任稹　韓麗　張永?！↑S鶴平　陳麗娟　楊曾華　王定康

摘要：以玉米“云瑞47”為研究材料，通過盆栽試驗揭示了接種Glomus mosseae（Gm）、Glomus versform（Gv）、Glomusetumcatum（Ge）、Glomus intraradices（Gi）以及混合菌劑（G4）對玉米生長生理的影響。結(jié)果表明，5個接種處理的菌根侵染率呈現(xiàn)G4>Gm、Gv>Ge>Gi的趨勢；從各菌劑效應(yīng)結(jié)果來看，混合菌劑對玉米的促生效應(yīng)優(yōu)于單種菌劑；對比單種菌劑，Gm和Gv對玉米的促生效果較好，而Ge和Gi對玉米則無明顯影響。本研究初步證實了混合菌劑在玉米生長方面的良好表現(xiàn)，同時篩選出Gm和Gv是適合玉米接種的優(yōu)良菌種。

關(guān)鍵詞：叢枝菌根真菌；混合菌劑；玉米；生長生理

中圖分類號：S513.04 文獻標志碼：A 文章編號：1002-1302（2015）05-0063-04

叢枝菌根真菌（arbuscular mycorrhizal fungi，AMF）是一類廣泛存在于農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)的內(nèi)生真菌，可與絕大多數(shù)農(nóng)作物根系形成植物一微生物共生體，這種共生關(guān)系的建立對農(nóng)作物的影響顯而易見。大量研究證實，AMF能夠增強農(nóng)作物的光合作用；促進作物生長，增加產(chǎn)量；促進作物對大量元素和微量元素的吸收利用，尤其是在缺磷環(huán)境下對磷元素吸收；還能提高農(nóng)作物對重金屬、高鹽、高溫、干旱和病害等不良環(huán)境的抗性和耐受性。因此，AMF作為一種新型菌肥在農(nóng)作物上的應(yīng)用已成為研究熱點。玉米是AMF最為普遍的宿主之一，當AMF菌絲侵入到玉米根系形成有益共生聯(lián)合體后，對玉米的促生作用已被大量試驗證實。AMF能夠顯著提高玉米根系的活力和吸收能力；增強玉米葉片的光合作用；改善玉米的礦質(zhì)營養(yǎng)，尤其是磷元素；減弱石油和鹽脅迫對玉米的傷害；增強玉米對鋅污染的適應(yīng)性等。之前筆者已經(jīng)證實，摩西球囊霉菌（Glomus mosseae）是侵襲玉米的主要AMF類群。同時發(fā)現(xiàn)已往研究主要集中在G.ITtOS-seae對玉米效應(yīng)的表現(xiàn)，而探索其他菌劑對玉米生長生理影響的研究較少。盡管不同AMF對植物侵染并無嚴格專一性，但不同AMF與宿主之間的親和力存在一定差異。研究多種AMF對植物的影響，可以篩選出適合某種植物的優(yōu)良菌種，為推進AMF在田間的應(yīng)用具有重要意義。本研究結(jié)合前人的研究進展，通過盆栽接種試驗，研究接種4種不同的AMF對玉米生長生理以及吸收礦質(zhì)營養(yǎng)元素的影響，旨在篩選出對玉米親和力好、促生效應(yīng)明顯的菌株，為用AMF在玉米育苗和栽培等方面的應(yīng)用提供指導。

1.材料與方法

1.1試驗材料

1.1.1玉米種子來源

試驗用玉米品種為云南市面上常見的“云瑞47”，從云南省農(nóng)業(yè)科學院購買。

1.1.2菌根菌劑來源供試AMF為摩西球囊霉（G.mosse-“e，Gm）、地表球囊霉（G.VeI'S扣rm，Gv）、幼套球囊霉（G.etumcatum，Ge）和根內(nèi)球囊霉（G.intraradices，Gi），菌源由北京市農(nóng)林科學院植物營養(yǎng)與資源研究所提供，經(jīng)玉米擴繁后得到的孢子、菌根菌段和菌絲作為接種物，檢測選擇高侵染率無病害的根土混合物保存?zhèn)溆谩?/p>

