鄭德劍,李鐘明,岑貞陸
(1.防城港市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)中心 防城港市 530001;2.廣西南寧聯(lián)潤(rùn)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)資料有限公司 南寧市 530007;3.廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院微生物研究所 南寧市 530007)
10種殺菌劑對(duì)萵筍菌核病菌的室內(nèi)抑菌效果
鄭德劍1,李鐘明2,岑貞陸3
(1.防城港市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)中心 防城港市 530001;2.廣西南寧聯(lián)潤(rùn)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)資料有限公司 南寧市 530007;3.廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院微生物研究所 南寧市 530007)
采用生長(zhǎng)速率法測(cè)定多菌靈、咪鮮胺、丁子·香芹酚等10種殺菌劑對(duì)萵筍菌核病病原菌的生長(zhǎng)抑制效果。結(jié)果顯示,多菌靈0.040 μg/ml、甲基硫菌靈0.040 μg/ml、咪鮮胺0.008 μg/ml、丁子·香芹酚0.005 μg/ml對(duì)萵筍菌核病菌的抑制率均高于80.00%,其中以咪鮮胺的抑菌率最高(88.230%);哈茨木霉菌0.033 μg/ml、異菌脲0.040 μg/ml、三唑酮0.017 μg/ml對(duì)萵筍菌核病菌的抑菌率在60.00%~80.00%之間;其余藥劑對(duì)萵筍菌核病菌的抑菌率較低均低于60.00%。
萵筍; 菌核病;室內(nèi)抑菌效果
萵筍是我國(guó)的重要蔬菜,其營(yíng)養(yǎng)豐富,富含鈣、磷、鐵等礦物質(zhì)及維生素 A 原、維生素 B1、維生素B2、維生素 C和膳食纖維,被譽(yù)為“綠色的精靈”[1],深受消費(fèi)者青睞。萵筍菌核病是萵筍的主要病害之一,在萵筍的整個(gè)生育期均發(fā)病,但發(fā)病盛期多出現(xiàn)在生長(zhǎng)后期,且病情通常發(fā)展迅速,病株呈青枯狀萎焉,嚴(yán)重時(shí)植株常整株腐爛癱倒[2],嚴(yán)重影響萵筍的產(chǎn)量和品質(zhì)。近年來,隨著防城港市將萵筍種植作為促進(jìn)農(nóng)民增收的“萬(wàn)元增收工程”特色產(chǎn)業(yè),萵筍產(chǎn)區(qū)種植面積不斷攀升[3],但由于輪作倒茬不力,田間積累的菌核越來越多,萵筍菌核病的發(fā)生為害及損失逐年加重,成為防城港市萵筍產(chǎn)業(yè)的主要障礙[3]。不同地區(qū)對(duì)防治萵筍菌核病的藥劑選擇及其施用頻率不同,該病病原菌各地菌株抗藥性水平差別各異。為了解目前市售農(nóng)藥對(duì)萵筍菌核病病原菌防城港市當(dāng)?shù)鼐甑囊志Ч?,作者采用生長(zhǎng)速率法測(cè)定多菌靈、咪鮮胺、丁子·香芹酚等10種殺菌劑對(duì)萵筍菌核病病原菌的生長(zhǎng)抑制效果,以期為防城港市萵筍菌核病的防治提供依據(jù)。
1.1 材料
1.1.1 供試病原菌
供試病原菌Sclerotinia sclerotiorum (Libert)de Bary分離樣本采自防城港市上思縣罹病的萵筍莖稈,經(jīng)75%酒精浸泡消毒30 s,轉(zhuǎn)0.1%氧化汞浸泡5 min,無菌水沖洗3次后在超凈工作臺(tái)吹干存留水分,然后置于常規(guī)PDA平板上25±1℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3 d,取菌落邊緣菌絲純化2次,經(jīng)柯氏法則確認(rèn)致病性后保存?zhèn)溆谩?/p>
1.1.2 供試藥劑
用于室內(nèi)抑菌效果測(cè)定所用藥劑的成分、有效含量與劑型、生產(chǎn)廠家等詳細(xì)信息見表1。
1.2 測(cè)定方法
1.2.1 含藥培養(yǎng)基的制備
各供試藥劑適量稱重后分別對(duì)應(yīng)加入適量無菌水劑溶解配制相對(duì)應(yīng)的母液,再分別設(shè)置好質(zhì)量濃度梯度稀釋藥液。各藥劑的每個(gè)質(zhì)量濃度梯度用移液槍吸取1 ml加入已經(jīng)溶化了的44 ml PDA培養(yǎng)基三角瓶中,使之有效終濃度為各藥劑說明書上推薦使用量的中間濃度(見表2),充分混勻后平均倒入3個(gè)培養(yǎng)皿中制成含藥PDA平板待測(cè)。
