張　婷，俞祖亮，孫　冊，梁俊陽

(中國刑事警察學(xué)院法化學(xué)系,遼寧　沈陽　110035)

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食品中罌粟殼理化檢測相關(guān)問題的探討*

張婷，俞祖亮，孫冊，梁俊陽

(中國刑事警察學(xué)院法化學(xué)系,遼寧沈陽110035)

罌粟殼及其提取物作為一類麻醉物質(zhì)被非法添加在食品中會危害人體的健康。對食品中非法添加罌粟殼的行為認(rèn)定、監(jiān)督和管理，在司法實(shí)踐工作中存在一些問題，其中最主要的理化檢測中存在的問題制約了對食品安全違法行為的有效監(jiān)管。探討罌粟殼檢測標(biāo)準(zhǔn)化方法制定、快速檢驗(yàn)和實(shí)驗(yàn)室確證檢驗(yàn)、安全性閾值設(shè)定、實(shí)驗(yàn)室間能力驗(yàn)證等問題，以期對罌粟殼的檢測分析提供幫助。

食品；罌粟；理化檢驗(yàn)；問題

食品安全越來越受到人們的關(guān)注，食品中使用罌粟殼(籽)屬于違法行為，因此對食品中罌粟殼進(jìn)行理化檢測是證明此類違法行為的重要證據(jù)。但目前在對食品中罌粟殼檢測的科學(xué)性、規(guī)范性、法律性、安全性等方面還存在一些問題，導(dǎo)致在違法行為追究中的工作效率不高、對違法行為的處理依據(jù)不足等后果。因此，從理化檢測的角度研究和探討食品安全問題，以期能為食品中罌粟殼理化檢測的標(biāo)準(zhǔn)制定和實(shí)際檢驗(yàn)鑒定工作提供參考。

1　理化檢測依據(jù)的問題

從1991年開始，衛(wèi)生部、公安部等多部門聯(lián)手發(fā)布了《關(guān)于查處在食品中使用罌粟殼(籽)等違法行為的通知》。當(dāng)時因大型分析儀器不普及，理化檢測主要分析方法是薄層色譜法[1]、化學(xué)法和電化學(xué)法等[2-3]。因此各地所進(jìn)行的食品中罌粟殼的檢驗(yàn)方法根據(jù)“衛(wèi)生部衛(wèi)監(jiān)發(fā)(1992)第21號”文件《食品中阿片生物堿成分測定方法(暫行)》進(jìn)行。

2008年和2011年衛(wèi)生部先后2次公布的第5批可能違法添加的非食用物質(zhì)名錄中，再次將罌粟殼禁用的產(chǎn)品類別范圍擴(kuò)大為“火鍋底料及小吃類食品”。1987年，罌粟殼列入國務(wù)院頒布的《麻醉藥品管理辦法》名錄中，在1997年之后罌粟均按麻醉藥品進(jìn)行管理。此時有關(guān)食品中罌粟的理化檢測方法依據(jù)公安部行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)GA/T 104-1995《鴉片毒品中嗎啡、可待因、蒂巴因、罌粟堿、那可汀的定性分析及嗎啡、可待因的定量分析方法》進(jìn)行。

近年來，隨著高效液相色譜(HPLC)或高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(HPLC-MS)等高靈敏檢測分析儀器的出現(xiàn)，上海市食品藥品監(jiān)督管理局率先于2010年，頒布了《火鍋食品中罌粟堿、嗎啡、那可丁、可待因和蒂巴因的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》的地方性標(biāo)準(zhǔn)[4]。目前尚無國家標(biāo)準(zhǔn)化的有關(guān)食品中罌粟殼的檢驗(yàn)方法出臺。

從各種理化檢測方法的變遷過程可以看出，已有的食品中罌粟殼的檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)制定年代較早，薄層色譜法無法完成定量分析。氣相色譜法和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法定性分析和定量分析中有關(guān)雜質(zhì)的去除未提及。HPLC-MS分析方法沒有規(guī)范統(tǒng)一的國家標(biāo)準(zhǔn)，也沒有開展實(shí)驗(yàn)室檢測驗(yàn)證能力的比較，統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)缺乏和滯后將導(dǎo)致爭議下的工作被動，以及影響辦案工作進(jìn)度。本著對食品中罌粟殼理化檢驗(yàn)規(guī)范性的要求出發(fā)，制定相關(guān)的國家標(biāo)準(zhǔn)具有重要意義。

2　檢測方法的科學(xué)性和可行性問題

近些年來，國家及行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的制定范圍和新建標(biāo)準(zhǔn)的增速很快，但比起眾多實(shí)踐領(lǐng)域和不斷出現(xiàn)的新問題，標(biāo)準(zhǔn)制定則具有滯后性。盡管食品中罌粟殼的檢驗(yàn)方法很多，但各個實(shí)驗(yàn)室間的方法、水平、檢測設(shè)備的不同，很有可能面臨著檢測結(jié)果不一致的情況。

