劉靜波 劉正群 鐘儒清 陳 亮 高理想 張宏福*

(1.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所，動物營養(yǎng)學(xué)國家重點實驗室，北京 100193;2.西南科技大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院，綿陽 621010)

豆粕作為家禽的主要蛋白質(zhì)來源不僅可提供豐富的可消化氨基酸，還能提供一定數(shù)量的可消化磷。因此，準(zhǔn)確評定肉雞飼糧中豆粕磷的消化率是合理配制家禽飼糧的基礎(chǔ)。與磷的表觀消化率相比，考慮了動物內(nèi)源磷損失的真消化率更能真實準(zhǔn)確地反映出動物對磷的生物學(xué)利用效率［1－3］。線性回歸法和差量法是測定養(yǎng)分真消化率的主要方法，在早期研究中已被廣泛用于磷和氨基酸真消化率的測定［4－7］。雖然前期已有大量研究報道了肉雞飼糧中豆粕的磷真消化率，但不同試驗結(jié)果之間的差異較大，導(dǎo)致上述差異的主要原因可能在于不同試驗之間飼糧鈣磷比和磷真消化率的測定方法有所不同，從而影響了待測飼料原料的磷真消化率評定［8－11］。本試驗通過使用線性回歸法和差量法，研究了鈣磷比對肉雞飼糧豆粕中磷真消化率測定的影響，為標(biāo)準(zhǔn)化磷真消化率測定時的飼糧鈣磷比以及合理使用飼料原料磷真消化率測定結(jié)果用于飼料配制提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗設(shè)計和試驗動物

試驗采用3×3因子完全隨機區(qū)組設(shè)計，9個半純合飼糧包含3個鈣磷比(1.0、1.5和 2.0)和 3個水平的豆粕(30.00%、43.00% 和 56.00%)。飼糧中的磷主要來源于酪蛋白和豆粕，選擇三氧化二鉻作為外源指示劑，通過添加石粉調(diào)整飼糧鈣磷比，具體飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。本試驗選用576只15日齡的雄性羅氏肉雞，根據(jù)初始體重隨機分為9個處理，每個處理8個重復(fù)，每個重復(fù)8只雞。試驗期間所有動物飼養(yǎng)于代謝籠內(nèi)，室內(nèi)溫度控制在24～27℃，自然光照，自由采食和飲水，試驗期為7 d。試驗結(jié)束時(22日齡)對每只雞進(jìn)行稱重，以籠為單位計算采食量，并據(jù)此計算飼料轉(zhuǎn)化效率。

表1 飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of diets(air-dry basis) %

1.2 樣本收集

試驗結(jié)束時(22日齡)，使用二氧化碳麻醉屠宰所有試驗動物，收集每籠雞所有的回腸食糜，混合均勻后在60℃烘箱中烘干至恒重，粉碎待測。

1.3 測定指標(biāo)與方法

飼料樣本和食糜干物質(zhì)含量在105℃條件下干燥24 h后測定得出。使用比色法測定飼糧和食糜中鉻和磷的含量［12］。

1.4 磷的表觀消化率和真消化率計算方法

飼糧磷的表觀消化率按照公式(1)計算:磷的表觀消化率(%)=100－［(飼糧中鉻含量/

食糜中磷的排泄量和可消化磷分別按照公式(2)和(3)計算:

使用線性回歸法測定豆粕中磷的真消化率按照公式(4)計算:

如公式(4)線性方程所描述，用可消化磷與飼糧總磷攝入量做回歸，得出的回歸方程斜率即為豆粕中磷的真消化率。

使用差量法測定豆粕中磷的真消化率按照公式(5)計算:

如公式(5)所描述，磷的真消化率由豆粕含量56.00%組和豆粕含量30.00%組的可消化磷之差除以2組之間總磷攝入量之差得出。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

