馬麗麗

骨髓增殖性腫瘤患者JAK2、MPL及CALR基因突變位點分析及臨床觀察

馬麗麗

目的 探討骨髓增殖性腫瘤患者JAK2及MPL及CALR基因突變的位點，及患者的臨床特點。方法 選取我院2014年2月～2015年5月收治的骨髓增殖性腫瘤患者100例，通過測序法測定患者CALR基因突變，通過AS-PCR法檢測患者骨髓中JAK2及MPL基因突變。結(jié)果 所有患者M(jìn)PL基因突變陰性；PV患者JAK2基因突變發(fā)生率91.9%，CALR基因突變陰性；ET患者JAK2基因突變發(fā)生率41.2%，CALR基因突變發(fā)生率為32.4%；PMF患者JAK2基因突變發(fā)生率為44.8%，CALR基因突變發(fā)生率為31.0%。結(jié)論 骨髓增殖性腫瘤患者發(fā)生CALR基因突變的患者與發(fā)生JAK2、MPL基因突變的患者比較，更有可能獲得較好的預(yù)后效果。

骨髓增殖性腫瘤；基因突變；位點；臨床分析

骨髓增殖性腫瘤是源于多功能造血干細(xì)胞的惡性骨髓增殖性疾病，患者經(jīng)常發(fā)生血管病變事件，纖維組織增生、栓塞出血及髓外造血，發(fā)展方向是白血病[1-3]。本文主要通過對骨髓增殖性腫瘤JAK2、MPL及CALR基因突變的研究，了解患者JAK2、MPL及CALR基因突變與患者臨床癥狀及預(yù)后效果的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2014年2月～2015年5月確診為骨髓增殖性腫瘤的患者100例，其中真性紅細(xì)胞增多癥患者37例，原發(fā)性血小板增多癥患者34例，原發(fā)性骨髓纖維化患者29例；參與調(diào)查的患者中男53例，女47例；患者年齡18～72歲，平均年齡為（44±12）歲?；颊甙凑諛?biāo)準(zhǔn)進(jìn)行診斷和分類。參與調(diào)查的所有患者均被告知，并簽署同意協(xié)議。

1.2 方法

將100例骨髓增殖性腫瘤患者的初期血常規(guī)檢查結(jié)果進(jìn)行匯總。并對參與研究的患者進(jìn)行隨訪，隨訪時間10個月以上。真性紅細(xì)胞增多癥患者通過DNA提取試劑盒提取骨髓細(xì)胞基因組DNA，CALR9號外顯子PCR擴(kuò)增引物。將擴(kuò)增引物進(jìn)行提純、分析，分析結(jié)果顯示，358以外的片段顯示條帶時，代表CALR突變陽性。應(yīng)用等位基因特異性-聚合酶鏈反應(yīng)（AS-PCR）及序列測定方法，檢測患者骨髓及外周血單個核細(xì)胞JAK2V617F及MPLW515L/K點突變情況并進(jìn)行分析。

2 結(jié)果

2.1 患者的臨床特征及實驗室檢測結(jié)果

對真性紅細(xì)胞增多癥患者37例，原發(fā)性血小板增多癥患者34例，原發(fā)性骨髓纖維化患者29例均采取規(guī)范化的治療，并定期對上述患者做隨訪，最后一次隨訪顯示，所有患者無死亡和失訪。檢驗CALR基因突變結(jié)果為陽性的患者中有10例患者為原發(fā)性血小板增多癥患者，與JAK2患者相比，血小板計數(shù)更高。檢驗CALR基因突變結(jié)果為陽性的患者中有12例為原發(fā)性骨髓纖維化患者，無論是白細(xì)胞計數(shù)水平，還是血紅蛋白的檢查結(jié)果均呈現(xiàn)較低的水平。

2.2 JAK2、MPL及CALR基因突變

真性紅細(xì)胞增多癥患者共37例，未見CALR基因突變發(fā)生，其中有34例患者的JAK2基因檢測中發(fā)現(xiàn)JAK2V617F出現(xiàn)基因突變，突變發(fā)生率為91.9%；原發(fā)性血小板增多癥患者共34例，其中有14例患者的JAK2基因檢測中發(fā)現(xiàn)JAK2V617F出現(xiàn)基因突變，突變發(fā)生率為41.2%，CALR基因突變的患者共有11例，發(fā)生率為32.4%，原發(fā)性血小板增多癥患者中有20例患者JAK2基因突變顯示陰性，其中有9例患者CALR基因發(fā)生突變，CALR基因的突變發(fā)生率為45.0%；原發(fā)性骨髓纖維化患者共29例，其中有13例患者的JAK2基因檢測中發(fā)現(xiàn)JAK2V617F出現(xiàn)基因突變，發(fā)生率為44.8%，CALR基因突變的患者共有9例，發(fā)生率為31.0%，原發(fā)性骨髓纖維化患者中有16例患者JAK2基因突變顯示陰性，其中有10例患者CALR基因發(fā)生突變，CALR基因的突變發(fā)生率為62.5%。參與此項調(diào)查的所有患者均未見MPL基因發(fā)生突變。

