吳桐+高峰+李昊

摘 要：闡述了無菌原料藥生產(chǎn)管理中無菌工藝驗(yàn)證的必要性，并在此基礎(chǔ)上，對(duì)無菌原料藥生產(chǎn)中無菌工藝驗(yàn)證的方法進(jìn)行了論述，以期為無菌原料藥生產(chǎn)質(zhì)量的提升提供參考和借鑒。

關(guān)鍵詞：無菌原料藥；無菌工藝；微生物；生物技術(shù)

中圖分類號(hào)：TQ460 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A DOI：10.15913/j.cnki.kjycx.2015.19.104

1 無菌工藝驗(yàn)證的必要性

最新版的《GPM實(shí)施指南》對(duì)無菌的定義為：不存在活的生物和微生物，F(xiàn)DA將百萬分之一微生物污染率作為滅菌產(chǎn)品無菌的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)，這一標(biāo)準(zhǔn)在世界各國得到了廣泛運(yùn)用。所謂“無菌藥品”，即法定藥品標(biāo)準(zhǔn)中列有無菌檢查項(xiàng)目的原料藥，制造此類藥品需要對(duì)可能發(fā)生的微生物潛在污染進(jìn)行嚴(yán)格控制，而無菌工藝就是一種盡最大可能減少或消除潛在污染源的生產(chǎn)工藝。為了確保無菌原料藥生產(chǎn)過程中采用無菌工藝的可行性，需要通過相應(yīng)的方法進(jìn)行工藝驗(yàn)證。這一過程被稱為“無菌工藝驗(yàn)證”，即借助已經(jīng)形成文件的各類證據(jù)，證明生產(chǎn)無菌原料的相關(guān)條件和設(shè)施，比如人員、材料、設(shè)備、方法和環(huán)境等符合《GPM實(shí)施指南》中的規(guī)定要求。原料藥是各類制劑中的有效成分，是生產(chǎn)制劑時(shí)不可或缺的重要組成部分，一般為通過植物提取、生物技術(shù)制備或是化學(xué)合成的具有藥用價(jià)值的粉末、結(jié)晶等物質(zhì)。雖然病人無法直接服用原料藥，但作為藥品的主要成分，其是否符合無菌標(biāo)準(zhǔn)直接關(guān)系著藥品的質(zhì)量。因此，在無菌原料藥的生產(chǎn)中，必須驗(yàn)證無菌工藝。

2 無菌工藝驗(yàn)證

2.1 無菌原料藥生產(chǎn)的工藝流程

常規(guī)的無菌原料藥的生產(chǎn)工藝流程如圖1所示。

2.2 無菌工藝驗(yàn)證的有效方法

2.2.1 驗(yàn)證準(zhǔn)備

在驗(yàn)證原料藥的無菌工藝前，需要做好相應(yīng)的準(zhǔn)確工作，具體包括確認(rèn)生產(chǎn)設(shè)施和生產(chǎn)工藝、清洗設(shè)備和滅菌等。其中，生產(chǎn)設(shè)施應(yīng)易于消毒和清潔，從而可有效減少污染源，保證無菌生產(chǎn)的順利實(shí)施，這是無菌工藝驗(yàn)證成功與否的關(guān)鍵要素。通常情況下，一旦產(chǎn)品暴露在空氣中，則易導(dǎo)致無菌工藝驗(yàn)證失敗。因此，驗(yàn)證前需要對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行百級(jí)層流罩防護(hù)，并盡可能避免工作人員接觸生產(chǎn)設(shè)備和物料。此外，在正式驗(yàn)證前，必須對(duì)接觸模擬介質(zhì)的設(shè)備表面進(jìn)行清洗滅菌處理，還要防止滅菌后再次污染。如果生產(chǎn)的藥品具有較強(qiáng)的抗菌性，則該項(xiàng)工作更加重要。如果滅菌不徹底，則極有可能引起模擬介質(zhì)污染，進(jìn)而導(dǎo)致驗(yàn)證失敗。

