譚婭 史開志 王婧 尚以順（貴州省畜牧獸醫(yī)研究所 550005）

豬大腸桿菌病防治的研究進展

譚婭 史開志 王婧 尚以順（貴州省畜牧獸醫(yī)研究所 550005）

大腸桿菌病是危害我國養(yǎng)豬業(yè)的重要疾病之一，為了有效防治豬大腸桿菌病，本文綜述了近年來國內(nèi)外對豬大腸桿菌病防治措施的相關(guān)研究，為防治豬大腸桿菌病提供一些思路。

豬；大腸桿菌；防治進展

產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌（Enterotoxigenic E.coli，ETEC）是引起仔豬腹瀉的主要病原之一。在家畜中，尤以初生幼畜特別易感，并引起生長發(fā)育遲緩，生產(chǎn)能力低下，甚至造成死亡，給畜牧業(yè)造成很大經(jīng)濟損失。初生仔豬和早期斷奶仔豬自身免疫功能的不成熟以及早期斷奶應(yīng)激引起的免疫抑制，是造成仔豬對ETEC敏感性增高、抗病力下降，并引發(fā)ETEC感染性腹瀉的主要因素。本文綜述了目前大腸桿菌防治方法的研究進展，以期為豬大腸桿菌病的防治提供有價值的參考。

1 抗生素防治

目前，大腸桿菌病的防治一直采用藥物防治為主，抗生素具有廣譜的抑菌和殺菌作用。在畜牧業(yè)生產(chǎn)中，抗菌藥物除用于防治疾病外，還可低劑量添加于飼料中作為生長促進劑，促進動物的生長，提高生產(chǎn)性能和飼料利用率，從而產(chǎn)生巨大的經(jīng)濟效益。但同時也應(yīng)該注意到抗生素在抑制致病菌的同時也會抑制腸道益生菌的生長，導(dǎo)致機體胃腸道內(nèi)的微生物菌群失衡，干擾其正常的消化吸收功能，對機體帶來不利影響。隨著抗菌藥物的廣泛應(yīng)用，細(xì)菌中的耐藥菌株數(shù)量也在不斷增加，耐藥性使疾病的治療療程延長、藥物劑量增加，甚至使藥物失效。這樣就致使患病動物用藥期延長、用藥量增加，甚至造成藥物濫用，而藥物的濫用更加快了耐藥性的增強、耐藥譜增廣以及其他細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生，形成了惡性循環(huán)，導(dǎo)致藥物殘留問題越來越嚴(yán)重，不僅嚴(yán)重影響了養(yǎng)殖業(yè)的效益，而更可怕的是動物體內(nèi)的耐藥菌株或高殘留的抗菌素通過動物性食品進入人體，前者給人類疾病的治療造成困難，后者不僅可使人體內(nèi)細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性，而且可引起變態(tài)反應(yīng)與過敏反應(yīng)，或產(chǎn)生致畸作用、致突變作用和致癌作用以及激素（樣）作用等多方面危害[1]。

目前，細(xì)菌耐藥性的問題已非常嚴(yán)重，尤其是大腸桿菌對抗菌藥物的耐藥性問題已在世界范圍內(nèi)引起了重視[2]。有不少報道提出了用藥敏試驗甚至生物篩選來防止抗菌藥物的濫用。這對延緩耐藥性的產(chǎn)生確實有較好的效果，但藥敏試驗并不能解決根本問題，有的大腸桿菌分離株經(jīng)藥敏試驗對20多種常用藥物進行篩選，其結(jié)果竟全為陰性。由此可見，細(xì)菌耐藥性問題已經(jīng)非常嚴(yán)重，應(yīng)引起高度關(guān)注。雖然我國尚允許抗生素作為畜禽飼料的添加劑，但是日益凸顯的肉類食品安全問題卻不容忽視。目前，歐美部分發(fā)達國家已經(jīng)制定相關(guān)規(guī)定，限制抗生素作為飼料添加劑的使用。

2 微生態(tài)制劑

微生態(tài)制劑是隨著人們對抗生素缺點的逐步認(rèn)識而迅速開發(fā)出的一種抗生素替代物，是指由多種有益微生物及其代謝物構(gòu)成，可以直接飼喂動物的活菌制劑，具有無副作用、無殘留污染、不產(chǎn)生抗藥性等特點，具有預(yù)防治療疾病、促進畜禽生長等多種有益功能。研究應(yīng)用較多的微生態(tài)制劑有乳酸菌制劑（嗜酸乳桿菌、雙歧乳桿菌、糞鏈球菌等）、芽孢桿菌制劑（枯草桿菌、蠟樣桿菌、地衣桿菌等）、真菌、活酵母制劑、光合細(xì)菌及復(fù)合微生態(tài)制劑。

