尚月軍

（青海省鄉(xiāng)鎮(zhèn)企業(yè)技術(shù)推廣站，青海 西寧 810008）

豬藍(lán)耳病的癥狀及ELISA診斷

尚月軍

（青海省鄉(xiāng)鎮(zhèn)企業(yè)技術(shù)推廣站，青海 西寧 810008）

豬藍(lán)耳病，即豬繁殖與呼吸綜合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS），是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）感染所致，傳播方式為接觸傳染，對我國乃至全球養(yǎng)豬業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。自1987年首次在美國發(fā)現(xiàn)至今，僅在美國每年造成的直接經(jīng)濟(jì)損失估計(jì)可達(dá)6.64億美元。我國1996年首次出現(xiàn)PRRS相關(guān)報(bào)道，陸續(xù)也出現(xiàn)大規(guī)模暴發(fā)，并造成較大損失。因此，早期識別病癥盡早診斷并采取措施，是控制藍(lán)耳病發(fā)病，減少損失的有力措施。本文就PRRS臨床癥狀、解剖及病理特征、ELISA檢測方法做一介紹。

1　臨床癥狀

妊娠母豬、仔豬是PRRS高發(fā)群體，其發(fā)病因地域、季節(jié)、群體不同有很大差異。待產(chǎn)母豬主要表現(xiàn)為精神沉郁、食欲減退并伴有發(fā)熱現(xiàn)象，出現(xiàn)輕度呼吸窘迫，妊娠晚期出現(xiàn)早產(chǎn)、流產(chǎn)、死胎等癥狀。仔豬表現(xiàn)為皮膚蒼白或黃疸，繼續(xù)發(fā)展皮膚變?yōu)榍嘧仙?，出現(xiàn)呼吸困難，有時(shí)呈腹式呼吸，體溫升高，食欲減退，消瘦，咳嗽等病癥，其耳朵為藍(lán)紫色，疾病持續(xù)發(fā)展會出現(xiàn)腹瀉，最終死亡。根據(jù)臨床癥狀診斷PRRS指標(biāo)包括：（1）流產(chǎn)、早產(chǎn)率在80%以上；（2）死胎率在20%以上；（3）新生仔豬1周內(nèi)死亡率在25%以上。

2　解剖及病理診斷

PRRSV感染豬群病理學(xué)特征主要為：皮膚發(fā)黃；胸腔、腹腔積水；肺部出現(xiàn)彌漫性間質(zhì)肺炎，伴少量纖維素滲出，觸感硬實(shí)，肺泡間隔增厚，肺泡腔內(nèi)有壞死細(xì)胞碎片；心內(nèi)膜充血，心冠脂肪有浸潤現(xiàn)象；腎臟腫大，有灰白色斑點(diǎn)，部分伴有針尖狀出血點(diǎn)；肝臟出現(xiàn)空泡樣病變；鼻孔、氣管、喉頭等有泡沫；淋巴結(jié)腫大、多汁；腸內(nèi)容物稀薄，有充血現(xiàn)象。

3　ELISA診斷

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）是PRRS的常用免疫學(xué)檢測方法之一，其特異性可高達(dá)99.9%，敏感性可高達(dá)98.8%。目前常用ELISA檢測試劑盒主要原理為將特定的抗原包被于微孔板，加入待測樣本血清，抗原可捕獲血清中抗豬藍(lán)耳病病毒抗體，隨后使用辣根過氧化物酶標(biāo)記的二抗捕獲抗豬藍(lán)耳病病毒抗體，最后顯色鑒定陽性樣本。

用于包被的抗原主要有兩類，分別是核衣殼蛋白（N蛋白）和膜蛋白（GP5、M蛋白）。前者主要用于早期自然或人工感染PRRSV的免疫學(xué)診斷，不適于免疫后已攜帶抗體的豬群；后者可用于疫苗免疫后豬群保護(hù)性抗體的檢測以及仔豬母源抗體檢測。N蛋白在PRRSV中含量高，最高能占到病毒總蛋白的40%。此外其具有多個(gè)抗原表位，免疫原性強(qiáng)，因此試劑盒中選擇N蛋白作為ELISA檢測的包被抗原。病毒感染早期機(jī)體主要針對N蛋白產(chǎn)生免疫應(yīng)答，分泌非中和性抗體。盡管N蛋白抗體產(chǎn)生最早，但其持續(xù)時(shí)間很短，僅有2個(gè)月左右，且與機(jī)體抗病毒感染能力無關(guān)。M蛋白和GP5蛋白誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生抗體時(shí)間較N蛋白晚，M蛋白保守性較高，屬非糖基化蛋白，GP5為囊膜糖蛋白，兩種蛋白均含有主要中和表位，可刺激機(jī)體分泌中和抗體。雖然其出現(xiàn)時(shí)間較N蛋白晚，但維持時(shí)間久，在體內(nèi)可持續(xù)存在4～5個(gè)月，為機(jī)體提供抗病毒能力。因此，在PRRSV檢測中應(yīng)根據(jù)需要選擇適宜的ELISA種類，例如疫情監(jiān)測，早期感染的診斷宜采取N蛋白包被的ELISA檢測試劑盒，而用于疫苗免疫效果及豬群抗體變化情況的檢測宜選用膜蛋白包被的ELISA檢測試劑盒。

ELISA方便、快捷，特異性及敏感度較高，適合定性分析，但其用于定量分析準(zhǔn)確性較差，且受環(huán)境及人工操作影響較大，如飼料、水源等抗體污染也會導(dǎo)致假陽性產(chǎn)生，從而干擾檢測結(jié)果。

4　小　結(jié)

在PRRS疫情來臨時(shí)，控制PRRS的有效方法是早發(fā)現(xiàn)，早隔離，并采取積極的治療手段。因此常規(guī)監(jiān)測、臨床癥狀觀察及疾病診斷是基層獸醫(yī)工作者需掌握的必要知識及手段。雖然診斷技術(shù)、剖檢及病理特征、臨床特征檢查等已較為成熟，但其檢測率仍不能達(dá)到100%，對高致病性PRRSV，還需獸醫(yī)工作者在實(shí)際中積累更加豐富的臨床經(jīng)驗(yàn)，提高管理和監(jiān)控水平，預(yù)防疫情的發(fā)生并能在疫情發(fā)生時(shí)快速應(yīng)對。此外，不斷引入新的檢測和治療手段也是預(yù)防和控制疾病的必要工作。

［1］任慧英，等.豬繁殖與呼吸道綜合癥病毒核酸在仔豬呼吸與繁殖系統(tǒng)動(dòng)態(tài)分布的研究［J］.中國獸醫(yī)雜志，2002，2：3-4.

［2］Sur JH，et al.A poptosis induced in vivo during acute infection by porcine reproductive and respiratory syndromevirus［J］.Vet Pathol，1998，35（6）：1488-1493.

［3］王麗娜，等.獸藥殘留檢測中酶聯(lián)免疫試劑盒的選擇原則與使用注意事項(xiàng)［J］.現(xiàn)代畜牧獸醫(yī)，2013，7：41-44.

［4］Ostrowski M，et al.Identificationof neutralizing and nonneutralizingepitopes in the porcine reproductive andrespiratory syndrome virus GP5 ectodomain［J］.Virol，2002，76：4241-4250.

10.3969/J.ISSN.1671-6027.2016.09.073

尚月軍（1984～），本科，助理獸醫(yī)師，主要從事青海省鄉(xiāng)鎮(zhèn)企業(yè)技術(shù)推廣工作