2.2.2 無菌工藝的驗(yàn)證方法

無菌工藝的驗(yàn)證方法分為以下2步：①優(yōu)選模擬介質(zhì)和滅菌處理。在無菌工藝的驗(yàn)證過程中，模擬介質(zhì)的選擇至關(guān)重要。模擬介質(zhì)應(yīng)具備的特征包括不存在抑菌作用、有較好的溶解度且不影響培養(yǎng)基的質(zhì)量、不會(huì)對(duì)設(shè)備造成腐蝕且對(duì)人體無害、對(duì)環(huán)境無污染等。目前，常用的模擬介質(zhì)主要有PEG4000、乳糖和甘露醇等。選好介質(zhì)后，應(yīng)對(duì)其進(jìn)行滅菌處理，因?yàn)槟M介質(zhì)的無菌性會(huì)對(duì)工藝驗(yàn)證結(jié)果造成較大的影響。如果無法確保介質(zhì)的無菌性，或是在驗(yàn)證前介質(zhì)受到污染，則會(huì)對(duì)驗(yàn)證結(jié)果的可信性造成影響。因此，在使用模擬介質(zhì)前，必須進(jìn)行滅菌處理，可選用的方法為γ射線滅菌。②培養(yǎng)基的選擇和滅菌。通常情況下，可根據(jù)微生物選擇培養(yǎng)基。由于在無菌工藝驗(yàn)證過程中并不清楚系統(tǒng)內(nèi)微生物的種類，所以，選擇多種培養(yǎng)基進(jìn)行無菌測試的難度較大。因此，可按照實(shí)際的生產(chǎn)工藝和環(huán)境選擇適用于絕大多數(shù)微生物的培養(yǎng)基。實(shí)踐證明，在眾多培養(yǎng)基中，大豆酪蛋白消化物的效果較好，這是因?yàn)榻^大部分無菌原料藥的生產(chǎn)都需要與空氣接觸，感染厭氧菌的概率相對(duì)較小，被感染的微生物以需氧菌或真菌為主，因此，可將大豆酪蛋白消化物作為首選培養(yǎng)基。培養(yǎng)基滅菌也可采用γ射線滅菌，同時(shí)，要在滅菌處理之后進(jìn)行生長促進(jìn)試驗(yàn)。以大豆酪蛋白消化物培養(yǎng)基為例，試驗(yàn)后培養(yǎng)基內(nèi)應(yīng)出現(xiàn)較為明顯的所接種微生物生長的現(xiàn)象。

2.2.3 工藝驗(yàn)證的具體過程

工藝驗(yàn)證的具體過程分為以下3步：①應(yīng)對(duì)操作規(guī)程加以確認(rèn)，并對(duì)相關(guān)人員進(jìn)行培訓(xùn)，從而確保驗(yàn)證中的每一項(xiàng)操作都有標(biāo)準(zhǔn)可依、操作人員熟練掌握有關(guān)操作流程。當(dāng)操作規(guī)程確認(rèn)完畢且人員培訓(xùn)完成后，還應(yīng)對(duì)儀器儀表進(jìn)行校正，如果儀表不準(zhǔn)確，則會(huì)導(dǎo)致驗(yàn)證結(jié)果出現(xiàn)偏差，因此，必須保證儀表的準(zhǔn)確性。儀表校正應(yīng)由具備資質(zhì)的單位進(jìn)行，且校正過程應(yīng)符合國家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。②確定工藝條件。無菌原料藥的生產(chǎn)具有設(shè)備多、管路長和生產(chǎn)工藝復(fù)雜等特點(diǎn)，因此，應(yīng)按照具體的特點(diǎn)選擇模擬介質(zhì)，盡可能地減少物料外露，并在開口位置處設(shè)置呼吸器或百級(jí)層流空氣保護(hù)。③合理控制操作時(shí)限。無菌原料藥生產(chǎn)中的每一項(xiàng)操作都應(yīng)在規(guī)定的操作時(shí)限內(nèi)完成，這樣能防止經(jīng)過滅菌的物品再次污染。通常情況下，操作時(shí)限越長，污染的概率就越大。因此，在工藝驗(yàn)證中，要盡可能地將操作時(shí)限調(diào)整至最長，如果在此時(shí)限下驗(yàn)證結(jié)果仍然可靠，則在短于該時(shí)限的條件下操作均可行。結(jié)果評(píng)價(jià)應(yīng)符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)中的要求，制劑的污染水平<0.1%為可接受的標(biāo)準(zhǔn)，但因無菌原料藥生產(chǎn)中的包裝單位相對(duì)較大，導(dǎo)致得到的總分裝容器數(shù)量較少，進(jìn)而使抽樣測試結(jié)果無法滿足統(tǒng)計(jì)學(xué)的條件。因此，在驗(yàn)證過程中，至少連續(xù)三批產(chǎn)品全部合格后，才可確定采用的無菌生產(chǎn)工藝符合無菌要求。

3 結(jié)束語

綜上所述，由于原料藥是藥品的重要組成部分，因此，必須在無菌原料藥的生產(chǎn)管理中重視無菌工藝的驗(yàn)證工作，這樣可確保生產(chǎn)出來的原料藥達(dá)到無菌標(biāo)準(zhǔn)中的要求，從而保證藥品質(zhì)量。

參考文獻(xiàn)

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Study on the Necessity and Method of Validation of Aseptic Process

for Production Management in the Production Management of Sterile APIs

Wu Tong， Gao Feng， Li Hao

Abstract： This paper expounds the necessity of the Validation of aseptic process for production management in the production management of sterile APIs， and discusses the method to verify the Validation of aseptic process for production management in the production of sterile APIs， in order to provide reference and reference for the improvement of the quality of sterile APIs.

Key words： aseptic raw material medicine； aseptic process； microorganism； biological technology

〔編輯：張思楠〕