朱旺生 張春云

摘 要：該文以白三葉種子為試驗材料，通過盆栽實驗研究了鹽膚木葉浸提液對鉛脅迫白三葉幼苗生長的影響，并分析了其組織細胞學機制。結(jié)果表明，經(jīng)鹽膚木葉浸提液處理后，鉛脅迫白三葉幼苗苗高、根長明顯增加，組織細胞形狀、大小及排列疏密程度發(fā)生改變，柵欄組織細胞形態(tài)較為清晰；鹽膚木葉浸提液處理對鉛脅迫白三葉幼苗生長具有明顯的促進作用。

關(guān)鍵詞：鹽膚木；鉛脅迫；白三葉幼苗；生長

中圖分類號 S79 文獻標識碼 A 文章編號 1007-7731（2015）21-41-02

Effects of Rhus chinensis Mill.Leaf Extracts on Growth of Trifolium repens L.Seedlings under Lead Stress

Zhu Wangsheng1，2 et al.

（1Resources environment and tourism-management，West Anhui University，Lu' an 237012，China；2Agricultural Engineering Design and Technology Service Center，West Anhui University，Lu' an 237012，China）

Abstract：In present paper the seeds of Trifolium repens L.are taken as test materials，the effects of Rhus chinensis Mill. leaf extracts on Trifolium repens L. seedlings growth under lead stress by pot experiment were studied，and the histocytology mechanism was analysed too. The results indicated that seedlings height and roots length of Trifolium repens L. under lead stress observably increased. Cell shape，size and the density of the arrangement obviously changed，and cell morphology of the fence became more clear. It was obviously for Rhus chinensis Mill. leaf extracts to promote Trifolium repens L. seedlings growth under lead stress.

Key words：Rhus chinensis Mill；Lead stress；Trifolium repens L.seedlings；Growth

隨著工業(yè)的快速發(fā)展以及過量施用化學肥料、農(nóng)藥等導致土壤重金屬鉛污染日益嚴重[1]，研究如何減輕或避免鉛脅迫對綠化植物造成的損傷，對于城市綠化具有重要意義。已有相關(guān)研究表明，一些高等植物葉、根等不同器官雨水淋溶液或分泌物能與根際環(huán)境中Pb2+等重金屬離子能形成穩(wěn)定的螯合物或其它穩(wěn)定的復合物，將Pb2+固定在污染的土壤中，因而能有效緩解環(huán)境中鉛脅迫對其它植物生長的有害影響[2-4]。

白三葉為豆科車軸草屬多年生草本植物，具有分枝多，根系發(fā)達，生長迅速，對環(huán)境適應(yīng)性強，迅速蔓延等優(yōu)點，是綠化的主要草坪草種之一[5]。鹽膚木為漆樹科漆樹屬落葉復葉植物，葉大量多[6]。本文主要研究了鹽膚木葉浸提液對鉛脅迫條件下白三葉幼苗生長的影響，以期為城市鉛污染土壤白三葉綠化提供理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料 顆粒飽滿、健康的白三葉種子；次氯酸鈉消毒液；塑料盆；醋酸鉛；20mL吸管；石蠟；鹽膚木葉片；手搖切片機；鑷子；水浴鍋；濾紙；解剖刀；酒精燈；蓋玻片；番紅染色液；固綠染色液；FAA固定液；二甲苯；乙醇；蛋白膠；高倍顯微鏡等。

1.2 方法

1.2.1 鹽膚木葉浸提液的制備 以皖西學院植物園中的鹽膚木葉片為材料，稱量500g，去處雜草后，再放入體積為5L玻璃瓶子中蒸餾水浸泡48h后過濾，獲得含水溶性物質(zhì)的鹽膚木葉浸提液，再經(jīng)大孔樹脂法提純后備用。

1.2.2 試驗方案 挑選顆粒飽滿、健康的白三葉種子1 100粒，用次氯酸鈉消毒后播種于塑料盆中，待種子發(fā)芽后澆灌濃度為800mg·L-1的Pb2+溶液（用醋酸鉛配制），并且隨機分成2組（對照組和處理組）。對照組不澆注鹽膚木葉浸提液，處理組從澆灌Pb2+溶液后第1天開始每隔3d澆灌100mL的鹽膚木葉浸提液。各對照組和處理組3個生物學重復

1.2.3 幼苗生長指標 每盆隨機選取各對照組和處理組白三葉幼苗10根，測苗高、根長，求平均值。

1.2.4 組織細胞分析 取各對照組和處理組白三葉幼苗幼嫩葉片，F(xiàn)AA固定，制作石蠟切片，觀測對照組和處理組幼苗組織細胞形態(tài)差異。

1.3 數(shù)據(jù)分析方法 試驗數(shù)據(jù)采用EXCEL初步處理，SPSS Statistics 17.0統(tǒng)計軟件進行單因素方差分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 鹽膚木葉浸提液對鉛脅迫白三葉幼苗生長的影響

2.1.1 鹽膚木葉浸提液對鉛脅迫白三葉幼苗苗高的影響 由試驗觀察得知，Pb2+脅迫下白三葉幼苗苗高為1.20cm，鹽膚木葉浸提液處理后白三葉幼苗苗高為1.73cm，且處理組幼苗苗高明顯高于對照組，鹽膚木葉浸提液處理后白三葉幼苗的苗高比對照組高出的44.2%，差異顯著（P<0.05）。

