張利娜 朱紹龍 姜春林 賈琳琳 金紹興

（煙臺(tái)市園林管理處南山公園，山東煙臺(tái) 264000）

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圈養(yǎng)馬來(lái)熊發(fā)情檢測(cè)方法

張利娜 朱紹龍 姜春林 賈琳琳 金紹興

（煙臺(tái)市園林管理處南山公園，山東煙臺(tái) 264000）

馬來(lái)熊（Helarctos malayanus）又稱小狗熊、太陽(yáng)熊，是熊科動(dòng)物中體型最小的一種。主要分布在東南亞和南亞一帶，我國(guó)的云南綠春和西藏芒康有少量分布。馬來(lái)熊的野外種群少且正在不斷下降，已被列入CITES附錄I和IUCN紅皮書的瀕危級(jí)，現(xiàn)為我國(guó)I級(jí)重點(diǎn)保護(hù)野生動(dòng)物。

現(xiàn)今國(guó)內(nèi)外對(duì)馬來(lái)熊已有一定的研究，多為圈養(yǎng)條件下食性、營(yíng)養(yǎng)、繁殖、遺傳多樣性等。在繁殖方面，人們對(duì)野生馬來(lái)熊的了解十分稀少。它們可能沒有固定的交配季節(jié)，因?yàn)橐荒甑筋^都可能有熊寶寶降生，我國(guó)馬來(lái)熊的野外種群數(shù)量稀少，野外行為觀察及相關(guān)研究工作很難展開，目前對(duì)圈養(yǎng)馬來(lái)熊發(fā)情行為與生理指標(biāo)的研究也很少，在北方地區(qū)這樣的研究更少。在動(dòng)物界里存在著這樣一種現(xiàn)象：動(dòng)物只有在某些特定的時(shí)期里才能產(chǎn)生性要求，從而進(jìn)行交配。這些特定的時(shí)期就被叫作發(fā)情期。發(fā)情鑒定是動(dòng)物繁殖工作中重要技術(shù)之一，可以判斷雌性動(dòng)物是否發(fā)情和發(fā)情程度，以便確定配種時(shí)期，提高受胎率；可以及時(shí)發(fā)現(xiàn)問題、解決問題。

國(guó)內(nèi)動(dòng)物園馬來(lái)熊繁殖情況不容樂觀，加之動(dòng)物園內(nèi)圈養(yǎng)馬來(lái)熊數(shù)量極少、馬來(lái)熊又為刺激排卵，其受孕率低，即使受孕了其幼崽的成活率極低，因此導(dǎo)致其繁殖數(shù)量幾乎為零，為了提高圈養(yǎng)馬來(lái)熊的繁育力，擴(kuò)大圈養(yǎng)馬來(lái)熊的種群數(shù)量，提前知道圈養(yǎng)馬來(lái)熊是否發(fā)情十分重要，這就要建立一套行之有效的檢測(cè)方法，現(xiàn)作如下總結(jié)：

雌性動(dòng)物發(fā)情有外部變化，也有內(nèi)部變化，發(fā)情鑒定主要是通過內(nèi)部變化特點(diǎn)判斷其本質(zhì)，即卵巢上有無(wú)卵泡發(fā)育和卵子排出。常用的發(fā)情鑒定方法有：

1　外部觀察法

每天清晨對(duì)圈養(yǎng)的馬來(lái)熊進(jìn)行觀察，雌性馬來(lái)熊發(fā)情表現(xiàn)為煩躁不安，食欲減退，外陰紅腫。

2　試情法

發(fā)情期在雌性馬來(lái)熊圈中放人1 只雄性馬來(lái)熊，發(fā)情的雌熊表現(xiàn)出愿意接近雄熊，弓腰舉尾，后肢張開，趴在地下，有求偶動(dòng)作等；沒有發(fā)情的雌熊不愿意接近雄熊，沒有求偶的動(dòng)作，反而攻擊試圖爬跨的雄熊。

