羅俊霞　申戰(zhàn)賓　樊彥超等

摘要： 建立了離心處理-固相萃取-氣相色譜法-電子捕獲檢測(cè)器同時(shí)測(cè)定黃瓜中的六氯苯等9種農(nóng)藥殘留的方法。該方法是將樣品用乙腈提取，經(jīng)SPE小柱（弗羅里硅土）凈化，采用電子捕獲檢測(cè)器測(cè)定，外標(biāo)法定量，分別對(duì)黃瓜進(jìn)行3個(gè)水平（其中7種為0 02、0 04、0 08 mg/kg，敵稗和丁草胺為0 04、0 08、0 16 mg/kg ）的添加回收試驗(yàn)，平均添加回收率為57 1%～134 8 %，RSD為2 4%～13 0%，方法的最低檢測(cè)限為0 000 9～0 027 4 mg/kg，在103的范圍內(nèi)線性較好，相關(guān)系數(shù)r≥0 998 7。試驗(yàn)結(jié)果表明，本方法靈敏度高、重復(fù)性好，可以作為蔬菜中這幾種農(nóng)殘的測(cè)定方法。9種農(nóng)藥在黃瓜基質(zhì)中存在不同程度的基質(zhì)效應(yīng)，其中敵稗和丁草胺存在較強(qiáng)的基質(zhì)抑制效應(yīng)，其他幾種存在較弱的基質(zhì)增強(qiáng)效應(yīng)。

關(guān)鍵詞： 黃瓜；農(nóng)藥；除草劑；電子捕獲檢測(cè)器；外標(biāo)法；基質(zhì)效應(yīng)

中圖分類(lèi)號(hào)： TQ450 2+63 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A

文章編號(hào)：1002-1302（2015）08-0299-03

近年來(lái)為了節(jié)省勞力，有機(jī)氯類(lèi)除草劑在生產(chǎn)中被越來(lái)越多的使用，有機(jī)氯農(nóng)藥是一類(lèi)曾被世界各國(guó)廣泛使用的高效、廣譜殺蟲(chóng)劑，雖然禁用多年，但由于其半衰期長(zhǎng)、不易降解，所以長(zhǎng)期積存于植物和土壤中，至今仍有檢出 [1-2]。七氯、艾氏劑、狄氏劑、異狄氏劑是氯化環(huán)戊二烯殺蟲(chóng)劑，六氯苯和氯硝胺是殺菌劑，敵稗和丁草胺是除草劑，胺菊酯是擬除蟲(chóng)菊酯，這些農(nóng)藥對(duì)動(dòng)物具有致畸、致癌和致突變等毒性 [3]。目前檢測(cè)這類(lèi)農(nóng)藥較普遍使用氣相色譜法 [4-6]、氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法 [7-8]；劉長(zhǎng)武等在標(biāo)準(zhǔn)NY/T 761—2008《蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲(chóng)菊酯和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥多殘留的測(cè)定》 [9]中列舉了用GC-ECD檢測(cè)的農(nóng)藥種類(lèi)，但沒(méi)有具體的測(cè)定數(shù)據(jù)。為了快速對(duì)這幾種農(nóng)藥進(jìn)行測(cè)定，筆者進(jìn)行了固相萃取-氣相色譜法-電子捕獲檢測(cè)器同時(shí)測(cè)定黃瓜中的六氯苯等多種農(nóng)藥殘留的試驗(yàn)，經(jīng)過(guò)在0 02、0 04、0 08 mg/kg（敵稗和丁草胺為0 04、0 08、0 16 mg/kg）3個(gè)水平下的添加回收試驗(yàn)，結(jié)果表明該方法能滿足日常檢測(cè)的需要。

1 試驗(yàn)部分

1 1 試驗(yàn)儀器與試劑

瓦里安CP3800，配8400自動(dòng)進(jìn)樣器和ECD檢測(cè)器，其色譜柱為VF-5，30 m×0 32 mm，液膜厚0 25 μm；WH-861型渦旋混合器；天孚牌電子計(jì)數(shù)天平（DT 500A）；德國(guó)Heidolph SilentCrusher M型均質(zhì)機(jī)；美國(guó)N-EVAPTM-112型氮吹儀；德國(guó)Hettich Universal 302R離心機(jī)。