標(biāo)準(zhǔn)的制定過于嚴(yán)苛或需要配備昂貴的檢測設(shè)備，在我國目前經(jīng)濟(jì)發(fā)展不平衡的情況下，基層單位將不能嚴(yán)格執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)，發(fā)揮不了食品安全的監(jiān)督和管理的作用。標(biāo)準(zhǔn)的制定如果直接照搬其他食品中非法添加物的檢測標(biāo)準(zhǔn)或者標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定不細(xì)致、論證不充分的話，會加重理化檢驗(yàn)的工作難度和工作強(qiáng)度。因此，行之有效的方法的檢驗(yàn)方法制定后，開展實(shí)驗(yàn)室間的有關(guān)食品中罌粟殼檢測的能力測試不失為是保證檢驗(yàn)科學(xué)性的好方法。

3　檢測過程中的問題

食品中罌粟殼(籽)的檢驗(yàn)過程分為現(xiàn)場快速檢驗(yàn)和實(shí)驗(yàn)室確證分析2個過程，目前在各個過程中均存在一些不完善和亟待解決的問題。

3.1免疫法快速檢測中的問題

現(xiàn)場快速檢測方法主要有化學(xué)法和免疫法[5-6]，其中免疫法具有快速、高通量、高靈敏和高特異性等優(yōu)點(diǎn)，在現(xiàn)場檢驗(yàn)中更具優(yōu)勢。罌粟殼(籽)的主要生物堿有5種，其中含量較高的為嗎啡，約占10%，其次為那可汀，約占2%～5%，再次是罌粟堿，可待因，蒂巴因的含量約為0.2%～1%，因此嗎啡免疫膠體金試紙板應(yīng)用較多[7]。嗎啡測試板主要用于吸食毒品者尿液的初篩檢驗(yàn)。目前尚無針對食品檢測使用的專用測試板，在用于火鍋底料、調(diào)味品和鹵制品等食品時，常因蛋白質(zhì)、脂肪等雜質(zhì)含量過高而使得試紙擴(kuò)散難進(jìn)行。如果加水浸泡和提取后再進(jìn)行免疫法測定，嗎啡的提取率不高，會出現(xiàn)假陰性結(jié)果。

張冬升、鈕偉民等[7-8]分別則是制備了罌粟堿抗體，應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法檢測火鍋底料和湯料中罌粟堿的成分。盡管該方法的檢測限為0.1 μg/kg，檢測范圍為0.1～20 μg/kg，但罌粟堿抗體與其他阿片類生物堿有一定交叉反應(yīng)，因此，初篩檢測中會有假陽性等問題。

此外免疫試紙法的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性與生產(chǎn)廠家的工藝及試紙的保存、測試溫度、測試時間等使用情況有很大關(guān)系。免疫試紙法通常也只能作為初篩定性使用，不能用作定量分析。

3.2實(shí)驗(yàn)室確證檢測的問題

實(shí)驗(yàn)室確證方法包括有氣相色譜法(GC)[9-10]、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(GC/MS)[11-13]、高效液相色譜法(HPLC)[14-20]、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(LC-MS)[21-25]、質(zhì)譜法等[26-28]。所有上述儀器檢測前，均需要將食品等檢材制備成較潔凈且濃縮后的溶液才能進(jìn)行分析。因此樣品的前處理方法對檢測結(jié)果影響較大。

3.2.1液液萃取前處理的問題

罌粟含有的生物堿具有在堿性條件下可溶于有機(jī)溶劑，在酸性條件下溶于水的特點(diǎn)，可以分別調(diào)節(jié)溶液至酸性后，用水及乙醇的混合溶液提取生物堿的鹽溶液，張靖采用酸性乙醇提取幾種生物堿的檢出限分別為嗎啡0.8 μg/L、可待因3 μg/L、罌粟堿0.3 μg/L。熊劍娟等采用硝酸銀溶液沉淀過濾后直接測定的方法。這樣的方法操作比較簡便，但由于雜質(zhì)去除不徹底，很難應(yīng)用在高靈敏的液-質(zhì)聯(lián)用分析儀器中。

另一種前處理方法則是酸性條件下有機(jī)溶劑去除雜質(zhì)后，再將水溶液調(diào)至堿性有機(jī)溶劑反萃取。有機(jī)溶劑萃取多選用混合有機(jī)溶劑，如李永芳等[10]用三氯甲烷-甲醇(3:1)提取。張艷萍[12]采用三氯甲烷-異丙醇(4:1)溶液提取。董南采用三氯甲烷-乙醇(9:1)溶液提取。上述方法中油脂去除較好，但有機(jī)溶劑用量過大，提取和旋轉(zhuǎn)揮發(fā)等操作次數(shù)多，較為繁瑣。