3 討論

對于骨髓增殖性腫瘤的治療，近年來，臨床多采用JAK2基因突變點為靶點進(jìn)行治療[4]，不僅如此，JAK2基因?qū)τ诠撬柙鲋承阅[瘤的診斷和預(yù)后等方面也都有很大作用[5-7]，但是，作用機(jī)理目前還不明確。

本研究顯示，所有患者M(jìn)PL基因突變陰性；PV患者JAK2基因突變發(fā)生率91.9%，CALR基因突變陰性；ET患者JAK2基因突變發(fā)生率41.2%，CALR基因突變發(fā)生率為32.4%；PMF患者JAK2基因突變發(fā)生率為44.8%，CALR基因突變發(fā)生率為31.0%。從研究數(shù)據(jù)顯示，CALR基因突變與JAK2基因突變相比較，對于原發(fā)性骨髓纖維化患者，血小板計數(shù)更高，血紅蛋白和白細(xì)胞都偏低，出現(xiàn)血栓的概率低，同時也提示患者預(yù)后更好，具有較高的患者生存率。

有研究顯示，骨髓增殖性腫瘤患者的JAK2、MPL及CALR基因突變并不會同時出現(xiàn)[8]，本項研究中也未見兩種及以上基因突變共同出現(xiàn)。

[1] 邱荃，王茫桔，朱平. 骨髓增殖性腫瘤分子發(fā)病機(jī)制及治療研究進(jìn)展[J]. 白血病·淋巴瘤，2015，24（7）：400-404.

[2] 肖志堅. 骨髓增殖性腫瘤患者的基因突變檢測：已進(jìn)入臨床時代?[J]. 白血病·淋巴瘤，2015，24（7）：388-391.

[3] 董瑩，朱華鋒，侯莉萍，等. 骨髓增殖性腫瘤120例JAK2 V617F基因突變的臨床分析[J]. 白血病·淋巴瘤，2015，24（7）：433-436.

[4] 董露，申徐良，魏武. CALR基因突變與JAK2/MPL突變陰性的骨髓增殖性腫瘤的關(guān)系[J]. 中國實驗血液學(xué)雜志，2015，23（5）：1532-1534.

[5] 賈曉陽，王光平. JAK2V617F基因突變在骨髓增殖性腫瘤診斷中的應(yīng)用[J]. 中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2015，25（26）：46-49.

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[7] 林鳳茹，王艷，張敬宇. JAK2 V617F基因突變陽性骨髓增殖性腫瘤治療研究進(jìn)展[J]. 白血病·淋巴瘤，2015，24（7）：392-393.

[8] 李晨瑩，金潔. 骨髓增殖性腫瘤基因突變的研究進(jìn)展[J]. 中華血液學(xué)雜志，2014，35（12）：1127-1130.

Analysis and Clinical Observation of JAK2, MPL and CALR Gene Mutations in Patients With Bone Marrow Proliferation

MA Lili Department of Hematology, The Hospital of Chifeng City, Chifeng Inner Mongolia 024000, China

Objective To study the patients with tumor in bone marrow hyperplastic JAK2 and MPL and CALR gene mutation sites, and the clinical characteristics of patients. Methods 100 cases of bone marrow cancer patients treated in our hospital from February 2014 to May 2015 were selected. The mutation of CALR gene was determined by sequencing method. Detection of JAK2 and MPL gene mutations in bone marrow of patients by AS-PCR. Results All patients MPL gene mutation negative. PV JAK2 gene mutation rate was 91.9%, CALR gene mutation negative. ET JAK2 gene mutation rate was 41.2%, CALR gene mutation rate was 32.4%. Patients with PMF JAK2 gene mutation rate was 44.8%, CALR gene mutation rate was 31.0%. Conclusion Bone marrow in patients with hyperplastic tumor CALR gene mutations in patients with JAK2, MPL gene mutation of patients were compared, and are more likely to achieve good prognosis

Marrow hyperplastic tumor, Gene mutation, Site, Clinical analysis

R733.3

A

1674-9308（2016）32-0104-02

10.3969/j.issn.1674-9308.2016.32.058

內(nèi)蒙古赤峰市醫(yī)院血液內(nèi)科，內(nèi)蒙古 赤峰 024000