使用SAS 9.3統(tǒng)計分析軟件中的一般線性模型(GLM)程序按照3×3因子完全隨機區(qū)組設(shè)計分析試驗數(shù)據(jù)，所有試驗數(shù)據(jù)均以籠為單位進(jìn)行統(tǒng)計分析，統(tǒng)計模型為 yijk=μ+αi+βj+γk+(αβ)ij+εijk，其中μ為總體平均效應(yīng)，αi為豆粕水平效應(yīng)，βj為飼糧鈣磷比效應(yīng)，γk為區(qū)組效應(yīng)，(αβ)ij為豆粕水平和鈣磷比的互作效應(yīng)，εijk為試驗誤差效應(yīng)。試驗數(shù)據(jù)以平均值±平均標(biāo)準(zhǔn)誤表示，P＜0.05為差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼糧鈣磷比對肉雞生長性能和干物質(zhì)消化率的影響

由表2可見，飼糧鈣磷比對肉雞體增重、采食量、飼糧轉(zhuǎn)化效率和干物質(zhì)攝入量無顯著影響(P＞0.05)，而干物質(zhì)消化率和脛骨灰分含量受飼糧鈣磷比的影響(P＜0.01)。肉雞體增重(P＜0.01)、采食量(P＜0.1)、飼料轉(zhuǎn)化效率(P＜0.01)、干物質(zhì)消化率(P＜0.01)和脛骨灰分含量(P＜0.05)受飼糧豆粕添加水平的影響。隨著飼糧豆粕添加水平的提高，肉雞體增重和飼料轉(zhuǎn)化效率呈線性增加(P＜0.01)，而干物質(zhì)消化率呈線性降低(P＜0.01)。此外，干物質(zhì)消化率受飼糧鈣磷比和豆粕水平互作效應(yīng)的影響(P＜0.05)。

表2 飼糧鈣磷比對肉雞生長性能和干物質(zhì)消化率的影響Table 2 Effects of dietary Ca∶P ratio on growth performance and dry matter digestibility of broilers

續(xù)前表

2.2 飼糧鈣磷比對肉雞回腸食糜磷表觀消化率的影響

由表3可見，提高飼糧鈣磷比導(dǎo)致肉雞回腸食糜磷排泄量顯著增加(P＜0.01)，而可消化磷和磷的表觀消化率顯著降低(P＜0.01)。隨著飼糧豆粕水平的提高，肉雞回腸食糜磷排泄量和可消化磷呈線性增加(P＜0.01)，而磷的表觀消化率呈線性降低(P＜0.01)?？上资茱暭Z鈣磷比和豆粕水平互作效應(yīng)的影響(P＜0.01)。

表3 飼糧鈣磷比對肉雞總磷攝入量和回腸食糜磷的表觀消化率的影響Table 3 Effects of dietary Ca∶P ratio on total P intake and apparent P digestibility in ileal digesta of broilers

2.3 飼糧鈣磷比對豆粕中磷真消化率測定的影響

可消化磷與總磷攝入量之間顯著線相關(guān)是使用線性回歸法測定磷真消化率的前提條件，本試驗結(jié)果滿足上述條件，由此得出的線性回歸方程見表4。由表4和表5的數(shù)據(jù)可知，飼糧鈣磷比在1.0、1.5和2.0時，由線性回歸法測得豆粕中磷的真消化率分別為 53.36%、56.81%和 40.79%，而差量法測得豆粕中磷的真消化率分別為55.59%、56.36%和39.84%。飼糧鈣磷比在 2.0時測得磷的真消化率顯著低于飼糧鈣磷比在1.0和1.5時測得磷的真消化率(P＜0.05)。在本試驗條件下，由線性回歸法測得磷的真消化率和差量法測得磷的真消化率之間無顯著差異(P＞0.05)。

表4 線性回歸法測得回歸方程Table 4 The regression equation determined by the regression method

表5 線性回歸法和差量法測得豆粕中磷的真消化率Table 5 The determined true digestibility of P in soybean meal by the regression method and the difference method

