杜迎剛，賴鐘雄，張 忠

(1.濰坊科技學院，山東壽光262700，2.福建農(nóng)林大學園藝學院，福建福州350002，3.泰山醫(yī)學院生命科學學院，山東泰安 271000)

家蠅Musca domestica L.隸屬雙翅目Diptera、環(huán)裂亞目Cyclorrhapha、蠅科Muscidae，是世界各地最常見和經(jīng)常出沒于人畜居住環(huán)境的蠅種，也是大多數(shù)地區(qū)的優(yōu)勢種，與人類關系極為密切，能夠傳播霍亂、傷寒、結核、痢疾等多種人類疾病(陳曉敏，2009)和攜帶豬繁殖與呼吸綜合征病毒(路憲禮等，2012)等，是重要的媒介昆蟲。

從1956年中國政府公布了農(nóng)業(yè)四十條除四害開始，全國上下開始了對人畜居住場所和周圍環(huán)境家蠅的治理，而施用化學農(nóng)藥是最快最有效的降低和控制家蠅密度的方法，隨著殺蟲劑的大量施用，很多場所的家蠅得到了有效控制，但一些特殊場所像垃圾處理場、禽畜養(yǎng)殖場等環(huán)境的家蠅數(shù)量仍很大并對人類的生活造成很大干擾，同時，農(nóng)藥的大量使用還導致了家蠅抗藥性等系列問題的發(fā)生(張錚等，2012;劉陽等，2013)。這樣尋求獨特作用機理的殺蟲劑或簡便有效的施藥方法成了人類近來關注的焦點，一些生物殺蟲劑如白僵菌就是在這種背景下逐漸被人們認可并用在了包括家蠅在內(nèi)的多種害蟲的防治上(趙學球等，2007;張亞平，2014)。但其單獨對害蟲的控制效果往往不佳 (徐艷聆等，2009;康曼，2011)，為此，我們兼顧常規(guī)殺蟲劑的優(yōu)點，把從云南罹病家蠅體表分離到的球孢白僵菌(命名為球孢白僵菌F08 菌株)的孢子粉和家蠅的理想防治藥劑奮斗吶(曾曉芃等，2001)一起，利用具有良好吸附緩釋性能的麻繩為載體制成了雙效毒蠅繩，對其室內(nèi)籠中、豬舍、垃圾處理場3種環(huán)境條件下對家蠅的殺滅效果和白僵菌的致病情況進行了研究，以期對白僵菌的應用及家蠅和其它雙翅目害蟲的防治提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試蟲源

室內(nèi)試驗及菌種擴繁所用家蠅為泰山醫(yī)學院媒介生物學研究室2005年建立的室內(nèi)試驗種群。幼蟲用奶粉∶酵母∶麥麩∶水(10∶1∶75∶130)飼養(yǎng)，成蟲用奶粉∶紅糖(1∶3)飼養(yǎng)，飼養(yǎng)籠為30 cm×30 cm×45 cm 不銹鋼籠外加80 目尼龍網(wǎng)。飼養(yǎng)溫度25℃±1℃，相對濕度70%±5%，光照L∶D=12∶12 (7∶00-19∶00)。

1.1.2 球孢白僵菌孢子粉

球孢白僵菌F08 菌株采自云南罹病家蠅體表，現(xiàn)保存于泰山醫(yī)學院媒介生物學研究室。該菌株用家蠅成蟲連續(xù)復壯3 次后接種至馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(potato dextrose agar，PDA)中純化，擴繁。7 d 后采收并用真空冷凍干燥制得孢子粉，含孢量約8.04×1010個/g，含水量為5.38%。

1.1.3 毒蠅繩

球孢白僵菌毒蠅繩:將蜂蜜、紅糖等質(zhì)量混合并稀釋成140 g/kg，將直徑為0.5 cm 的細麻繩剪成50 cm 小段，浸泡其中30 min，取出晾干后在球孢白僵菌F08 菌株的分生孢子粉中滾動，使麻繩表面沾滿孢子粉(約3 g/繩)，即為球孢白僵菌毒蠅繩。

奮斗吶毒蠅繩:將蜂蜜、紅糖和5%的奮斗吶可濕粉劑等質(zhì)量混合，配成200 g/kg 的溶液，將直徑0.5 cm 長50 cm 的細麻繩浸泡其中30 min，取出晾干后即為奮斗吶毒蠅繩。