豬大腸桿菌病主要是由于致病性大腸桿菌在腸道內(nèi)大量繁殖造成菌群失調(diào)，破壞了正常的腸道內(nèi)微生態(tài)環(huán)境而引起的，包括仔豬黃痢、仔豬白痢和仔豬水腫病3種，臨床上以發(fā)生腸炎、腸毒血癥為特征。微生態(tài)制劑能改變腸道菌群的平衡，同時又可產(chǎn)生有機酸，降低胃內(nèi)pH值，對仔豬的保護率可達到80%以上。一般可在仔豬出生后抹嘴或灌服微生態(tài)制劑，從而使益生菌在消化道內(nèi)大量繁殖，占據(jù)腸道黏膜上皮絨毛細(xì)胞上特異性受體，并調(diào)節(jié)腸道菌群平衡，抑制腸道病原菌生長，從而達到防治新生仔豬大腸桿菌病的目的。據(jù)劉勇等[3]報道利用微生態(tài)制劑治療仔豬黃白痢的效果觀察，對仔豬下痢的預(yù)防和治療都有很好的效果。張國龍等[4]研究報道，在35日齡斷奶仔豬日糧中添加0.2～0.4%的微生態(tài)活菌制劑，可使糞中大腸桿菌總數(shù)明顯降低。將微生態(tài)制劑作為飼料添加劑加入飼料中，盡管開發(fā)了一些有價值的產(chǎn)品，但在應(yīng)用方面存在較大困難，如活菌制劑穩(wěn)定試較差，易在飼料生產(chǎn)工藝中被破壞；產(chǎn)品種類單一，應(yīng)用范圍有限；效果不穩(wěn)定等。由于微生態(tài)結(jié)構(gòu)極其復(fù)雜，試圖用一兩種微生態(tài)制劑來解決十幾種抗生素尚不能解決的問題在目前來看是不可行的。

3 中草藥防治

開發(fā)中草藥產(chǎn)品來預(yù)防和治療畜禽疾病是近年來研究的熱門。據(jù)報道，中草藥對致病性大腸桿菌具有一定的抑制作用。路振香等[5]選用27種中草藥制劑進行大腸桿菌的體外抑菌試驗。結(jié)果表明，有14種中藥對此株大腸桿菌有不同程度的抑制作用。試驗還表明，中藥制劑的配方工藝不同，其抑菌的效果亦有不同。王自然[6]采用中藥茜草秧、苦參等13味中藥組方對人工感染仔豬大腸桿菌引起的腹瀉及自然發(fā)病的仔豬進行了治療試驗，結(jié)果治愈率達90%以上，有效率達100%。同時探討了中藥組方對仔豬大腸桿菌耐藥菌株和非耐藥菌株所致腹瀉癥的治療效果。馬玉芳等[5]選擇了幾種中草藥，配制成名為“白痢散”的制劑，并進行了體外抑菌試驗、預(yù)防試驗和治療試驗。試驗結(jié)果表明，“白痢散”在平板對分離的致病性大腸桿菌的平均抑菌圈直徑為12.5mm；預(yù)防試驗中兩個處理組分別獲得90.0%和81.3%的保護率，效果顯著。胡松華等[7]進行了公英瀉痢殺對仔豬腹瀉的臨床治療試驗及體外抑菌試驗。臨床試驗結(jié)果表明，公英瀉痢殺和痢菌凈對哺乳仔豬腹瀉的臨床治愈率分別為100%和81.25%，兩者差異顯著。由此可見，中藥對致病性大腸桿菌具有一定的抑制效果，可作為防治豬大腸桿菌病的一種理想藥物；使用中草藥對豬場也有明顯的經(jīng)濟收益，但要考慮適口性，中草藥大多味苦，對豬的采食量有一定的影響。

4 大腸桿菌疫苗開發(fā)

目前我國利用重組DNA技術(shù)生產(chǎn)的豬大腸桿菌疫苗主要有兩類：三價全價滅活苗（K88、K99、987P）和二價基因工程苗（K88、K99），均取得了一定的預(yù)防效果。由于病原性大腸桿菌的血清型越來越多，因此上述疫苗的免疫保護面過窄，不能達到令人滿意的效果。大腸桿菌自家苗是將從本場分離得到的優(yōu)勢致病大腸桿菌菌株，利用免疫學(xué)原理生產(chǎn)出的滅活佐劑苗，用于預(yù)防正在本場發(fā)生的豬大腸桿菌病[7,8]。用大腸桿菌自家苗預(yù)防豬大腸桿菌病有如下優(yōu)點：針對性強，因為這是用本場發(fā)病菌株制備的疫苗，所以制苗菌株與發(fā)病菌株的血清型和抗原性高度一致。因而可以克服由標(biāo)準(zhǔn)菌株制備的疫苗所存在的免疫保護面過窄的弱點，安全性好。由于大腸桿菌自家苗為滅活苗，其中的病原微生物已經(jīng)完全、徹底滅活，所以不存在散毒的危險。