2.1.2 鹽膚木葉浸提液對鉛脅迫白三葉幼苗根長的影響 由試驗觀察得知，Pb2+脅迫下白三葉幼苗根長為1.79cm，鹽膚木葉浸提液處理后白三葉幼苗根長為2.34cm，且處理組幼苗苗高明顯高于對照組，鹽膚木葉浸提液處理后白三葉幼苗的苗高比對照組高出的30.7%，差異顯著（P<0.05）。

2.2 鹽膚木葉浸提液對鉛脅迫白三葉幼苗組織細胞影響 石蠟切片組織細胞顯微分析表明（圖1），鉛脅迫白三葉幼苗葉肉組織細胞形態(tài)不夠完整，柵欄組織細胞形態(tài)不夠清晰；而經(jīng)鹽膚木葉浸提液處理后白三葉幼苗葉肉組織細胞整齊性發(fā)生了明顯的變化，組織細胞的形狀、大小及細胞排列的疏密程度發(fā)生改變，柵欄組織細胞形態(tài)較為清晰。

3 討論與結(jié)論

3.1 鹽膚木葉浸提液對Pb2+脅迫白三葉幼苗生長的影響 Pb2+脅迫對植物幼苗生長有害影響的研究很多，但研究如何緩解Pb2+脅迫對白三葉幼苗生長的影響研究較少。本研究結(jié)果表明，鹽膚木葉浸提液對鉛脅迫條件下的白三葉幼苗生長有明顯的緩解作用，與對照相比，鹽膚木葉浸提液處理顯著提高了白三葉幼苗的苗高和根長。相關(guān)研究表明，高等植物葉片含有多種水溶性的酚類物質(zhì)，這些酚類物質(zhì)在一定條件下，可能與植物根際環(huán)境中Pb2+產(chǎn)生絡(luò)合反應(yīng)，形成鉛螯合物或復合物，Pb2+轉(zhuǎn)變?yōu)橹参锔坎灰孜盏你U形態(tài)[7-11]。由于鹽膚木葉中含有豐富的水溶性多酚[12]，因此，經(jīng)鹽膚木葉浸提液處理的Pb2+脅迫白三葉幼苗生長得到了明顯緩解。

3.2 鹽膚木葉浸提液處理對Pb2+脅迫白三葉幼苗生長影響機制 鹽膚木葉浸提液處理后，Pb2+脅迫白三葉幼苗苗高、根長顯著提高，這說明鹽膚木葉浸提液處理對鉛脅迫白三葉幼苗的生長有明顯的改善作用。這是因為鹽膚木葉浸提液處理后，Pb2+變成了對植物損傷較小的螯合物或復合物形態(tài)，減輕了對植物組織細胞的損傷[13]，白三葉組織細胞生長受到的抑制作用減小，因而表現(xiàn)在外部形態(tài)上苗高和根長就越長。

參考文獻

[1]魏學玲.重金屬鉛脅迫對小麥種子萌發(fā)及幼苗生理生化特性的影響[J].生態(tài)學雜志，2010（4）：4-76.

[2]Blu U.All elopement interaction involving phenol acids[J].Nematode，1996，28：259-267.

[3]常學秀，段昌群，王煥校.根分泌作用與植物對金屬毒害的抗性[J].應(yīng)用生態(tài)學報，2000，2（11）：315-320.

[4]張慧智，劉云國，黃寶榮，等.錳礦尾渣污染土壤上植物受重金屬污染狀況調(diào)查[J].生態(tài)學雜志，2004，23（1）：111-113.

[5]朱旺生，沈益新.白三葉和高羊茅不同品種對蘿卜幼苗的化感作用[J].南京農(nóng)業(yè)大學學報，2004，27（1）：28-31.

[6]王瓊，宋桂龍.鹽膚木種子硬實與萌發(fā)特性研究[J].種子，2008，27（4）：58-61.

[7]趙博生，畢紅衛(wèi).重金屬對植物細胞的毒害作用研究進展[J].淄博學院學報，1999，1（1）：86-88.

[8]林琦，陳英旭，陳懷滿，等.根系分泌物與重金屬的化學行為研究[J].植物營養(yǎng)與肥料學報，2003，9（4）：425-431.

[9]王春春，沈振國.鎘在植物體內(nèi)的積累及其對綠豆幼苗生長的影響[J].南京農(nóng)業(yè)大學學報，2001，24（4）：9-13.

[10]Rossini Olive S，Valdes B.Lei EO.Accumulation and in viva distribution of pollutant elements in Erica and evaluate[J].Science of the Total Environment，2009，407：1929-1936.

[11]Ready AM kumar SG Jyothsnakumari G eta.Lead induced changes in antioxidant metabolism of horse gram（Macro Tylenol uniformly（Lam.）verb）and benignant gram（Cicero arietinum L.）[J].Chemo sphere，2005，60：97-104.

[12]陳存武，張莉，何曉梅，等.鹽膚木總黃酮的提取研究[J].湖南農(nóng)業(yè)科學，2010（13）：119-122.

[13]韓寶賀，朱宏.鎘脅迫對白三葉的富集能力、葉片顯微結(jié)構(gòu)及其生理特性的影響[J].草業(yè)學報，2014，6（23）：167-175.

（責編：張宏民）