3 討論

3.1 飼糧鈣磷比和豆粕水平對肉雞生長性能和干物質(zhì)消化率的影響

線性回歸法和差量法是測定待測飼料原料中磷真消化率的主要方法，但前期關(guān)于飼糧因素影響線性回歸法和差量法測得磷真消化率的研究報道較少。因此，本試驗通過在肉雞飼糧中添加3個水平的豆粕(30.00%、43.00% 和 56.00%)，研究了飼糧鈣磷比(1.0、1.5 和2.0)對線性回歸法和差量法測得豆粕中磷真消化率的影響。在使用線性回歸法和差量法測定豆粕中磷真消化率的過程中會通過增加飼糧豆粕添加量的方式調(diào)整飼糧磷水平，從而必然導(dǎo)致不同飼糧的粗蛋白質(zhì)水平有所差異，最終影響肉雞的生長性能。在本試驗條件下，肉雞體增重和飼料轉(zhuǎn)化效率均隨飼糧豆粕水平的提高而線性增加，這與 Dilger等［13］和劉靜波等［14］的研究結(jié)果一致。不同處理飼糧的能量水平無顯著差異，因此肉雞采食量和干物質(zhì)攝入量不受飼糧豆粕水平和鈣磷比的影響。鈣和磷均為影響肉雞骨骼生長發(fā)育的重要礦物質(zhì)元素，因此，通過增加飼糧豆粕添加量的方式提高磷水平以及提高鈣磷比可顯著提高肉雞脛骨灰分含量，這與Iyayi等［15］的研究結(jié)果一致。豆粕粗纖維含量顯著高于玉米淀粉，通過添加玉米淀粉替代豆粕導(dǎo)致飼糧干物質(zhì)消化率線性降低，這與前期研究結(jié)果一致［13－14］。

3.2 飼糧鈣磷比和豆粕水平對肉雞回腸末端磷表觀消化率的影響

飼糧鈣磷水平低于動物需要量是使用線性回歸法和差量法測定磷真消化率的必要條件［2］。在本試驗中，飼糧鈣和總磷的最高水平分別為0.81%和0.39%，低于 NRC(1994)［16］推薦的鈣(1.00%)和非植酸磷(0.45%)需要量，滿足線性回歸法和差量法測定磷真消化率的條件。為緩解以玉米淀粉為主的半純合飼糧影響肉雞生長性能，本試驗在基礎(chǔ)飼糧中添加了5.00%的酪蛋白用于改善飼糧氨基酸模式。添加酪蛋白使得豆粕中的磷并非飼糧磷的唯一來源，但飼糧總磷水平的提高源于豆粕水平的增加，因此對豆粕中磷真消化率的測定無顯著影響。提高飼糧豆粕水平導(dǎo)致肉雞總磷攝入量以及回腸食糜中磷的排泄量顯著增加，這與Dilger等［13］和劉靜波等［14］的研究結(jié)果一致。提高飼糧鈣磷比顯著增加磷的排泄量，從而降低了可消化磷。本試驗結(jié)果表明，肉雞回腸食糜磷的表觀消化率隨飼糧豆粕水平和鈣磷比的提高顯著降低。肉雞飼糧鈣磷比為1.0(接近飼料原料所含鈣磷比)、1.5(商品飼糧鈣磷比)和2.0(可消化磷含量較高飼糧鈣磷比)時測得磷的表觀消化率分別在84.44% ～72.53%、76.85% ～68.06% 以及72.28% ～58.96% 之間。由于基礎(chǔ)飼糧添加了酪蛋白，因此測得磷的表觀消化率并非豆粕中磷的表觀消化率，而是飼糧總磷(來源于酪蛋白和豆粕)的表觀消化率。酪蛋白中磷的消化率顯著高于豆粕，提高飼糧豆粕水平降低了酪蛋白與豆粕的比例，從而降低了可消化磷與總磷的比例，最終導(dǎo)致磷的表觀消化率隨豆粕水平提高呈線性降低。

