賴秀花，鄒漢良，鐘彥云，魏晟瀟

(深圳市坪山新區(qū)婦幼保健院檢驗科，廣東 深圳 518122)

303株肺炎克雷伯桿菌的藥敏結(jié)果及耐藥性分析

賴秀花，鄒漢良，鐘彥云，魏晟瀟

(深圳市坪山新區(qū)婦幼保健院檢驗科，廣東 深圳 518122)

目的 探討肺炎克雷伯桿菌的藥敏結(jié)果及其對臨床常用藥物的耐藥性，為合理用藥提供依據(jù)。方法 回顧性分析2011年1月至2014年11月我院門診和住院患者送檢的痰標本中分離出的非重復(fù)性肺炎克雷伯桿菌的數(shù)量以及產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)檢出率和耐藥譜。結(jié)果 1 327份痰標本中分離出303株肺炎克雷伯桿菌，檢出率為22.8%，其中產(chǎn)ESBLs檢出137株，占45.2%。產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌青霉素類100%耐藥，頭孢類78.8%以上耐藥，且以成人組居多，而氨基糖苷類在產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌中耐藥性最低的是阿米卡星，占31.4%。β-內(nèi)酰胺酶抑制劑占35.1%～43.8%、喹若酮類耐藥率占46.7%。結(jié)論 長期動態(tài)監(jiān)測肺炎克雷伯桿菌的藥敏及耐藥趨勢，積極篩查肺炎克雷伯桿菌產(chǎn)ESBLs者對合理應(yīng)用抗生素至關(guān)重要。

肺炎克雷伯菌；超廣譜β-內(nèi)酰胺酶；耐藥性

肺炎克雷伯菌是醫(yī)院常見的肺部感染的病原菌之一。肺炎克雷伯菌為革蘭氏陰性桿菌，屬于腸桿菌科克雷伯菌屬，臨床標本中較常見的主要有肺炎克雷伯菌肺炎亞種，本菌為兼性厭氧菌，無鞭毛、無動力。肺炎克雷伯菌分布于自然界，近年來成為最重要的條件致病菌之一[1-2]。本文對我院2011年1月至2014年11月肺炎克雷伯菌的檢出率以及藥物的耐藥性進行分析，以期為合理用藥提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2011年1月至2014年11月我院各科室送檢的1 327份痰標本，培養(yǎng)出肺炎克雷伯菌303株，占總送檢標本的22.8%，對同一患者重復(fù)留取標本不進行統(tǒng)計。按照年齡分為兒童組（6～12歲）、青少年組（13～17歲）和成年組（18～82歲）。質(zhì)控菌株：大腸埃希菌 ATCC25922，銅綠假單胞菌ATCC27853。

1.2 菌株培養(yǎng) 采用一次性清潔無菌的痰杯留取晨痰，送實驗室后按照白細胞（WBC）＞25個/HP，上皮細胞＜10個/LP標準篩查合格的標本。用合格的痰標本接于麥康凱、血平皿、巧克力平皿以及沙保氏培養(yǎng)基。24～48 h后用法國梅里埃ATB機型以及配套的革蘭氏陰性桿菌試劑進行鑒定。

1.3 藥敏試驗 采用ATB機型配套的藥敏試紙條直接讀取MIC值。藥敏結(jié)果均參照CLSI 2012版的執(zhí)行標準進行判斷。超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)的確診試驗為K-B法，M-H瓊脂放兩組藥敏紙片：①頭孢噻肟/克拉維酸30 μg/片或10μg/片和頭孢噻肟30 μg/片；②頭孢他啶/克拉維酸30 μg/片或10μg/片和頭孢他啶30 μg/片，24～48 h后任一組加了克拉維酸紙片的抑菌圈比沒加克拉維酸的直徑≥5 mm即為ESBLs陽性。

1.4 統(tǒng)計學方法 全部試驗數(shù)據(jù)經(jīng)SPSS19.0軟件統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果

2.1 菌株在各科室的分布情況 303株肺炎克雷伯菌在各科室的檢出率差異較大。其中以兒科檢出率最高，為28.5%(85/298)，其次是呼吸內(nèi)科，送檢痰標本769份，檢出肺炎克雷伯菌198例，檢出率為25.7%；外科的檢出率為10.9%，排行第三；婦產(chǎn)科檢出率最低，為4.1%。其他科室送檢痰標本28份，檢出肺炎克雷伯菌3例，檢出率為10.7%，見表1。

表1 303株肺炎克雷伯菌在各科室的分布情況

2.2 產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌的分布情況 1 327份痰標本中共分離出303株肺炎克雷伯菌，檢出率為22.8%，其中產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌137例，構(gòu)成比為45.2%，且成年人組居多，有89株，占65%，青少年組34株，占25%，兒童組有14株，占10%。

2.3 藥敏分析 303株肺炎克雷伯菌對青霉素和頭孢類的耐藥性較高，其中產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌青霉素是100%耐藥，頭孢類也是78.8%以上耐藥，而氨基糖苷類在產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌中耐藥性最低的是阿米卡星，占31.4%。β-內(nèi)酰胺酶抑制劑占35.1%～43.8%、喹若酮類耐藥率占46.7%；碳氫酶烯類的藥敏結(jié)果最低，見表2。

