劉　洋　劉　碩　孫建軍

作者單位:100048 中國人民解放軍海軍總醫(yī)院

CK、Tubulin-β及PCNA與鼻咽癌放療后復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移的相關(guān)性研究

劉洋劉碩孫建軍

作者單位:100048 中國人民解放軍海軍總醫(yī)院

【摘要】目的探析CK、Tubulin-β及PCNA與鼻咽癌放療后復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移的相關(guān)性。方法采用裸鼠體內(nèi)移植瘤法。根據(jù)治療方式的不同將裸鼠分成放射組與未放射組兩組，分別用10只裸鼠接種每組S1、F1細(xì)胞。分析鼻咽癌細(xì)胞F1、S1放療前、后的細(xì)胞形態(tài)、體內(nèi)增殖及轉(zhuǎn)移能力。結(jié)果鼻咽癌及放療后復(fù)發(fā)組織中CK、Tubulin-β及PCNA水平與臨床分期、頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、年齡及性別無關(guān)。放療后復(fù)發(fā)組織中CK與Tubulin-β及PCNA表達(dá)則表現(xiàn)為正相關(guān)性(P<0.05)。兩組均未發(fā)生肺轉(zhuǎn)移，比較放療后兩組F1、S1裸鼠移植瘤瘤體質(zhì)量，放射組均較未放射組低，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。放療后PCNA、CK的表達(dá)水平，S1裸鼠移植瘤明顯比F1高(P<0.05)。結(jié)論鼻咽癌放療后的復(fù)發(fā)過程中CK、Tubulin-β的水平與細(xì)胞增殖密切相關(guān)，但不是鼻咽癌放療后復(fù)發(fā)的獨(dú)立預(yù)測指標(biāo)。

【關(guān)鍵詞】鼻咽癌；細(xì)胞角蛋白；微管蛋白；增殖細(xì)胞核抗原

(ThePracticalJournalofCancer,2016,31:056～058)

鼻咽癌起源于人體鼻咽部的鱗狀上皮，鼻咽癌多發(fā)于我國南方，病發(fā)后臨床主要選擇放射治療，但是放療后生存率亦低，多數(shù)患者死于遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移或局部復(fù)發(fā)[1-2]。因其早期癥狀較輕，且部位隱匿，漏診誤診率高。近幾年來，其發(fā)病率不斷呈上升趨勢，嚴(yán)重威脅人類生命安全。細(xì)胞骨架是腫瘤細(xì)胞參與多種細(xì)胞反應(yīng)最初的靶結(jié)構(gòu)，鼻咽癌放射敏感異質(zhì)性機(jī)制除可能與不同亞克隆細(xì)胞結(jié)構(gòu)有關(guān)[3-4]。本組研究通過實(shí)驗(yàn)檢測鼻咽癌及放射治療后復(fù)發(fā)癌組織中細(xì)胞角蛋白(簡稱CK)、微管蛋白(簡稱Tubulin-β)及增殖細(xì)胞核抗原(簡稱PCNA)關(guān)系，旨在探析鼻咽癌放療后轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)的可能機(jī)制。

1材料與方法

1.1　臨床資料

選取2010年6月至2013年2月在中國人民解放軍海軍總醫(yī)院接受治療的54例鼻咽癌住院患者。其中男性34例，女性20例，年齡29～79歲，平均年齡46歲。全部病例均為首次診斷，相關(guān)病例資料都較為完整，且就診前均無抗癌治療史，其中50例在放療后復(fù)發(fā)的鼻咽癌患者僅有過放射治療史。

