龍友華, 劉洋洋, 吳小毛, 胡安龍, 張 承, 王 偉, 李榮玉

(貴州大學農(nóng)學院， 貴陽 550025)

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貴州甘蔗真菌病害初步調(diào)查及褐斑病防治藥劑篩選

龍友華, 劉洋洋, 吳小毛, 胡安龍, 張 承, 王 偉, 李榮玉

(貴州大學農(nóng)學院， 貴陽 550025)

為掌握貴州甘蔗真菌病害種類及發(fā)生情況,采用隨機踏查、定點調(diào)查、癥狀診斷與病原菌形態(tài)特征觀察等方法對貴州甘蔗產(chǎn)區(qū)7個縣進行真菌病害調(diào)查;采用菌絲生長速率法,對甘蔗褐斑病進行了5種殺菌劑室內(nèi)毒力測定和田間防效試驗。結果表明,貴州甘蔗主要真菌病害有褐斑病、褐銹病、赤腐病、黃斑病、輪斑病、褐條病、煤煙病、黑穗病,其中褐斑病、輪斑病、褐條病發(fā)生較重,煤煙病發(fā)生嚴重;5種殺菌劑中,325 g/L苯甲·嘧菌酯懸浮劑對甘蔗褐斑病毒力最高,防效最好,EC50為0.002 5 mg/L,第3次藥后10 d防效達86.46%。其他4種殺菌劑對褐斑病均有較好的防治效果,可應用于甘蔗生產(chǎn)防治褐斑病。

貴州; 甘蔗; 真菌病害; 褐斑病; 藥劑篩選

貴州是農(nóng)業(yè)部劃定的全國7個南亞熱作省區(qū)之一,甘蔗生產(chǎn)和蔗糖業(yè)是貴州低熱河谷地區(qū)特色優(yōu)勢產(chǎn)業(yè),隨著種植面積不斷擴大,甘蔗病害發(fā)生逐年加重。近年來,國內(nèi)學者對甘蔗病害做了大量調(diào)查研究,韋金菊等[1]進行了廣西甘蔗主要真菌病害調(diào)查,明確了廣西蔗區(qū)主要真菌病害的發(fā)生情況和種類;熊國如等[2]等調(diào)查了海南甘蔗產(chǎn)區(qū)病害,初步明確了海南甘蔗病害種類,共發(fā)現(xiàn)真菌病害有19種,其中甘蔗黑穗病、赤腐病、黃斑病、輪斑病、梢腐病發(fā)生普遍;吳偉懷等[3]對甘蔗梢腐病病原菌進行鑒定及其室內(nèi)毒力測定,試驗表明多菌靈毒力最強,EC50為1.77～2.51 μg/mL;易代勇等[4]初步調(diào)查了貴州‘黔糖3號’果蔗病害,共發(fā)現(xiàn)真菌病害6種,其中以虎斑病、褐條病、黃斑病危害較重。

貴州蔗區(qū)作為全國蔗糖業(yè)的補充部分,病蟲害嚴重影響甘蔗產(chǎn)量及品質(zhì),已成為威脅貴州甘蔗生產(chǎn)的主要因素。目前貴州甘蔗真菌病害系統(tǒng)調(diào)查及褐斑病防治藥劑篩選未見報道,2011-2012年,筆者在貴州甘蔗產(chǎn)區(qū)開展了病害種類調(diào)查,進行5種殺菌劑對甘蔗褐斑病病菌室內(nèi)毒力測定和田間藥效試驗,旨在明確貴州甘蔗主要真菌病害種類,篩選出防治甘蔗褐斑病高效、低毒的殺菌劑及其適宜使用濃度,以期為貴州甘蔗病害高效、安全防治提供技術依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 調(diào)查時間和地點

2011年5月-2012年10月,在貴州甘蔗主要種植區(qū)貞豐縣魯榮鄉(xiāng)、白層鎮(zhèn)、魯貢鎮(zhèn)、沙坪鄉(xiāng);望漠縣昂武鄉(xiāng)、納夜鎮(zhèn)、大觀鄉(xiāng)、桑朗鎮(zhèn),冊亨縣慶坪、丫他、巧馬、八渡、巖架5個鄉(xiāng)鎮(zhèn);關嶺縣八德鄉(xiāng)、斷橋鄉(xiāng)、新鋪鄉(xiāng);荔波縣朝陽鎮(zhèn)、撈村鄉(xiāng)、瑤山鄉(xiāng)、洞塘鄉(xiāng);晴隆縣雞場鎮(zhèn)和普安縣江西坡鎮(zhèn)等7個縣22鄉(xiāng)鎮(zhèn)開展病害發(fā)生種類及發(fā)生情況調(diào)查。