表2 303株肺炎克雷伯菌的藥物耐藥性分析

3 討論

肺炎克雷伯菌可在全身各部位發(fā)生感染，但最高的發(fā)病率在呼吸道和尿路[3]。近年來該菌的耐藥性不斷增加，部分成為產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）菌株，對大多數(shù)青霉素、頭孢菌素類抗生素耐藥，治療比較困難[4-5]。ESBLs是絲氨酸蛋白酶的衍生物，種類繁多，通常由TEM-1、TEM-2及SHV-1型ESBLs經(jīng)一至數(shù)個氨基酸殘基取代衍生物[6]可水解青霉素、頭孢菌素、氨曲南等廣譜β-內(nèi)酰胺酶類抗菌藥物。有研究表明編碼ESBLs的耐藥基因定位在質(zhì)粒上，并可隨質(zhì)粒在相同或不同菌屬細菌間水平傳播，從而造成ESBLs細菌在醫(yī)院感染爆發(fā)流行[7]，成為防治中的難點。ESBLs陽性菌對喹諾酮類和氨基糖苷類的藥物耐藥有增加，明顯說明ESBLs陽性菌存在著廣泛的多重耐藥現(xiàn)象[8]。本研究結(jié)果顯示亞胺培南與美羅培南的耐藥性最低，是目前為止最理想的用藥選擇，這與嚴海明等[9]報道相一致。其次為含酶抑制劑的抗菌藥物以及氨基糖苷類、喹若酮類。國內(nèi)外資料顯示產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶是導致肺炎克雷伯菌的主要耐藥機制之一[10]。李迎慧等[11]就曾報道過肺炎克雷伯菌對青霉素以及頭孢類耐藥率＞40%。可見此耐藥趨勢的嚴峻性，同時也給臨床醫(yī)務(wù)人員帶來巨大的挑戰(zhàn)。在醫(yī)院感染中，內(nèi)源性感染是通過病原體在宿主體內(nèi)移位定值而直接傳播，外源性感染是由患者體外的微生物引起，其主要途徑為共同媒介物的傳播，如醫(yī)護人員的手、吸痰器等介入性操作器械中，常可在短時間內(nèi)引起醫(yī)源性感染的爆發(fā)流行[12-13]。本文結(jié)果顯示了303株肺炎克雷伯菌中產(chǎn)ESBLs 137例，占45.2%，比2013年劉珊珊等[14]所監(jiān)測的數(shù)據(jù)高，而且產(chǎn)ESBLs的菌株主要集中在（呼吸內(nèi)科）成人組，這是否與患者在來院前已服用過抗生素有關(guān)還有待考證。下呼吸道感染已成為重要的感染類型，且感染趨勢不斷加重。隨著臨床廣譜抗生素的大量使用，ESBLs的陽性菌株也跟著上升，如何合理應(yīng)用抗菌藥物，從而有效的控制各種感染病例，是臨床醫(yī)務(wù)人員的重要任務(wù)。

綜上所述，如臨床標本中一旦檢出肺炎克雷伯菌，應(yīng)同時做ESBLs檢測，以便能在最短的時間內(nèi)給臨床提供更多有效的實驗數(shù)據(jù)，讓臨床更好地為患者選擇合適的抗菌藥物，進一步加強醫(yī)源性感染的防控，從而避免更多的耐藥性菌株的產(chǎn)生。

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Analysis of drug sensitivity and drug resistance of 303 strains of clinically isolated Klebsiella pneumoniae.

LAI Xiu-hua,ZOU Han-liang,ZHONG Yan-yun,WEI Cheng-xiao.Department of Clinical Laboratory,Pingshan New District People's Hospital of Shenzhen,Shenzhen 518122,Guangdong,CHINA

Objective To investigate the drug sensitivity and clinical commonly used drugs resistance of Klebsiella pneumoniae,and provide reference for using the medicine rationally.Methods The number of Klebsiella pneumoniae isolated from outpatients and inpatients in our hospital from January 2011 to November 2014,extended spectrum beta lactamases(ESBLs)detection rate and drug resistant spectrum were retrospective analyzed.Results A total of 303 strains of Klebsiella pneumoniae was isolated from 1 327 sputum samples with detection rate of 22.8%,of which 137 strains produced extended spectrum beta lactamases(ESBLs),accounting for 45.2%.ESBLs producing Klebsiella pneumoniae has 100%resistance to penicillin,and 78.8%or more resistance to cephalosporins,which mainly isolated from the adult group. Aminoglycosides ESBLs producing Klebsiella pneumonia had the lowest resistance to Amikacin with 31.4%,which had 35.1%～43.8%resistance to beta lactamase inhibitor and 46.7%resistance to primaquine ketones.Conclusion The long-term dynamic monitoring of drug sensitivity and drug resistance tendency of Klebsiella pneumoniae,and regularly screening of ESBLs producing Klebsiella pneumoniae are very important to reasonable use of antibiotics.

Klebsiella pneumoniae;Extended-spectrum beta-lactamase;Drug resistance

R378.99+6

A

1003—6350（2016）15—2480—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.15.023

2016-03-22)

廣東省深圳市坪山新區(qū)衛(wèi)生系統(tǒng)科研資助項目(編號：201428)

賴秀花。E-mail：315080998@qq.com