3　陰道檢查法

這種方法是應(yīng)用陰道開張器插入母熊陰道，這就要對(duì)被檢動(dòng)物進(jìn)行保定，為了最大限度保護(hù)動(dòng)物，使其免受傷害，也為了保證工作人員的人身安全，我們采用自制致小籠將馬來(lái)熊進(jìn)行保定，將其限定在狹小的空間內(nèi)，觀察其陰道黏膜的色澤和充血程度，子宮頸的弛緩狀態(tài)，子宮頸外口開口的大小和黏液的顏色、分泌量及黏稠度等，以判斷母熊的發(fā)情程度。一般母熊的陰道黏膜充血腫脹，顏色鮮紅、子宮頸松弛、子宮頸口張開，陰道內(nèi)黏液呈現(xiàn)白色、分泌量大及黏稠即可斷定母熊到了發(fā)情期。

4　生殖激素檢測(cè)法

我們對(duì)圈養(yǎng)馬來(lái)熊進(jìn)行人工訓(xùn)練，使其形成條件反射，主動(dòng)配合人工采血。生殖激素檢測(cè)法是應(yīng)用激素測(cè)定技術(shù)（放射免疫測(cè)定法、酶免疫測(cè)定法等），通過對(duì)母熊體液（血漿、血清、尿液籌）中生殖激素（孕激素、促卵泡素、促黃體素、雌激素）水平的檢測(cè)，并依據(jù)發(fā)情周期中生殖激素的變化規(guī)律，來(lái)判斷母犬的發(fā)情程度。該方法可精確測(cè)出體液中激素的含量，如母熊排卵前黃體酮分泌速度急劇增加。

5　陰道上皮細(xì)胞涂片法

此方法的動(dòng)物保定同陰道檢測(cè)法動(dòng)物保定。母熊的陰道上皮細(xì)胞隨著發(fā)情周期而呈現(xiàn)規(guī)律性的變化。陰道上皮細(xì)胞可分為基底細(xì)胞、中層細(xì)胞和表層細(xì)胞三類，是從深層幼小細(xì)胞向表層發(fā)展而逐漸成熟的?；准?xì)胞呈圓形或橢圓形，核內(nèi)顆粒明顯；中層細(xì)胞呈多角形，并且核內(nèi)有顆粒。表層細(xì)胞是角質(zhì)化的細(xì)胞，是細(xì)胞體積膨大，核內(nèi)顆粒濃縮以至消失，最后形成無(wú)核的表層細(xì)胞。有核細(xì)胞只在發(fā)情周期后期維持在高水平，發(fā)情前期和發(fā)情期數(shù)量少。角質(zhì)化細(xì)胞則在發(fā)情前期和發(fā)情期出現(xiàn)較多。發(fā)情前期能觀察到紅血細(xì)胞、角質(zhì)化上皮細(xì)胞和少量的白細(xì)胞及有核上皮細(xì)胞。發(fā)情期主要是紅血細(xì)胞和角質(zhì)化細(xì)胞。發(fā)情后期主要是白血細(xì)胞和有核上皮細(xì)胞，也有少數(shù)角質(zhì)化細(xì)胞。休情期含有白血細(xì)胞及有核上皮細(xì)胞，此外還有少數(shù)均質(zhì)化細(xì)胞的出現(xiàn)。因此，在發(fā)情周期里進(jìn)行陰道黏液中的細(xì)胞學(xué)檢查，可以做出發(fā)情周期的分期，預(yù)測(cè)排卵時(shí)間及適宜的配種時(shí)間。方法是將藥棉簽蘸取少許生理鹽水，插入母熊陰道輕輕捻動(dòng)，將取得的黏液涂抹在載玻片上制成抹片，待自然干燥后，用染色液染色，置顯微鏡下檢查即可。

我們對(duì)圈養(yǎng)馬來(lái)熊做好的發(fā)情鑒定工作，就可以根據(jù)其發(fā)情時(shí)間采取相應(yīng)的措施。如檢測(cè)發(fā)情可選擇合適公熊讓其適時(shí)配種，為了節(jié)約資源，減少近親繁殖，我們還可與別園圈養(yǎng)馬來(lái)熊進(jìn)行聯(lián)合繁殖，這樣既可以擴(kuò)大圈養(yǎng)馬來(lái)熊種群數(shù)量，以及提高圈養(yǎng)馬來(lái)熊的種群質(zhì)量。

參考文獻(xiàn)

［1］ 馮慶，王應(yīng)祥.人工飼養(yǎng)條件下馬來(lái)熊（Helarctos malayanus）生長(zhǎng)發(fā)育和行為特點(diǎn)的初步研究［J］.獸類學(xué)報(bào)，1991，（2）：81-86.

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