雙效毒蠅繩:將奮斗吶毒蠅繩在球孢白僵菌F08 菌株的分生孢子粉中滾動，使其表面沾滿孢子粉，即為雙毒蠅 (專利號CN201210082901.0)。

1.2 試驗方法

1.2.1 室內(nèi)試驗

試驗在泰安家蠅自然種群較大的8月份于室內(nèi)全天陽光直曬不到的地方進行(氣溫20-35℃，多陰天)。取生測籠 (30 cm×30 cm×45 cm)12 個，隨機分成4 組，其中1 組頂端懸掛僅浸泡蜂蜜、紅糖混合液的麻繩為對照，另3 組分別懸掛上述3種毒蠅繩，每籠接入羽化后2 d 的家蠅30頭，籠內(nèi)提供人工飼料(奶粉、白糖1∶3 混合)和飲水，每12 h 收集并記錄死亡蠅體，依據(jù)(1)、(2)式計算防治效果和校正防治效果;死亡蠅體置于培養(yǎng)箱內(nèi)25℃保濕培養(yǎng)，觀察感染球孢白僵菌的情況，以(3)式計算感病率。

1.2.2 室外試驗

豬舍:于泰安家蠅自然種群較大的8月份(氣溫20℃-35℃，多陰天)選取相距50 m 以上的豬舍12 間，隨機分成4 組，在豬舍頂棚距離地面1.5 m 處懸掛各種毒蠅繩和僅浸泡蜂蜜、紅糖混合液的對照麻繩，每平方米1 條。分別于掛繩前、掛繩后1 周和2 周于豬舍內(nèi)隨機網(wǎng)捕3 次并記錄捕獲的家蠅數(shù)量，根據(jù)(1)、(2)式計算防治效果和校正防治效果;于豬舍周圍分別收集死亡蠅體，帶回實驗室，根據(jù)收集地點分別置于培養(yǎng)箱內(nèi)25℃保濕培養(yǎng)，計錄感染球孢白僵菌蠅體的數(shù)量，根據(jù)(3)式計算感病率。

垃圾處理場:選取12 個獨立的垃圾處理場，隨機分成4 組，試驗方法同上。

1.3 數(shù)據(jù)處理方法

用SPSS 19.0 對數(shù)據(jù)進行平方根反正弦處理后，進行單因素方差分析，用Duncan 氏新復極差法進行差異性檢驗。

2 結果與分析

2.1 3種毒蠅繩在不同場所對家蠅的控制效果比較

從表1 可以看出，無論室內(nèi)還是室外試驗條件下，雙效毒蠅繩對家蠅的控制效果都優(yōu)于奮斗吶毒蠅繩和球孢白僵菌毒蠅繩。3種環(huán)境條件下，雙效毒蠅繩對家蠅的校正防治效果與球孢白僵菌毒蠅繩的防治效果差異極顯著(P＜0.01);且在豬舍環(huán)境條件下，1 周后其校正防治效果與奮斗吶毒蠅繩組有顯著差異(P＜0.05)，2 周后差異極顯著(P＜0.01)。同時，奮斗吶毒蠅繩組的校正防治效果顯著高于球孢白僵菌毒蠅繩組，在室內(nèi)試驗條件下1 周時有極差異顯著 (P＜0.01)，2 周后也顯著差異(P＜0.05);在豬舍條件下，兩者差異極顯著(P＜0.01)，在垃圾處理場，兩者在0.05 水平上顯著差異。

表1 3種毒蠅繩在不同場所對家蠅的防治效果Table 1 The control effect of Musca domestica caused by three poisonous fly ropes under different conditions

2.2 不同場所不同毒蠅繩致死家蠅的感病情況

不同毒蠅繩中的球孢白僵菌對致死家蠅的感病率不同場所單獨比較而言，無論在1 周還是2 周時，球孢白僵菌僅在室內(nèi)籠中時對家蠅的感病率在球孢白僵菌毒蠅繩組和雙效毒蠅繩組存在極顯著差異(P＜0.01)，而在豬舍或垃圾處理場環(huán)境條件下無顯著差異(P＜0.05)。3種試驗條件下的感病率對比而言，室內(nèi)籠中的球孢白僵菌毒蠅繩組與豬舍和垃圾處理場試驗條件下的球孢白僵菌毒蠅繩和雙效毒蠅繩組有極顯著差異 (P＜0.01);雙效毒蠅繩組1 周時在室內(nèi)與垃圾處理場間有顯著差異(P＜0.05)，2 周時分別與豬舍和垃圾處理場間有顯著差異(P＜0.05)和極顯著差異(P＜0.01);同時，2 周時死亡家蠅的感病率在室內(nèi)雙效毒蠅繩組和垃圾處理場球孢白僵菌毒蠅繩組也表現(xiàn)出顯著差異(P＜0.05)(表2)。