1.1.3供試土壤理化性質(zhì)供試土壤采自昆明學院觀物山，理化性質(zhì)：有機質(zhì)20.73g/kg、堿解氮310.67mg/kg、速效磷42.86mg/kg、有效鉀267.95mg/kg、pH值7.96。土壤過2mm篩后于烘箱中160℃高溫滅菌2h，自然冷卻后繼續(xù)160℃烘2h，備用。

1.2試驗設(shè)計

試驗于2012年6月在昆明學院農(nóng)學院的試驗基地進行。共設(shè)不接菌劑（CK）、分別接種4種菌劑（Gm、Gv、Ge和Gi）和混合接種4種菌劑（G4）6個處理。基質(zhì)為過1mm篩后的沙土混合物，干熱滅菌后裝入營養(yǎng)缽（16.5cm×15.0cm，0.2%高錳酸鉀溶液消毒24 h）。玉米種子經(jīng)H2O2消毒處理后播種，單接菌處理每盆加入100g包含玉米根段的菌根菌劑，混合接菌處理加入100g的混合菌劑（每種25g），不接菌處理覆蓋不接菌劑擴繁的玉米根段及沙土混合物，以保證微生物區(qū)系一致。每個處理4次重復，隨機排列。常規(guī)管理，定期澆水補充營養(yǎng)液，待玉米播種60d后取樣測定菌根侵染參數(shù)及各項生長生理指標。

1.3測定方法

1.3.1菌根侵染率的測定

菌根侵染率測定和觀察方法見Philips等的方法，將每玉米根系隨機選取30條根段，曲利本藍染色后制片，鏡檢。根據(jù)根段中菌根侵染（0，>0～1%，>1%～10%，>10%～50%，>50%～90%和>90%）和叢枝豐度（0，>0—10%，>10%-50%，>50%）的分級標準，定義每條根段的相關(guān)信息。用Mycocalc軟件計算出菌根侵染頻度（F%），整個根系的菌根侵染強度（M%），侵染根段的菌根侵染強度（m%），侵染根段的叢枝豐度（a%）和整個根系的叢枝豐度（A%）等參數(shù)。

1.3.2生物量的測定隨機選取單株，去除根系泥土，在105℃下烘干至恒質(zhì)量，分別測定部位生物量，并計算菌根依賴性指數(shù)（IMD），IMD=（接菌植株總干質(zhì)量/不接菌植株總干質(zhì)量）×100%。

1.3.3葉面積的測定使用美國CID生產(chǎn)的CI-202葉面積儀進行測定。

1.3.4生理指標的測定玉米葉片中的全氮、全磷和全鉀含量測定參照鮑士旦的方法；可溶性糖測定采用蒽酮法；可溶性蛋白測定采用考馬斯亮藍法；硝酸還原酶活性采用磺胺顯色法。

1.4數(shù)據(jù)處理

所有數(shù)據(jù)通過SPSS 13.0軟件進行統(tǒng)計分析，處理間差異采用單因素方差分析（one-way ANOVA）和Duncan's多重比較，差異顯著性水平為α=0.05。

2.結(jié)果與分析

2.1不同AMF對玉米根系侵染率的影響

由表1可見，接種菌劑的玉米根系均被侵染，而未接種菌劑的根系未發(fā)現(xiàn)叢枝菌根結(jié)構(gòu)。結(jié)果表明，不同菌劑處理根系侵染率參數(shù)呈現(xiàn)差異。F%結(jié)果呈現(xiàn)G4>Gm>Gv>Ge、Gi趨勢；M%表現(xiàn)為G4>Gm、Gv>Ge>Gi；m%依次為G4、Gv、Gm>Ge>Gi；a%為Ge、Gi>Gm、Gv、G4；A%為G4>Gm、Gv>Ge>Gi。綜合各侵染參數(shù)結(jié)果，4種單菌劑和混合菌劑對玉米的侵染效果不同，混合菌劑侵染率最高，Gm和Gv其次，Ge和Gi最低?？梢?，混合接種的侵染率高于單接菌。