于體內(nèi)殘余微小病灶的清除，防止肝癌復(fù)發(fā)，可在極大程度上改善患者的生活質(zhì)量。作為新的治療方法，CIK細(xì)胞療法治療肝癌仍缺乏樣本、前瞻性隨機(jī)實(shí)驗(yàn)，且缺乏統(tǒng)一的治療方案，其機(jī)制及不良反應(yīng)仍需進(jìn)一步的深入研究。

[1]王穎，吳德平，明平靜，等.DC與CIK共培養(yǎng)細(xì)胞體外抗肝癌細(xì)胞活性研究[J].中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志，2014，34(1)：42-46.

[2]龍新安，姚飛，曾健瀅，等.冷凍消融聯(lián)合DC-CIK免疫療法治療轉(zhuǎn)移性肝細(xì)胞癌回顧性分析[J].中華臨床醫(yī)師雜志：電子版，2014(4)：600-604.

[3]梁倩影，劉先領(lǐng).自體DC-CIK細(xì)胞聯(lián)合替吉奧治療中晚期肝癌的療效[J].中國(guó)老年學(xué)雜志，2014(21)：6074-6075.

[4]袁艷紅.腹腔鏡超聲引導(dǎo)下射頻消融術(shù)對(duì)肝癌患者免疫功能的影響[J].中國(guó)老年學(xué)雜志，2014(8)：2119-2121.

[5]趙莉娟，白中紅.介入治療聯(lián)合CIK細(xì)胞療法治療肝癌的臨床觀察[J].世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘：電子版，2013(17)：31-33.

2015-03-12)

1005-619X(2015)09-0929-02

10.13517/j.cnki.ccm.2015.09.011

110011 沈陽(yáng)市婦嬰醫(yī)院