表2 不同毒蠅繩中的球孢白僵菌在不同試驗場所對家蠅的染病情況Table 2 The infection rate of Musca domestica caused by Beauveryia bassiana in different poisonous ropes under different conditions

3 分析與討論

雙效毒蠅繩對家蠅的控制效果僅在豬舍環(huán)境時與奮斗吶毒蠅繩間存在差異(P＜0.05) (表1)，這與不同環(huán)境的小氣候有關。因室內(nèi)籠中，家蠅與各種毒蠅繩隨機接觸的機會多;而垃圾處理場不斷受到人類清理垃圾活動和機器運轉(zhuǎn)的干擾，生境不穩(wěn)定，不利于家蠅的繁衍還造成對種群的驅(qū)趕。在室外環(huán)境中，糖蜜麻繩對照組(CK)和奮斗吶毒蠅繩組死亡家蠅的感病率雖很低但不像室內(nèi)環(huán)境時為零(表2)，這可能與球孢白僵菌毒蠅繩或雙效毒蠅繩致死家蠅在死亡前的遷移有關，這利于球孢白僵菌在家蠅種群中的擴散和蔓延，利用家蠅的長期控制，這正是雙效毒蠅繩優(yōu)于奮斗吶毒蠅繩之處;但2 周時和1 周時感病率增加不明顯，這與球孢白僵菌孢子萌發(fā)對濕度等條件要求較苛刻(徐艷玲等，2009;關兵兵，2014)和8月份泰安氣候較干燥有關。

在室內(nèi)條件下，球孢白僵菌致死家蠅的感病率與雙效毒蠅繩致死家蠅的感病率存在極顯著差異(P＜0.01)，但無論在豬舍還是垃圾處理場，它們之間不存在顯著差異(P＜0.05)(表2)，也就是說室外條件下球孢白僵菌F08 菌株與奮斗吶具有很好的兼容性，這與徐艷聆等(2009)、蔡悅等(2011)的研究一致。室內(nèi)存在差異的原因與奮斗吶的速效性有關，即很多家蠅在染菌前已被奮斗吶毒死。2 周和1 周時球孢白僵菌對致死家蠅的感病率比較而言，球孢白僵菌毒蠅繩組和雙效毒蠅繩處理組死亡家蠅的感病率在室內(nèi)條件下較穩(wěn)定，而在豬舍和垃圾處理場環(huán)境條件下的明顯降低(表2)，這與室外紫外線對球孢白僵菌致病力的影響(潘志萍等，2008;徐艷聆等，2009)及風不利于分子孢子在毒蠅繩表面的粘附有關，這也是該毒蠅繩需要改進的地方。

白僵菌是一種寄主范圍非常廣的蟲生真菌，其通過穿透昆蟲體壁引起侵染而致昆蟲死亡，對人類、環(huán)境、作物和天敵安全，國內(nèi)外已有幾家公司如Boverin、Mycotrol-ES、江西九江天人生態(tài)股份有限公司對其一些種類進行了登記注冊(張亞平，2014)，但因其致病過程需要環(huán)境、菌株和寄主三者的協(xié)同作用(關兵兵，2014)，因而產(chǎn)品性能穩(wěn)定性差，雖很多學者對其劑型(應盛華，2001;朱明媛，2012;李姍等，2014)和使用技術等方面進行了大量的研究，但多局限在以噴灑為主的劑型方面。雙效毒蠅中白僵菌以干粉狀態(tài)存在，有利于孢子生活力的保持，同時該毒蠅繩還浸有蠅類的食物誘劑和殺蟲介質(zhì)奮斗吶，使用方法中又充分考慮了家蠅喜歡繩上棲息及倒掛取食的習性(杜迎剛等，2008)，所以對家蠅有較理想的控制效果。

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