祛疣方坐浴對(duì)尖銳濕疣皮損T細(xì)胞亞群影響觀察

張艷峰1,樊磊強(qiáng)1,趙江波2,劉智君1

(1.河北省承德市中心醫(yī)院，河北承德067000

2.承德護(hù)理職業(yè)學(xué)院，河北承德067000)

摘要：目的：通過(guò)了解尖銳濕疣患者局部皮損T細(xì)胞亞群的變化，以探討祛疣方對(duì)CA患者局部治療作用。方法：采用免疫組化染色方法，對(duì)38例CA患者局部皮損進(jìn)行CD4+/CD8+淋巴細(xì)胞染色，高倍顯微鏡下觀察陽(yáng)性細(xì)胞的數(shù)目。結(jié)果：CA患者局部皮損治療前與正常人群相比，CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞升高，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。治療后皮損處CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞較治療前降低，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。結(jié)論：祛疣方外洗對(duì)CA對(duì)患者局部T淋巴細(xì)胞具有抑制作用。

關(guān)鍵詞：尖銳濕疣；T細(xì)胞亞群；免疫組化

文章編號(hào)：1006-6223(2015)12-2059-02

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B

尖銳濕疣(condyloma acuminatum, CA)是一種常見(jiàn)的性傳播疾病，發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)，目前臨床根據(jù)患者不同情況選擇不同的治療手段，但復(fù)發(fā)率一直比較高，對(duì)患者的心身健康造成嚴(yán)重影響。研究發(fā)現(xiàn)，機(jī)體細(xì)胞免疫功能下降可能是HPV的感染和發(fā)病的重要因素之一[1~3]，然而，目前罕有中藥局部治療對(duì)皮損處皮膚免疫功能的影響的研究。本研究通過(guò)檢測(cè)CA患者治療前后的皮損T淋巴細(xì)胞亞群，以明確CA患者局部皮膚細(xì)胞免疫功能的變化，并探索出一種有效的治療CA的辦法。

1資料與方法

1.1臨床資料:38例CA患者均為2013年1月至2014年1月我院皮膚科門診患者，所有患者均符合2000年衛(wèi)生部防疫司制訂的CA診斷標(biāo)準(zhǔn)。18例為初發(fā)性CA，其中男性8例，女性10例，年齡在17~52歲，平均為32.16歲，病程1周~8個(gè)月，平均1.5個(gè)月；20例為復(fù)發(fā)性CA，其中男性12例，女性8例，年齡20~50歲，平均33.45歲，病程2周~1.5年，平均4.5個(gè)月。20名對(duì)照來(lái)自包皮環(huán)切術(shù)的正常皮膚，用于皮損T淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)。

1.2免疫組化法檢測(cè)皮損T淋巴細(xì)胞亞群:選取CA患者皮損組織及正常對(duì)照包皮組織，用10%甲醛溶液固定，制成蠟塊，4tim切片后平鋪于經(jīng)多聚賴氨酸處理過(guò)的載玻片上，嚴(yán)格依照S-P免疫組化試劑盒的說(shuō)明書對(duì)CD4和CD8細(xì)胞進(jìn)行染色。以正常人淋巴結(jié)組織為陽(yáng)性對(duì)照，以PBS代替一抗作為陰性對(duì)照。判定結(jié)果以真皮層細(xì)胞膜呈現(xiàn)棕黃色著色的淋巴細(xì)胞為陽(yáng)性細(xì)胞，于高倍鏡下(×400)隨機(jī)觀察5個(gè)視野，計(jì)數(shù)陽(yáng)性細(xì)胞。

1.3操作步驟:治療組患者局部皮損處皮膚常規(guī)消毒，用5%利多卡因注射液進(jìn)行局部浸潤(rùn)麻醉，切取局部皮損，應(yīng)用上述免疫組化法檢測(cè)皮損處T淋巴細(xì)胞亞群。用CO2激光治療儀除去可見(jiàn)疣體后，用自擬祛疣方藥液進(jìn)行坐浴治療。該方劑由板藍(lán)根、土茯苓、紫草、木賊、香附、萆薢、苦參組成。每種藥各30g，加水至600mL，以文火煎20min，倒出藥液，再同法煎20min取液，兩液合一。藥液溫度以熱感舒適為宜，坐浴，每次30~40min，2次/d，1付/d，每個(gè)療程14d；4~8個(gè)療程后停藥，停藥6個(gè)月后于原皮損處提取皮膚組織再次進(jìn)行T細(xì)胞亞群檢測(cè)。

2結(jié)果

CA患者治療前后皮損處CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞均高于對(duì)照組，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；CA患者治療后皮損處CD4+、CD8+T細(xì)胞較治療前下降，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，見(jiàn)表1。