此外，大腸桿菌自家苗與抗菌素有協(xié)同作用，其協(xié)同作用主要有兩方面。一是接種疫苗后，如仍有少數(shù)豬發(fā)病，這時用抗菌藥物治療，治療效果較未接種的發(fā)病豬的治療效果要好；二是對發(fā)病豬可同時接種疫苗和用抗均藥物治療，治療效果比單獨用抗菌藥物治療的治療效果要好[9]。

5 卵黃抗體防治

近年來，雞卵黃抗體因其化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定、特異性抗體含量高、安全性好、易規(guī)模化生產(chǎn)等特點越來越受到人們的關(guān)注。目前，卵黃抗體在防治新生仔豬大腸桿菌性腹瀉中得到了很好的開發(fā)和應(yīng)用[9]。卵黃抗體與哺乳動物初乳中的抗體一樣，都是由母體產(chǎn)生，通過特殊機制從血液中轉(zhuǎn)運而來。用特異的抗原物質(zhì)多次免疫產(chǎn)蛋禽后，所產(chǎn)雞蛋的卵黃中特異抗體的含量會顯著增加。用生物化學(xué)技術(shù)從這些卵黃中可以提取到高效價的特異卵黃抗體，這些抗體通過口服或者注射到動物體內(nèi)后能被快速吸收入血，發(fā)揮殺滅病毒、細(xì)菌和中和毒素等作用。

根據(jù)抗原的制備方式，預(yù)防仔豬大腸桿菌性腹瀉卵黃抗體的生產(chǎn)方式可以分為兩類：一類是直接用ETEC的菌體免疫原，而另一類則是將經(jīng)分離純化后的菌毛蛋白作為免疫原。王建明等[10]用ETECK88、K99、987P、F41標(biāo)準(zhǔn)菌株制成的滅活油佐劑作為免疫原，待產(chǎn)蛋雞免疫后收集高免卵黃，然后提取、純化，精制成雞抗豬大腸桿菌特異性高免卵黃抗體并用于臨床。結(jié)果表明，該制劑安全性好，每頭仔豬注射或口服3～5ml劑量，能有效預(yù)防仔豬大腸桿菌性腹瀉。而徐福洲等[11]作了相同的試驗，結(jié)果顯示治療仔豬腹瀉狀況明顯減輕，與對照組相比有顯著差異；治療組未出現(xiàn)死亡，而對照組仔豬有35～70%的死亡率。結(jié)果表明，卵黃抗體治療由ETEC所致的仔豬腹瀉具有明顯的效果。在選擇試驗菌株時，大部分人選用標(biāo)準(zhǔn)菌株，也有一些研究者選用地方株。高云英等[12]應(yīng)用仔豬大腸桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株和地方分離菌株混合免疫商品蛋雞，收獲高免蛋制備多價卵黃抗體。經(jīng)預(yù)防、攻毒試驗及臨床治療效果觀察，對仔豬免疫保護率可達95%以上，攻毒保護率90%以上，臨床治愈率80%以上。因此，卵黃抗體作為一種高效的生物防治制劑已經(jīng)被廣泛應(yīng)用卵黃抗體作為一類高效特異性生物制劑在防治仔豬腹瀉中顯示出明顯的效果，為該病的防治開辟了新的途徑。

上面介紹的5種方法各具優(yōu)缺點，只通過其中一種方法達到對大腸桿菌的防治很難實現(xiàn)。因此，在實際生產(chǎn)中常常將幾種方法聯(lián)合起來使用或交替使用，雖然能暫時控制豬大腸桿菌病，但病情易反復(fù)，防治成本也比較高。這就需要研究出新的、簡便易行、成本低廉的方法。雖然研究出有別于上述方法的全新方法比較困難，但可以將上述方法進行優(yōu)化組合來形成新的方法。比如，可以將益生菌和中藥結(jié)合，研制新的保健制劑；也可以將抗生素與抗豬大腸桿菌的抗體相結(jié)合構(gòu)建針對豬大腸桿菌的靶向制劑，為豬大腸桿菌病的防治提供了新的思路。

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