1.2.2 抑菌效果測(cè)定
抑菌效果測(cè)定采用生長(zhǎng)速率法:將萵筍菌核病菌菌株在25℃下培養(yǎng)2~3 d,用滅菌打孔器沿菌落邊緣打孔制成直徑為5 mm的菌碟,然后將菌碟分別接種于含藥PDA平板上,置于25±1℃恒溫箱中培養(yǎng)3 d,用螺旋測(cè)微器采用十字交叉法測(cè)量各藥劑處理區(qū)菌落直徑,然后計(jì)算不同藥劑質(zhì)量濃度的菌絲生長(zhǎng)抑制率,菌絲生長(zhǎng)抑制率的計(jì)算按下式進(jìn)行。以不含藥的培養(yǎng)基作為對(duì)照,每處理重復(fù)3次。
表1 供試10種殺菌劑的詳細(xì)信息
菌絲生長(zhǎng)抑制率(%)=[1-(藥劑處理菌落直徑-5 mm)/(對(duì)照菌落直徑-5 mm)]×100
采用生長(zhǎng)速率法測(cè)定的結(jié)果表明,不同殺菌劑的供試稀釋濃度對(duì)萵筍菌核病菌菌絲生長(zhǎng)均顯示出不同程度的抑制作用。供試藥劑對(duì)萵筍菌核病菌的抑制效果可分為3個(gè)層次,①多菌靈、甲基硫菌靈、咪鮮胺、丁子·香芹酚對(duì)供試病原菌菌株表現(xiàn)較好的抑制效果(菌落生長(zhǎng)抑制率>80.00%),其中以咪鮮胺的抑菌率最高,達(dá)到88.23%;②特菌銳、異菌脲對(duì)供試病原菌菌株的抑制效果次之(80.00%>菌落生長(zhǎng)抑制率>60.00%);③三唑酮、腐霉利、熒保素、嘧霉胺等其余供試藥劑對(duì)萵筍菌核病菌的抑制效果較低(菌落生長(zhǎng)抑制率<60.00%)。層次③菌落生長(zhǎng)抑制率與層次①、層次②菌落生長(zhǎng)抑制率的差異達(dá)極顯著水平(見表2)。
防治菌核病的藥劑多為多菌靈等苯并咪唑類、腐霉利和異菌脲等二甲酰亞胺類殺菌劑,但隨著用藥劑量和次數(shù)的不斷增加,多個(gè)地區(qū)報(bào)道菌核
表2 10種殺菌劑對(duì)萵筍菌核病菌室內(nèi)抑菌作用
注:差異顯著性測(cè)定采用“DMRT”法進(jìn)行,小寫字母表示5%的顯著水平,大寫字母表示1%的顯著水平。病病原菌對(duì)多菌靈產(chǎn)生抗藥性不斷加強(qiáng)[3-8],對(duì)以異菌脲、腐霉利等二甲酰亞胺類殺菌劑也存在很高的抗藥性風(fēng)險(xiǎn)[9-10]。本文中供試萵筍病原菌防城港市菌株對(duì)多菌靈、甲基硫菌靈、咪鮮胺這3種化學(xué)藥劑的敏感性較高,生長(zhǎng)抑制率均大于80.00%(見表2),推測(cè)目前當(dāng)?shù)鼐陮?duì)上述化學(xué)藥劑的抗藥性水平仍暫時(shí)較低。為延緩上述藥劑抗性的產(chǎn)生,應(yīng)交替使用作用機(jī)制不同的殺菌劑。
在菌核病病原菌的抗、耐藥性增強(qiáng)及農(nóng)藥殘留問題日益突出的背景下,植保學(xué)者從環(huán)保和安全的角度考慮,探討和篩選了微生物菌劑、植物提取產(chǎn)物等其他類型的替代殺菌劑。已報(bào)道對(duì)核盤菌產(chǎn)生拮抗作用的真菌接近50 種,其中木霉、粘帚霉、盾殼霉、曲霉對(duì)核盤菌具有較強(qiáng)拮抗效應(yīng)[11],本試驗(yàn)所用的哈茨木霉菌劑對(duì)萵筍菌核病病原菌室內(nèi)生長(zhǎng)抑制率為75.55%(見表2),再次驗(yàn)證了該菌良好的生防潛能。一些植物的提取物對(duì)菌核病病原菌也有較好的抑制作用,且對(duì)環(huán)境無破壞作用,如合歡葉[12]、青葙根[13]、大蒜[14]、米莎草[15]的提取物能抑制菌核病原菌菌絲的生長(zhǎng)和菌核的形成。馬趙江用純植物源農(nóng)藥(0.5%小檗堿水劑)對(duì)萵筍菌核病進(jìn)行防治試驗(yàn),取得了75.03%的田間防效[16]。目前尚未見有丁子·香芹酚對(duì)萵筍菌核病病原菌的室內(nèi)抑菌及田間防治的文獻(xiàn)報(bào)道,本試驗(yàn)中丁子·香芹酚對(duì)菌核病病原菌室內(nèi)生長(zhǎng)抑制率高達(dá)88.23%(見表2),進(jìn)一步豐富了防治菌核病的植物源農(nóng)藥藥劑譜。目前對(duì)菌核病的生物防治研究還處于基礎(chǔ)階段,微生物菌劑或植物提取產(chǎn)物對(duì)菌核病病原菌的室內(nèi)抑菌效果并不能直接反應(yīng)田間的防治效果。作者贊同黃思良等人[17]的觀點(diǎn)即田間實(shí)際防治效果還得依賴多點(diǎn)重復(fù)試驗(yàn),因此丁子·香芹酚及哈茨木霉菌劑的田間藥效有待于進(jìn)一步驗(yàn)證。
[1]沈興賢. 萵筍營(yíng)養(yǎng)價(jià)值及高產(chǎn)高效栽培技術(shù)[J]. 上海蔬菜,2011,(5):24-25.