3.3 線性回歸法和差量法測定豆粕中磷真消化率的比較

線性回歸法和差量法能否用于準(zhǔn)確評定待測飼料原料中磷真消化率的關(guān)鍵在于其理論假設(shè)是否成立。使用線性回歸法測定磷真消化率的理論假設(shè)為:動物總磷攝入量與食糜或糞中磷的排泄量呈線性相關(guān)，且飼料原料中磷的消化率和動物內(nèi)源磷排泄量在一定范圍內(nèi)不受飼糧磷水平的影響。將動物可消化磷與總磷攝入量做回歸分析后得出的斜率即為磷的真消化率，當(dāng)外推動物總磷攝入量為零時測得磷的排泄量(回歸方程的截距)即為動物內(nèi)源磷損失。使用差量法測定磷真消化率時首先需要給動物飼喂含有不同磷水平的飼糧，而真消化率由采食不同磷水平飼糧的動物所測得可消化磷之差除以總磷攝入量之差得出。使用差量法測定磷真消化率的理論假設(shè)與線性回歸法基本一致，因此通過上述2種方法測得磷真消化率的結(jié)果在理論上可以相互印證。本試驗通過添加30.00%、43.00% 和 56.00% 的豆粕增加了肉雞的總磷攝入量，一方面滿足了肉雞的氨基酸需要量，另一方面保證了不同處理之間總磷攝入量的差異滿足線性回歸法和差量法測定磷真消化率的需要。使用線性回歸法和差量法測定磷真消化率時，雖然通過梯度增加待測飼料原料水平提高飼糧磷水平時會導(dǎo)致飼糧粗蛋白質(zhì)和氨基酸水平發(fā)現(xiàn)顯著改變，但 Varley等［17］研究指出，飼糧粗蛋白質(zhì)水平對磷消化率測定無顯著影響。本試驗中，通過線性回歸法和差量法測得豆粕中磷的真消化率在飼糧鈣磷比1.0時為53.36%和55.59%、在飼糧鈣磷比 1.5時為 56.81%和 56.36%、在飼糧鈣磷比 2.0時為 40.79%和 39.84%。由此可見，當(dāng)鈣磷比一致時，由線性回歸法和差量法測得磷的真消化率之間無顯著差異，這與前期研究結(jié)果一致［10］。此外，將肉雞飼糧鈣磷比由1.0和1.5提高到2.0時，所測得豆粕中磷的真消化率由53.36% ～56.81%顯著降低到 39.84%。Liu等［9］研究表明，肉雞飼糧鈣磷比為0.8時測得回腸末端豆粕中磷的真消化率為70.8%，顯著高于鈣磷比在1.2、1.6和2.0時測得磷的真消化率55.3%、45.8%和50.6%。本試驗測得豆粕中磷的真消化率普遍低于 Liu等［9］和劉靜波等［14］的研究結(jié)果，導(dǎo)致上述差異的主要原因可能在于本試驗選用豆粕的植酸磷含量顯著高于Liu等［9］和劉靜波等［14］研究中所選用豆粕的植酸磷含量，從而降低了豆粕中磷的真消化率。對比前期研究和本研究結(jié)果可以看出，肉雞飼糧鈣磷比顯著影響待測飼料原料中磷真消化率的評定。因此，為合理使用消化代謝試驗測得磷真消化率的結(jié)果用于商品飼料的配制，動物消化代謝試驗使用的試驗飼糧應(yīng)保持與商品飼料具有相同的飼糧鈣磷比。

4 結(jié)論

①提高肉雞飼糧鈣磷比導(dǎo)致豆粕中磷真消化率的測定值偏低。

②豆粕中磷真消化率的測定值不受真消化率計算方法(線性回歸法和差量法)的影響。

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