乙腈、正己烷、丙酮為CNW品牌試劑（HPLC級(jí)）；NaCl為天津市科密歐化學(xué)試劑開(kāi)發(fā)中心生產(chǎn)的綠環(huán)牌試劑（分析純級(jí)）；農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品七氯（heptachlor）、艾氏劑（aldrin）、狄氏劑（dieldrin）、異狄氏劑（endrin）、六氯苯（hexachlorobenzene）、氯硝胺（dichloran）、敵稗（propanil）、丁草胺（butachlor）和胺菊酯（tetramethrin），濃度均為100 mg/kg，由農(nóng)業(yè)環(huán)境保護(hù)科研檢測(cè)所生產(chǎn)。

1 2 GC條件

進(jìn)樣口溫度：220 ℃；檢測(cè)器溫度：300 ℃；柱溫箱：程序升溫，起始溫度150 ℃，保持0 5 min，以20 ℃/min升至200 ℃，保持2 min，以 0 8 ℃/min升至210 ℃，保持2 min，以 50 ℃/min 升至260 ℃，保持10 min ；柱流量：2 mL/min；分流比：1 ∶ 10；進(jìn)樣量：1 μL。

1 3 樣品前處理

稱(chēng)取25 g樣品于250 mL廣口瓶中，在廣口瓶中加入5～7 g NaCl，再加入50 mL乙腈，依照NY/T 761—2008《蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲(chóng)菊酯和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥多殘留的測(cè)定》 [9]的方法，用均質(zhì)機(jī)在8 000～12 000 r/min下均質(zhì)提取2 min，之后一并倒入2支50 mL的離心管中，放入離心機(jī)中在5 000 r/min下離心5 min，移取上層乙腈相10 mL濃縮至近干，用2 mL正己烷定容，之后用弗羅里硅土SPE小柱凈化，再次濃縮至近干，用正己烷定容至5 mL 。根據(jù)保留時(shí)間定性，用基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液校正，外標(biāo)法定量，單點(diǎn)校正。

1 4 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

分別準(zhǔn)確吸取“1 1”節(jié)中標(biāo)準(zhǔn)溶液各1 mL，置10 mL容量瓶中，用正己烷定容至10 mL，成為10 mg/kg 的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，備用。用黃瓜樣品基質(zhì)稀釋成低濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液上機(jī)測(cè)定。

2 結(jié)果與分析

2 1 基質(zhì)效應(yīng)

9種化合物的色譜圖、用樣品空白基質(zhì)配制的標(biāo)準(zhǔn)品的色譜圖和黃瓜空白基質(zhì)的色譜圖分別見(jiàn)圖1、圖2、圖3，由圖1、圖2、圖3可以看出，黃瓜樣品基質(zhì)中存在一些干擾物，在VF-5的柱子上和六氯苯、敵稗和丁草胺分不開(kāi)，從而對(duì)這3種物質(zhì)的測(cè)定存在較大的影響。其中在敵稗和丁草胺的保留時(shí)間附近均有1個(gè)較大的倒峰，對(duì)二者存在嚴(yán)重的基質(zhì)抑制效應(yīng)，基質(zhì)抑制程度隨著標(biāo)準(zhǔn)品濃度的增大而減小；在六氯苯的保留時(shí)間附近有1個(gè)較小的正峰，使六氯苯有較弱的基質(zhì)增強(qiáng)效應(yīng)。其他幾種農(nóng)藥也存在不同程度的基質(zhì)增強(qiáng)效應(yīng)，有待于進(jìn)一步研究。

2 2 回收率和精密度試驗(yàn)