1.2 調(diào)查方法

采用普查與詳查、定點與定時、病發(fā)特點特征與病原鏡檢相結合的方法進行調(diào)查。對調(diào)查的田塊,采用5點取樣法進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計記錄,每點調(diào)查10叢共50叢甘蔗植株地上部分的病害,同時采集典型病害癥狀制作標本,編號帶回實驗室進行鑒定。

1.3 病害種類鑒定

將采回實驗室標本進行癥狀觀察,選取癥狀典型的標本直接提取病原物制片,利用光學顯微鏡對病原菌形態(tài)特征進行觀察、記錄;對病征不明顯或復合侵染的病害,采用常規(guī)組織分離培養(yǎng)鑒定方法,接種于PDA平板培養(yǎng)基上,在23～25 ℃條件下培養(yǎng)純化,觀察培養(yǎng)性狀,進行種類鑒定。根據(jù)鏡檢結果,結合癥狀特征,并對照魏景超的《真菌鑒定手冊》[5]、陸家云的《植物病原真菌學》[6]和張中義等的《植物病原真菌學》[7]以及其他有關甘蔗病害的描述以確定病害種類[8-10]。

1.4 褐斑病防治藥劑篩選

1.4.1 室內(nèi)毒力測定

1.4.1.1 供試菌株

甘蔗褐斑病菌(CercosporalongipesButler)采取組織分離法[11],在貞豐縣魯貢鎮(zhèn)甘蔗生產(chǎn)試驗基地采樣分離獲得,經(jīng)分離純化后保存于PDA斜面培養(yǎng)基中,低溫(4 ℃)保存。

1.4.1.2 培養(yǎng)基

PDA培養(yǎng)基[11]：去皮馬鈴薯200 g、蔗糖20 g、瓊脂20 g、水1 000 mL。

1.4.1.3 供試藥劑

供試藥劑及使用濃度見表1。

表1 供試藥劑及使用濃度

1.4.1.4 含藥PDA培養(yǎng)基配制

按表1配制不同藥劑處理系列濃度的母液,以1∶9的比例與PDA培養(yǎng)基混合均勻即得到系列濃度梯度的含藥培養(yǎng)基。每種藥劑不同濃度處理重復3次,以添加滅菌水的培養(yǎng)基平板為空白對照。

1.4.1.5 測定方法

采用菌絲生長速率測定法[12]。在純化后擴繁的甘蔗褐斑病菌菌落上用打孔器取直徑5 mm菌餅,接種到含藥培養(yǎng)基和空白對照培養(yǎng)基平板中央(每皿接種1個菌餅),分別于28 ℃恒溫箱中培養(yǎng)。3 d后采用十字交叉法分別測量甘蔗褐斑病菌菌落直徑,計算不同處理對菌絲生長的抑制率。

1.4.1.6 數(shù)據(jù)分析

利用Microsoft Excel 2007和DPS軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析,以殺菌劑濃度的對數(shù)值為x,對應的菌絲生長抑制率的幾率值為y進行線性回歸,得出毒力回歸方程、決定系數(shù)(R2)及藥劑對靶標病菌的毒力EC50。

1.4.2 田間藥效試驗

1.4.2.1 試驗地概況

試驗于2012年7月在貴州省貞豐縣魯貢鄉(xiāng)魯貢村甘蔗種植基地進行,試驗地位于東經(jīng)105°25′～105°56′,北緯25°07′～25°44′,海拔450 m,年平均氣溫16.6 ℃,年降水量1 376.9 mm,屬典型的喀斯特地貌,低山丘陵。供試甘蔗品種為‘黔糖3號’,連作時間長,甘蔗褐斑病發(fā)生嚴重。

1.4.2.2 試驗設計

試驗設80%甲基硫菌靈可濕性粉劑1 000倍液、325 g/L苯甲·嘧菌酯懸浮劑1 500倍液、10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑1 500倍液、80%丙森鋅可濕性粉劑800倍液、80%戊唑醇水分散粒劑10 000倍液,清水對照(CK)共6個處理。每小區(qū)面積30 m2,重復3次,采用隨機區(qū)組排列。于7月14日甘蔗褐斑病零星發(fā)生時施第1次藥,7月29日施第2次藥,8月13日施第3次藥,均勻施藥于蔗株葉片正反面,以葉面霧滴開始下滴為準,試驗期間不使用其他藥劑。

1.4.2.3 調(diào)查統(tǒng)計方法

于8月23日第3次藥后10 d調(diào)查并記錄發(fā)病情況[13]。每小區(qū)隨機5點取樣,每點取2株,每株調(diào)查10片葉。褐斑病嚴重度參照文獻[14]的標準分為0～5級(表2)。

