歐克芳
摘要:鑒定了在湖北省武漢市解放公園、月湖公園濕地植物種植區(qū)的再力花(Thalia dealbata)葉片上發(fā)現(xiàn)的1種病原未知的再力花病害的病原菌種類。從葉片上分離得到病菌,經(jīng)柯赫氏法則驗證為致病病原菌,據(jù)病原菌培養(yǎng)性狀和形態(tài)特征將該病原菌鑒定為新月彎孢菌[Curvularia lunata (Wakker) Boed]。彎孢菌危害再力花,引起葉枯病。
關(guān)鍵詞:再力花;葉枯??;病原鑒定;新月彎孢菌
中圖分類號: S432.4+4文獻標志碼: A文章編號:1002-1302(2015)09-0164-02
再力花(Thalia dealbata)別稱水竹芋,原產(chǎn)于北美地區(qū),為竹芋科再力花屬多年生草本植物,1992年再力花作為觀賞植物自日本引入中國[1]。再力花對氮、磷的去除效果好,易成活、繁殖快,具有一定的耐寒性,因此被廣泛應(yīng)用于人工濕地[2]。2008年7月,筆者在湖北省武漢市解放公園、月湖公園濕地植物種植區(qū)的再力花葉片上發(fā)現(xiàn)了1種病原未知的再力花病害,發(fā)病率達30%。本研究鑒定了該病害的病原菌種類,旨在為做好該病害的防治工作提供依據(jù)。
1材料與方法
1.1材料
病原菌采自武漢市解放公園、月湖公園再力花發(fā)病典型的病葉。
1.2癥狀描述
按常規(guī)方法對病株出現(xiàn)的癥狀進行描述。
1.3病原菌的分離和菌種純化
采用常規(guī)組織分離法進行分離。切取發(fā)病典型的再力花葉片病健交界處5 mm×5 mm小塊,用70%乙醇消毒5 s,01%HgCl2表面消毒30 s,滅菌水沖洗3~4次,無菌操作接種到馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA)上,28 ℃培養(yǎng),培養(yǎng)5 d待產(chǎn)孢后進行單孢分離純化,再轉(zhuǎn)入試管斜面保存。
1.4病原菌致病性的測定及形態(tài)觀察
將純化、產(chǎn)孢的病原菌孢子用無菌水配制成106個/mL的孢子懸浮液,選取健康再力花植株葉片,用無菌水將再力花葉片表面蠟粉洗凈,噴灑孢子懸浮液于葉片上,以無菌水作為對照;保濕,觀察并記錄葉片發(fā)病情況。將病原菌接種于PDA培養(yǎng)基上,于28 ℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)3 d,觀察菌落顏色、形狀、大小,產(chǎn)孢后觀察分生孢子顏色、形態(tài)及分生孢子梗形態(tài)。
2結(jié)果與分析
2.1癥狀描述
該病主要危害葉片,葉尖、葉緣發(fā)生多(圖1),發(fā)病初期葉出現(xiàn)褪綠斑,病斑逐漸擴展成不規(guī)則形,中央灰白色,周緣有褪綠暈圈。高溫高濕時病斑擴展快,葉尖葉緣褪綠成青枯狀,葉片卷曲,嚴重時病斑聯(lián)合形成大面積組織壞死,導(dǎo)致葉片枯死。潮濕條件下,病斑正面、反面均可產(chǎn)生分生孢子梗及分生孢子,呈灰黑色霉狀物(圖2)。田間發(fā)病始于4月中下旬,7—9月發(fā)病嚴重。
2.2病原菌培養(yǎng)性狀及形態(tài)
PDA培養(yǎng)基上菌絲初期為白色,逐漸轉(zhuǎn)為墨綠色至黑色,菌落圓形、平展,周緣整齊(圖3)。分生孢子梗褐色,有隔,直或彎曲,頂部呈屈膝狀合軸式延伸。分生孢子褐色,大多3個隔分成4個細胞;從基部數(shù)第3個細胞向一側(cè)膨大,深褐色,第2個細胞為淡褐色,頂部、基部細胞色淺。分生孢子光滑,彎月形、廣梭形、棍棒形或近橢圓形,少數(shù)丫形(三角形)。分生孢子大小為(22.5~32.5)μm×(7.5~15.0)μm(圖4)。根據(jù)病原菌分生孢子梗、分生孢子及菌絲形態(tài)特征,認定該菌為半知菌亞門絲孢綱絲孢目暗梗孢科彎孢霉屬新月彎孢菌[Curvularia lunata (Wakker) Boed][3-6]。
2.3致病性測定
接種7 d,用孢子懸浮液接種的葉片均發(fā)病,病斑初期為褪綠小點,隨著病害的發(fā)展,病斑中央灰白色有褪綠暈圈,從病斑上重新分離到相同的病原菌,遵循柯赫式法則。對照葉片均不發(fā)病。
3結(jié)論與討論
再力花是觀賞價值極高的優(yōu)良的濕地挺水植物。近年來,再力花葉枯病在武漢市發(fā)生日益嚴重,葉枯病造成再力花葉片干枯卷曲,影響觀賞價值。本研究結(jié)果表明,新月彎孢菌[Curvularia lunata (Wakker) Boed]是武漢市再力花葉枯病的致病菌。朱明旗等對新月彎孢菌的生物學(xué)特性進行了初步研究,該菌生長、孢子萌發(fā)最適溫度為25~35 ℃,相對濕度在98%以上時,孢子萌發(fā)率達78%以上[7]。武漢市7—9月為高溫高濕天氣,適合菌絲生長、孢子萌發(fā)。新月彎孢菌在PDA培養(yǎng)基、瓊膠燕麥培養(yǎng)基上,采用28 ℃恒溫培養(yǎng),12 h光照和12 h黑暗交替誘導(dǎo)產(chǎn)孢的方法產(chǎn)孢量均很大,說明光暗交替有利于孢子形成,符合朱明旗等的結(jié)論[7]。戴法超等研究結(jié)果表明,干燥是彎孢病菌存活、越冬的首要條件,在潮濕環(huán)境下,菌絲不復(fù)存在[8]。再力花存在于濕地環(huán)境中,其病菌越冬、發(fā)生規(guī)律、病害循環(huán)及防治措施有待進一步研究。
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