分別稱(chēng)取25 g黃瓜空白樣品，添加9種農(nóng)藥的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液和單標(biāo)，使添加后六氯苯、氯硝胺、七氯、艾氏劑、狄氏劑、異狄氏劑、胺菊酯的濃度分別為0 02、0 04、0 08 mg/kg，使敵稗和丁草胺的濃度分別為0 04、0 08、0 16 mg/kg，按照“13”節(jié)中的步驟進(jìn)行樣品前處理，每個(gè)水平的試樣重復(fù)測(cè)定12次，根據(jù)測(cè)定結(jié)果計(jì)算添加回收率，在12個(gè)添加回收中棄去2個(gè)離群值，結(jié)果見(jiàn)表1。試驗(yàn)結(jié)果（表1）表明，本方法的回收率范圍為57 1%～134 8%，精密度為2 4%～130%。六氯苯、氯硝胺、七氯、艾氏劑、狄氏劑、異狄氏劑、胺菊酯的檢出限在0 08 mg/kg的水平下，敵稗和丁草胺在 0 16 mg/kg 的水平下來(lái)計(jì)算，計(jì)算公式為：

DL=[SX（]3NC[]h[SX）] [10]。

式中：DL代表方法的檢測(cè)限（方法可檢測(cè)到的最小樣品量）；N代表基線噪聲；C代表樣品濃度；h代表相應(yīng)的農(nóng)藥的峰高。

計(jì)算結(jié)果表明，9種化合物的檢測(cè)限為0 000 9～0 027 4 mg/kg， 本方法的回收率、精密度和檢測(cè)限均滿足多種農(nóng)藥殘留檢測(cè)分析的要求。

2 3 檢測(cè)限和線性范圍

筆者在試驗(yàn)中分別用正己烷配制了0 001、0 01、0 1、1、10 mg/kg 5個(gè)濃度水平的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，9種農(nóng)藥的線性回歸方程、線性范圍和相關(guān)系數(shù)見(jiàn)表2 。 因?yàn)閿嘲藓投〔莅返捻憫?yīng)較低，在0 001 mg/kg濃度水平下幾乎可以視為沒(méi)有響應(yīng)，它們?cè)? 01～10 mg/kg的范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)分別是0 998 8 和0 999 3，其他7種農(nóng)藥在0 001～10 mg/L范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)均小于0 01～10 mg/L的相關(guān)系數(shù)，線性均不如在0 01～10 mg/L的范圍內(nèi)的線性好，在0 001～1 mg/kg的范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)均大于0998 5；另外用黃瓜空白基質(zhì)配制了0 01、002、0 04、008、0 16 mg/kg 5個(gè)濃度水平的標(biāo)準(zhǔn)品，同樣，敵稗在001、0 02 mg/kg 的濃度水平下，因?yàn)榛|(zhì)效應(yīng)，可以視為沒(méi)有響應(yīng)，在0 04～0 16 mg/kg的范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)是0991 2，其他8種農(nóng)藥在0 01～0 16 mg/kg的范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)均大于0993 5。可見(jiàn)，用黃瓜空白基質(zhì)作為介質(zhì)配制的標(biāo)準(zhǔn)溶液的線性范圍不如用正己烷試劑作為介質(zhì)配制的標(biāo)準(zhǔn)溶液，但在一定的范圍內(nèi)其線性可以滿足多種農(nóng)藥殘留分析的要求；同時(shí)，在日常檢測(cè)工作中為了避免基質(zhì)效應(yīng)帶來(lái)的影響，可以用相近濃度的基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液來(lái)進(jìn)行校正。

3 結(jié)論

本方法采用固相萃取的前處理技術(shù)，建立了氣相色譜-電子捕獲檢測(cè)器測(cè)定黃瓜中多種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量的方法，獲得了滿意的分離效果和檢測(cè)靈敏度，方法的準(zhǔn)確度、精密度、線性范圍、相關(guān)系數(shù)、檢出限等均能滿足多種農(nóng)藥殘留分析的要求。但是黃瓜基質(zhì)在VF-5的柱子上對(duì)敵稗和丁草胺的影響較大，建議在檢測(cè)工作中用相近濃度的基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液來(lái)進(jìn)行校正。

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