表2 甘蔗褐斑病分級標準

病葉率(%)=病葉數(shù)/調(diào)查總數(shù)×100;病情指數(shù)=∑(各級病葉數(shù)×各級代表值)/(調(diào)查總?cè)~片數(shù)×最高一級代表值)×100;防效(%)=(對照病情指數(shù)-處理病情指數(shù))/對照病情指數(shù)×100。

2 結果與分析

2.1 貴州甘蔗真菌病害種類及發(fā)生情況

通過調(diào)查鑒定,貴州甘蔗真菌病害常見的有8種(表3),即褐斑病、褐銹病、赤腐病、黃斑病、輪斑病、褐條病、煤煙病、黑穗病,其中褐斑病、輪斑病、褐條病發(fā)生較重,煤煙病發(fā)生嚴重。甘蔗褐斑病在貴州各蔗區(qū)均有發(fā)生,‘黔糖3號’和‘新臺糖22號’2個品種發(fā)生普遍;輪斑病主要發(fā)生在貞豐、望漠、冊亨蔗區(qū),‘黔糖3號’和‘粵糖00-236’均有發(fā)病;褐條病在貞豐、望漠、冊亨、荔波蔗區(qū)發(fā)生較重;黑穗病主要發(fā)生在貞豐魯貢、荔波朝陽,主要危害‘新臺糖22號’,有逐年加重的趨勢,其余病害在貴州甘蔗產(chǎn)區(qū)都有發(fā)生。

2.2 不同藥劑對褐斑病菌的室內(nèi)毒力

從表4可以看出,甘蔗褐斑病菌對5種殺菌劑均具有較高的敏感性,其中對325 g/L苯甲·嘧菌酯懸浮劑的敏感性最高,EC50為0.002 5 mg/L;其次是10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑,EC50為0.017 5 mg/L;對80%丙森鋅可濕性粉劑的敏感性最低,EC50為0.403 6 mg/L。

2.3 不同藥劑對甘蔗褐斑病的防效

由表5可知,在甘蔗褐斑病發(fā)生期,325 g/L苯甲·嘧菌酯懸浮劑1 500倍液、80%甲基硫菌靈可濕性粉劑1 000倍液對甘蔗褐斑病防治效果顯著,第3次藥后10 d防效分別為86.46%、84.86%,且與其他處理差異均達極顯著水平;10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑1 500倍液、80%丙森鋅可濕性粉劑800倍液防治效果次之,第3次藥后10 d防效分別為81.80%和82.39%,但兩者間差異不顯著;80%戊唑醇水分散粒劑防效最低,第3次藥后10 d防效為75.69%。

表3 貴州甘蔗主要真菌病害及發(fā)生情況

表4 5種殺菌劑對甘蔗褐斑病菌的毒力

表5 5種藥劑防治甘蔗褐斑病的效果1)

1) 同列數(shù)據(jù)后標不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05),不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)。

The different small letters mean significant difference at 5% level, different capital letters indicate extremely significant difference at 1% level.

3 小結與討論

調(diào)查結果表明,貴州甘蔗主要真菌病害有褐斑病、褐銹病、赤腐病、黃斑病、輪斑病、褐條病、煤煙病、黑穗病等8種,其中褐斑病、輪斑病、褐條病發(fā)生較重,煤煙病發(fā)生嚴重。貴州甘蔗單一品種連作現(xiàn)象嚴重,由于長期不合理施肥及大面積密植,造成病害逐年加重。甘蔗病害防治應加強綜合防治技術應用,甘蔗生產(chǎn)中,科學應用農(nóng)業(yè)、物理、生物防治措施,通過農(nóng)業(yè)防治措施清除病殘葉,減少病原物,加強肥水管理,增施P、K肥,促進甘蔗光合作用,提高蔗株抗病能力,在病害發(fā)生流行時輔以化學防治措施,從而達到有效防控甘蔗病害的目的。

室內(nèi)毒力測定結果表明,5種殺菌劑對甘蔗褐斑病病菌菌絲生長均有不同程度的抑制作用,抑制率隨濃度的增加而增加,且藥劑間抑制率存在明顯差異。其中,苯醚甲環(huán)唑和嘧菌酯復配具有增效作用,抑制作用最強,其次是10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑。

田間藥效試驗結果表明,325 g/L苯甲·嘧菌酯懸浮劑對甘蔗褐斑病防治效果最好,防效達86.46%,與室內(nèi)毒力測定結果一致;其他4種殺菌劑均有較好的防治效果,室內(nèi)毒力測定10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑毒力高于80%丙森鋅可濕性粉劑,但田間試驗前者防效低于后者,可能與農(nóng)藥施用技術有關。