表1　CA患者治療前后皮損T淋巴細(xì)胞亞群的檢測(cè)結(jié)果

t▲、P▲、t△、P△：治療組治療前后與對(duì)照組相比較；t◇、P◇：治療組治療前后相比較

3討論

尖銳濕疣治療難點(diǎn)在于解決復(fù)發(fā)的問(wèn)題。其復(fù)發(fā)的主要原因沒(méi)有解決亞臨床感染和潛伏感染。當(dāng)然也與機(jī)體的細(xì)胞免疫功能低下密切相關(guān)。 目前研究表明，HPV的激活和消退以及治療效果很大程度上取決于患者的免疫功能，尤其是患者的細(xì)胞免疫功能，HPV能夠逃避機(jī)體的免疫監(jiān)視，而這正是尖銳濕疣高復(fù)發(fā)率的重要原因。 Coleman等認(rèn)為，皮膚局部感染HPV后，感染部位皮膚的表皮與真皮中會(huì)出現(xiàn)大量細(xì)胞浸潤(rùn)，浸潤(rùn)細(xì)胞以淋巴細(xì)胞為主。Morelli等發(fā)現(xiàn)CA皮損組織中有中、重度T細(xì)胞為主的單核細(xì)胞浸潤(rùn)。本研究通過(guò)檢測(cè)38例患者局部皮損，發(fā)現(xiàn)CD4+、CD8+T細(xì)胞在表皮及真皮中均有增高，且以CD8+T細(xì)胞增高更顯著，說(shuō)明尖銳濕疣患者皮損局部細(xì)胞免疫受到抑制。 CA患者皮損的T淋巴細(xì)胞亞群數(shù)量變化，提示CA的發(fā)病和復(fù)發(fā)與局部細(xì)胞免疫功能具有相關(guān)性，因此對(duì)CA患者進(jìn)行局部治療，有可能對(duì)其產(chǎn)生積極的作用，其作用甚至強(qiáng)于系統(tǒng)治療。故而增強(qiáng)患者局部的細(xì)胞免疫功能，有可能達(dá)到減少?gòu)?fù)發(fā)的目的。 本研究中，祛疣方治則為“清熱、解毒、除濕”。該方由板藍(lán)根、土茯苓、紫草、香附、木賊、苦參、萆薢組成。板藍(lán)根能清熱解毒，具有抗病毒作用，能抵制尖銳濕疣病毒HPV的復(fù)制，與他藥協(xié)同作用，促進(jìn)尖銳濕疣贅生物疣體的消散；香附與木賊草具有軟堅(jiān)散結(jié)作用。由于CA好發(fā)于會(huì)陰部，溫?zé)岢睗裰?。故加苦參、土茯苓、萆薢清熱利濕，全方藥物相互作用消除疣體，改善局部環(huán)境。本研究中，首選應(yīng)用CO2激光去除疣體，然后進(jìn)行中藥液坐浴，清熱解毒中藥起到抗菌作用，從而達(dá)到去除局部病毒，防止創(chuàng)面感染，加快創(chuàng)口愈合。最重要的可以達(dá)到既祛除原有病灶的病毒，又可以將潛伏病毒一并清除[4,5]，提高治愈率，縮短療程，減少?gòu)?fù)發(fā)，同時(shí)達(dá)到治療和預(yù)防的目的。本試驗(yàn)對(duì)38例尖銳濕疣患者治療前后皮損局部CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞及CD4+/CD8+比值的變化分別進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果顯示，CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞治療前后與正常對(duì)照比較差異性均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。治療組治療前后比較差異性統(tǒng)有計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。提示患者經(jīng)祛疣方局部坐浴后，明顯減少了原有皮損處CD4+及CD8+淋巴細(xì)胞陽(yáng)性率。 祛疣方中各中藥對(duì)細(xì)胞毒性小、抗病毒作用強(qiáng)，可以避免在殺傷病毒的同時(shí)對(duì)正常細(xì)胞的損害。且其不良反應(yīng)輕微，治療無(wú)瘢痕形成及色素沉著，患者易于接受，值得臨床推廣。

參考文獻(xiàn):

[1]蘆桂青,程浩,吳金民,等.尖銳濕疣病損組織粗提蛋白對(duì)樹(shù)突細(xì)胞免疫表型的影響[J].中華皮膚科雜志,2003,36(2):102.

[2]Coleman N,Birley HD,Renton AM,et al. Immunological events in regressing renital warts[J].AM Clin Pathol,1994,102:768~774.

[3]Morelli AE, Sanaes C, Dipaola G, et al. Relationnship between types of human papillomavirus and langerhans cells in verrial condyloma and introepithetial neoplasia[J].Am Clin Pathol,1993,99:200~206.

[4]焦霞.苦參臨床及藥理研究進(jìn)展[J].中藥新藥與臨床藥理,2002,13(3):192.

[5]陶英,韓福生.中西醫(yī)結(jié)合治療尖銳濕疣的臨床實(shí)驗(yàn)觀察[J].遼寧中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2001,3(1):49~50.