3.2.2固相萃取前處理的問題

近年使用LC-MS法，方法的靈敏度大為改善，但其對檢材有凈化要求，當(dāng)分析食品中農(nóng)藥殘留時一般采用固相萃取法，選用的萃取材料有MCX、ChemElut、PSA和無水硫酸鎂等。但HPLC-MS檢測過程中，不同的生物堿在質(zhì)譜中的響應(yīng)強(qiáng)度不同，通常選用的C18色譜柱檢測，由于嗎啡的分子極性較大，在該柱子上保留性差，嗎啡的檢出限要低于罌粟堿和那可汀。王力清等對調(diào)料中罌粟殼成分采用了超聲波提取，MCX固相萃取柱凈化，HPLC-MS/MS法進(jìn)行檢測，調(diào)料中罌粟堿、那可丁的最低檢出限分別為0.8 μg/kg、1.0 μg/kg，嗎啡、可待因和蒂巴因的最低檢出限為50 μg/kg。劉敏敏等采用水提取、乙腈萃取火鍋底料中的生物堿成分，用PSA及無水硫酸鎂凈化，嗎啡的檢出限為37 μg/kg，其他4種檢出限為1 μg/kg?？紤]到嗎啡的極性較大，王柯等采用QuECHERS提取管提取罌粟殼中的生物堿成分，并使用了親水性的ACQUITY UPLC BEH HILIC色譜柱，結(jié)果罌粟堿、那可丁的檢出限均為5 μg/kg，其余為10 μg/kg。

可見，盡管HPLC-MS有較高的靈敏度，但在同一條件下，不可能使極性不同、結(jié)構(gòu)相異的所有生物堿都有很高的響應(yīng)，在所報(bào)道的方法中含量較低的罌粟堿檢出限要高于嗎啡。

3.2.3測定閾值的問題

分析測定閾值問題，這個檢測閾值不僅與樣品的前處理方法有關(guān)，也與儀器的靈敏度及運(yùn)行保養(yǎng)有關(guān)，眾多的文獻(xiàn)檢出限較低只是計(jì)算出的檢出限而非真正測定的檢出限，罌粟中生物堿的檢測閾值設(shè)定應(yīng)考慮對人體的安全接受量的前提下，合理制定，不能以無限追求最低的檢出靈敏度為標(biāo)準(zhǔn)。國外通行的認(rèn)定嗎啡尿液陽性的閾值為10～40 ng/mL，低于這個值認(rèn)定為陰性，這個閾值應(yīng)區(qū)別于工作領(lǐng)域的入職測試和常態(tài)化的濫用毒品人員的毒品檢測[29-30]。在一些歐洲和南美國家有食用罌粟籽的習(xí)慣，匈牙利成年人們每日食用源自食物中的嗎啡含量為78.6 μg/kg左右，兒童是116.9 μg/kg，咖喱飯中食用的嗎啡含量為200.4～1002 μg；可待因?yàn)?5.9～479.5 μg。實(shí)驗(yàn)證明從食用罌粟籽人員中的尿液、血液和毛發(fā)的濃度可以看出其含量均超過這個閾值,并且在使用量更大的人群中這一濃度會延續(xù)至48 h[31-33]，因此閾值的制定需要一些懂得藥理和毒理的專業(yè)人士以及懂得儀器分析的專業(yè)人士，共同討論得出。

食品中罌粟殼的理化檢驗(yàn)是提供執(zhí)法辦案的重要證據(jù)，為保證鑒定結(jié)論的法律性、科學(xué)性，需要在具有可行性的標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)在充分調(diào)研的基礎(chǔ)上盡快制定出臺，同時應(yīng)加強(qiáng)從事理化檢驗(yàn)鑒定實(shí)驗(yàn)室鑒定能力的管理，對實(shí)驗(yàn)室人員、設(shè)備、環(huán)境等方面進(jìn)行定期的，專項(xiàng)的實(shí)驗(yàn)室能力測試，實(shí)驗(yàn)室間數(shù)據(jù)比對等工作，以保證檢驗(yàn)鑒定的客觀性。另外對現(xiàn)場執(zhí)法人員進(jìn)行適當(dāng)?shù)哪芰蜆I(yè)務(wù)培訓(xùn)，對有沖突的規(guī)范或標(biāo)準(zhǔn)，對無法執(zhí)行的規(guī)定要適時地進(jìn)行調(diào)整和修訂。通過全面的努力來保證百姓的食品安全，以促進(jìn)人們的健康生活。

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Discussion on Determination of Illegal Papaver in Food*

ZHANG Ting，YU Zu-liang，SUN Ce，LIANG Jun-yang

(Department of Forensic Chemistry,National Police University of Chinese,Liaoning Shenyang 110035,China)

Poppy shell and its extract as a class of narcotic substances are illegally added in the food will harm the health of the human body.State superintendence,behavior identification and administration of illegal added papaver in food need to be develop standard examination method.However,already existing testing method about opium poppy have provided some practical problems in the judicial practice.These problems including standardization determination procedure,fast test and confirm test,conclusion expression,analytical threshold value,analysis ability acknowledgement among labs,and so on,were discussed,hoped to provide some advices in drafting about the standard of illegal papaver in food as quickly as possible.

food; papavers; determination; problems

中國刑警學(xué)院大學(xué)生創(chuàng)新計(jì)劃項(xiàng)目(201410175033)；中國刑警學(xué)院青年基金項(xiàng)目(2014)。

張婷(1975-)，女，講師，主要從事毒物和毒品分析。

TS201.6

A

1001-9677(2016)011-0013-03