[2]付海濱,李金堂. 萵苣菌核病的識(shí)別及防治[J]. 長(zhǎng)江蔬菜,2013,13:43-44.
[3]鄭德劍,唐新海,韋小華,等. 2012年冬季防城區(qū)萵苣菌核病發(fā)生流行原因分析及防治對(duì)策[J]. 長(zhǎng)江蔬菜,2013,17:54-55.
[4]潘以樓,汪智淵,吳漢章. 油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)對(duì)多菌靈的抗藥性及其穩(wěn)定性[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),1997,13(1):32-35.
[5]石志奇,周明國(guó),葉鐘音. 油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)對(duì)多菌靈抗藥性監(jiān)測(cè)[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2000,16(4):212-216.
[6]劉開義,陳方新. 撲海因、多菌靈復(fù)配對(duì)油菜菌核病菌的毒力測(cè)定[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2007,35(3):756-757.
[7]齊永霞,陳方新,丁克堅(jiān),等.安徽省油菜菌核病菌對(duì)菌核凈的抗藥性測(cè)定[J]. 農(nóng)藥,2006,8(45):567-580.
[8]石志琦,周明國(guó),葉鐘音. 油菜菌核病菌對(duì)多菌靈、菌核凈抗藥性菌株性質(zhì)研究[J]. 中國(guó)油料作物學(xué)報(bào),2000,22(4):54-57.[9]祝明亮,嚴(yán)金平,孫啟玲,等. 植物病原真菌對(duì)二甲酰亞胺類殺菌劑的抗性分子機(jī)制[J]. 生物技術(shù),2005,15(5):95-97.
[10]石志琦,周明國(guó),葉鐘音. 核盤菌對(duì)菌核凈的抗藥性機(jī)制初探[J]. 農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào),2000,2(2):47-51.
[11]李世東,劉杏忠. 食菌核葚孢霉——一種有潛力的菌核病生防菌[J].中國(guó)生物防治,2000,(4):172-182
[12]劉峰,代光輝,周熙榮,等. 合歡葉提取物對(duì)油菜菌核病菌的抑制作用及其苗期防治效果[J]. 植物病理學(xué)報(bào),2010,(5):511-516
[13]周兵,閆小紅,蔣平. 青葙根氯仿提取物對(duì)多種植物的生物活性及抑菌作用[J]. 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2010,(2):143-147
[14]曾東方,陳玢,曾麟,等. 大蒜素對(duì)三種農(nóng)作物病原真菌的抑制作用[J]. 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué),2011,(11):2247-2249
[15]周兵,劉國(guó)偉,閆小紅. 碎米莎草根部總生物堿的化感活性及抑菌活性的研究[J]. 江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2009,(1):85-89
[16]馬趙江,凌士鵬,周小軍,等. 0.5%小檗堿水劑防治萵苣菌核病藥效試驗(yàn)[J]. 上海蔬菜,2012,(3):77-78.
[17]崔娜,黃思良,岑貞陸,等. 殺菌劑對(duì)細(xì)交鏈孢菌的室內(nèi)抑菌效果[J]. 廣西農(nóng)業(yè)科學(xué),2006,37(4):394-396.
S436.36
A
1003-8779(2016)04-0013-03
2016-10-12
鄭德建(1976—),男,廣西防城港市人,高級(jí)農(nóng)藝師。