1.2　方法

裸鼠體內(nèi)移植瘤法。根據(jù)治療方式的不同分成放射組與未放射組兩組，分別用10只裸鼠接種每組S1、F1細(xì)胞。分析鼻咽癌細(xì)胞F1、S1放療前、后的細(xì)胞形態(tài)、體內(nèi)增殖及轉(zhuǎn)移能力。分別測量兩組瘤體體積變化，接種后25 d后將未放射組裸鼠處死，放射組則先給予單次照射、回籠飼養(yǎng)，再于接種后46 d處死裸鼠。對處死后的裸鼠進(jìn)行全面解剖，然后按照順序分別將淋巴結(jié)(肉眼可見)、肺臟以及皮下移植瘤取出，將瘤體剝離，記錄瘤體重量，對腫瘤轉(zhuǎn)移及生長情況進(jìn)行詳細(xì)觀察。

1.3　統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2結(jié)果

54例鼻咽癌組織中細(xì)胞角蛋白(CK)、微管蛋白(Tubulin-β)及增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)陽性表達(dá)率分別為63.0%、74.1%、79.6%。放療后復(fù)發(fā)的鼻咽癌組織中CK、Tubulin-β及PCNA的陽性表達(dá)率分別是72.0%，82.0%、98.0%。放療后復(fù)發(fā)的鼻咽癌組織中PCNA陽性表達(dá)率明顯比鼻咽癌組高(P<0.05)，CK、Tubulin-β則無顯著差異(P>0.05)，見表1。

表1　鼻咽癌組與放療后復(fù)發(fā)的鼻咽癌組織中CK、Tubulin-β

S1、F1裸鼠移植瘤中細(xì)胞角蛋白(CK)、微管蛋白(Tubulin-β)及增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)的表達(dá)，細(xì)胞角蛋白、微管蛋白表達(dá)于細(xì)胞膜或細(xì)胞質(zhì)，增殖細(xì)胞核抗原則表達(dá)于細(xì)胞核。CK、Tubulin-β表達(dá)水平放療后S1與F1裸鼠淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移瘤比較，S1均明顯高于F1，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。比較放射治療后裸鼠移植瘤S1與F1中CK、PCNA的表達(dá)情況，S1均顯著高于F1，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。未放射組S1與F1中CK、Tubulin-β及PCNA表達(dá)水平比較無顯著差異(P>0.05)(表2)。

表2　放射前后S1、F1中CK、Tubulin-β及PCNA的

注：FIN表示未放射組F1裸鼠淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移瘤；SLN表示未放射組S1裸鼠淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移瘤。

3　討論

鼻咽癌是1種頭頸部惡性腫瘤，我國華南地區(qū)較為多見。鼻咽癌患者放療后出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)的幾率較高，主要是鼻咽癌具有放射敏感性[5]。S1細(xì)胞在顯微鏡透視下有大量微管和微絲、少量而嵴小的線粒體呈現(xiàn)，考慮S1細(xì)胞的低放射敏感度以及慢增殖可能是由上述原因所致。本研究通過對S1、F1細(xì)胞中細(xì)胞角蛋白(簡稱CK)、微管蛋白(簡稱Tubulin-β)及增殖細(xì)胞核抗原(簡稱PCNA)水平的檢測，研究放射放療后鼻咽癌患者復(fù)發(fā)的影響因素，給提高治療鼻咽癌患者的療效提供一定的理論依據(jù)。

郭立兵等[6]楊芝萍等[7]文獻(xiàn)報(bào)道，CK、Tubulin-β的表達(dá)水平與鼻咽癌患者頸部的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期、年齡及性別等因素的關(guān)系不明顯。本研究結(jié)果提示CK、Tubulin-β作為細(xì)胞反應(yīng)的靶結(jié)構(gòu)，參與了輻射致使的細(xì)胞變化的活動，但是還無法作為鼻咽癌患者放射敏感度以及轉(zhuǎn)移的一項(xiàng)獨(dú)立判斷指標(biāo)。