化學藥劑防治是有害生物綜合治理的重要手段,在日益重視食品安全、環(huán)境保護與可持續(xù)發(fā)展的今天,化學防治措施應做到合理利用,必須選用合適的藥劑及適宜使用濃度,選擇最佳防治時期才能獲得理想防治效果。從室內(nèi)毒力測定和田間試驗結果可以看出,325 g/L苯甲·嘧菌酯懸浮劑是防治甘蔗褐斑病的理想藥劑,適宜施用濃度在1 500倍液左右。

[1] 韋金菊,鄧展云,黃誠華,等.廣西甘蔗主要真菌病害調(diào)查初報[J].南方農(nóng)業(yè)學報,2012,43(9):1316-1319.

[2] 熊國如,李增平,趙婷婷,等.海南蔗區(qū)甘蔗病害種類及發(fā)生情況[J].熱帶作物學報,2010,31(9):1589-1595.

[3] 吳偉懷,李銳,鄭服叢.甘蔗梢腐病原菌的鑒定及其室內(nèi)毒力測定[J].甘蔗糖業(yè),2006(2):10-14.

[4] 易代勇,雷朝云,李向勇,等.黔糖3號果蔗病害調(diào)查與病原菌鑒定初報[J].中國農(nóng)學通報,2006,22(9):246-350.

[5] 魏景超.真菌鑒定手冊[M].上海:上?？茖W技術出版社,1979:101-649.

[6] 陸家云.植物病原真菌學[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2001:130-533.

[7] 張中義,冷懷瓊,張志銘,等.植物病原真菌學[M].成都:四川科學技術出版社,1984:48-94.

[8] 劉曉妹,劉文波,施煥煥.海南儋州甘蔗銹病病原菌的鑒定及其生物學特性的測定[J].中國糖料,2008(2):30-32.

[9] 吳懷文,鄭肖蘭,李銳,等.甘蔗黑穗病菌基礎生物學特性[J].熱帶作物學報,2010,31(8):1388-1392.

[10]楊子林,周軍,陳雙云.甘蔗褐條病田間調(diào)查存在問題與改進辦法[J].中國植保導刊,2010,30(11):36-38.

[11]許文耀.普通植物病理學實驗指導[C].北京:科學出版社,2006:70,161.

[12]方中達.植病研究方法[M].北京:農(nóng)業(yè)出版社,1998:122-125.

[13]農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥檢定所生測室.農(nóng)藥田間藥效試驗準則(二)[M].北京:中國標準出版社,2000:283-289.

[14]易代勇,張亦誠,雷朝云,等.黔糖3號果蔗病害盛發(fā)原因分析及綜合防控技術[J].作物雜志,2007(5):63-66.

(責任編輯：王 音)

Preliminary investigation of the fungal diseases on sugarcane in Guizhou and screening of fungicides againstCercosporalongipes

Long Youhua, Liu Yangyang, Wu Xiaomao, Hu Anlong, Zhang Cheng, Wang Wei, Li Rongyu

(College of Agriculture, Guizhou University, Guiyang 550025, China)

In order to make clear the fungal pathogen species on sugarcane and their occurrence regularity, present situation of the fungal diseases on sugarcane was investigated by random survey, site investigation, symptomatic diagnosis and morphological observation in seven counties of Guizhou Province. Virulence of the five fungicides againstCercosporalongipesButler were also determined by mycelium growth rate method and field plot experiment. The results showed that the major pathogens in sugarcane-growing regions of Guizhou wereC.longipes,PucciniamelanocephalaH. Syd. & P. Syd.,ColletotrichumfalcatumWent,Mycovellosiellakoepkei(W.Krüger) Deighton,LeptosphaeriasacchariBreda de Haan,Cochliobolusstenospilus(Drechsler)Mat.W.Yamam,Capnodiumsp.,UstilagoscitamineaSyd. 325 g/L difenoconazole·azoxystrobin SC had the highest inhibition rates againstC.longipesamong the five fungicides, with EC50value of 0.002 5 mg/L, and field control efficacy was 86.46% on the 10th day after the third spraying. Other fungicides also had good control effect againstC.longipes, and could be applied in practice.

Guizhou; sugarcane; fungal disease;Cercosporalongipes; fungicides screening

2014-05-22

2014-07-15

貴州省科技廳農(nóng)業(yè)攻關項目(黔科合NY字[2011]3024號)

S 435.661

A

10.3969/j.issn.0529-1542.2015.04.037

聯(lián)系方式 E-mail:gzlyh126@126.com