微生物學

封面介紹：Germination of Pst uredionspores under KN-93 treatment and distilled water incubation. A: Germination of Pst uredionspores in distilled water after 10 h incubation at 9°C； B: Germination of Pst uredionspores with 1.4 μmol/L KN-93 after 10 h incubation at 9°C.

小麥條銹菌鈣調(diào)素依賴蛋白激酶基因Pscamk的功能

秦娟，黃傳明，何付新，等

目的：克隆小麥條銹菌鈣調(diào)素依賴蛋白激酶基因Pscamk，并分析其在條銹菌侵染小麥過程中的表達特征及初步功能.方法：基于本實驗室已測序的小麥條銹菌基因組序列，利用RT-PCR方法，從小麥條銹菌生理小種CYR32中克隆Pscamk基因的cDNA序列，并利用網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)庫和生物信息學工具預測該基因編碼蛋白的基本特征和保守結(jié)構(gòu)；運用qRT-PCR技術(shù)分析Pscamk在不同發(fā)育及侵染階段的表達水平，進一步通過鈣調(diào)素依賴蛋白激酶（CaMK）的免疫抑制劑KN-93處理小麥條銹菌夏孢子，觀察其萌發(fā)狀況.結(jié)果：獲得1個1620 bp的小麥條銹菌CaMK基因Pscamk；序列分析發(fā)現(xiàn)，Pscamk編碼蛋白包含CaMK 蛋白的保守結(jié)構(gòu)域，并與小麥桿銹菌該類蛋白序列相似性最高.qRT-PCR分析表明，Pscamk在條銹菌侵染初期過程中的芽管發(fā)育、初生菌絲侵染及吸器形成時期呈顯著上調(diào)表達，且在條銹菌接種6 h時表達量最高，為對照夏孢子的20.74倍.在專一性免疫抑制劑KN-93處理后，隨著KN-93施加濃度的增加，條銹菌夏孢子萌發(fā)率逐漸降低，當濃度為1.4 μmol/L時夏孢子萌發(fā)率為8.02%，僅為對照的12%.討論：推測Pscamk基因參與了小麥條銹菌夏孢子萌發(fā)、芽管發(fā)育以及初期侵染結(jié)構(gòu)的形成.本研究為進一步探索條銹菌細胞鈣信號傳導機理和致病機制奠定了基礎(chǔ).

小麥條銹菌；鈣調(diào)素依賴蛋白激酶；免疫抑制劑KN-93；熒光定量RT-PCR

來源出版物：微生物學報，2014，54（11）: 1296-1303聯(lián)系郵箱：郭軍，guojunwgq@nwsuaf.edu.cn