熊暉等[8]彭濤等[9]文獻(xiàn)報(bào)道，細(xì)胞一旦接觸射線，CK與Tubulin-β表達(dá)會異常，同時(shí)細(xì)胞表型也會因此而發(fā)生變化，其如轉(zhuǎn)移這樣的惡性特征會增強(qiáng)，并會改變細(xì)胞表型使其惡性特征如轉(zhuǎn)移增強(qiáng)，放射治療后S1較高的轉(zhuǎn)移率與CK與Tubulin-β的高表達(dá)可能存在一定的聯(lián)系?；录褬返萚10]文獻(xiàn)報(bào)道中則指出，放射治療后轉(zhuǎn)移率較高可能與細(xì)胞角蛋白和微管蛋白高表達(dá)有著一定關(guān)系。本組研究結(jié)果，比較CK、Tubulin-β在放射治療后S1與F1裸鼠淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移瘤，S1均明顯高于F1(P<0.05)。對裸鼠移植瘤放射治療后S1與F1中CK、PCNA表達(dá)的比較發(fā)現(xiàn)，S1均顯著高于F1，且差異性明顯，因而具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義標(biāo)準(zhǔn)(P<0.05)。與上述文獻(xiàn)報(bào)道一致。此外，本研究還發(fā)現(xiàn)鼻咽癌組放療后，其癌細(xì)胞核異型性沒有復(fù)發(fā)組明顯，說明鼻咽癌存在放射抗性的患者經(jīng)放療后增殖能力依然良好，鼻咽癌患者放療后轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)可能基于放療后活躍的細(xì)胞增殖活動。

綜上所述，鼻咽癌放療后的復(fù)發(fā)過程中CK、Tubulin-β與細(xì)胞增殖密切相關(guān)，但不是鼻咽癌放療后復(fù)發(fā)的獨(dú)立預(yù)測指標(biāo)。

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(編輯：吳小紅)

(編輯：吳小紅)

Correlation of CK,Tubulin-beta,PCNA and Recurrence and Transfer of Nasopharyngeal Carcinoma Patients after Radiotherapy

LIUYang,LIUShuo,SUNJianjun.NavyGeneralHospitalofPLA,Beijing,100048

【Abstract】ObjectiveTo study the correlation of CK,Tubulin-beta,proliferating cell nuclear antigen(PCNA) and recurrence and transfer of nasopharyngeal carcinoma patients after radiotherapy.MethodsThe method of implanted tumor in nude mice was adopted in this experiment,and were divided into radiation group and non-radiation group.10 mice were vaccinate against F1,S1 cells of each group.The cellular morphology,proliferation in vivo and transfer ability of nasopharyngeal carcinoma cells F1,S1 before and after radiotherapy were analyzed.ResultsThe levels of CK,Tubulin-beta and PCNA in nasopharyngeal carcinoma and the recurrence tissue after radiotherapy had no correlation with clinical stage,age and sex,cervical lymph node metastasis.The CK had positive correlation with the expressions of Tubulin-beta and PCNA in the recurrence tissue (P<0.05).The 2 groups had no lung metastasis after radiotherapy,the transplanted tumor of body mass of F1,S1 in nude mice were compared,the mass in the radiation group were all lighter than those of non-irradiated group,and the differences had statistical significance (P<0.05 standard).The levels of PCNA,CK in S1 xenografts in nude mice were higher than those in F1 transplantation tumor in nude mice after radiotherapy (P<0.05).ConclusionThe levels of CK,Tubulin-beta during the recurrence of nasopharyngeal carcinoma after radiotherapy has close correlation with cell proliferation,but they are not the independent predictor of recurrence after radiotherapy of nasopharyngeal carcinoma.

【Key words】Nasopharyngeal carcinoma;Cytokeratin;Tubulin;Proliferating cell nuclear antigen(PCNA)

中圖分類號：R739.63

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1001-5930(2016)01-0056-03

DOI：10.3969/j.issn.1001-5930.2016.01.017

通訊作者：孫建軍

收稿日期(2015-04-15修回日期 2015-05-04) (2015-01-09修回日期 2015-04-29)