潘秋霞

(日照市畜牧站，山東日照 276800)

日照市規(guī)模豬場(chǎng)口蹄疫免疫效果監(jiān)測(cè)分析

潘秋霞

(日照市畜牧站，山東日照 276800)

為了解日照規(guī)?；i場(chǎng)口蹄疫疫苗的免疫效果，應(yīng)用正向間接血凝方法對(duì)全市30家豬場(chǎng)的920份血清樣品進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。結(jié)果顯示:在對(duì)種公豬、母豬、育肥豬三種不同年齡段的豬群的口蹄疫抗體檢測(cè)中，母豬血清檢測(cè)340份，其中免疫合格326份，合格率95%；種公豬血清檢測(cè)120份，免疫合格120份。合格率100%；育肥豬血清檢測(cè)460份，免疫合格389份，合格率84.6%。以上結(jié)果表明，豬口蹄疫的抗體水平檢測(cè)合格率均在80%以上，且種公豬的抗體免疫合格率大于母豬，育肥豬為三者中最低。

規(guī)?；B(yǎng)豬場(chǎng)；抗體監(jiān)測(cè)；口蹄疫

近年來，日照市的養(yǎng)豬業(yè)有了很大的發(fā)展，逐漸由傳統(tǒng)的家戶散養(yǎng)向規(guī)?；⒓s化轉(zhuǎn)變，但隨之而來的是豬群飼養(yǎng)密度也越來越高，再加上豬場(chǎng)引種工作的頻繁，疾病的發(fā)生也變得相當(dāng)復(fù)雜，一些重大疾病的發(fā)生給各個(gè)養(yǎng)豬場(chǎng)造成很大的經(jīng)濟(jì)損失，也嚴(yán)重影響了養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展，其中口蹄疫等病毒性傳染性病，仍嚴(yán)重影響著我市養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展[1]。預(yù)防和控制這些傳染病首先要做的就要摸清口蹄疫的免疫狀況。我市規(guī)模化養(yǎng)豬場(chǎng)口蹄疫的免疫程序一般情況下為30～35日齡、90～95日齡各免疫1次，母豬在配種前免疫1次，種公豬至少免疫2～3次[2]。針對(duì)規(guī)?；i場(chǎng)的免疫情況進(jìn)行免疫監(jiān)測(cè)是十分必要的，這對(duì)疫苗選擇、疫苗免疫效果的考察、免疫計(jì)劃的制定是非常有用的。通過免疫監(jiān)測(cè)，可以及時(shí)了解免疫效果，準(zhǔn)確掌握疫情動(dòng)態(tài)，根據(jù)免疫抗體水平科學(xué)地進(jìn)行綜合免疫預(yù)防，以便預(yù)測(cè)疾病的動(dòng)態(tài)，控制疾病的發(fā)展[3]。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地點(diǎn)、方法

本試驗(yàn)研究于2016年4月至5月在日照市畜牧站進(jìn)行。

1.2 血清樣品

為配合我市春季防疫檢查工作，進(jìn)行豬口蹄疫疾病的免疫效果監(jiān)測(cè)，日照市畜牧站于2016年3月中旬對(duì)全市4個(gè)區(qū)縣30家規(guī)?；B(yǎng)豬場(chǎng)進(jìn)行了豬群抽樣檢測(cè)，共抽查920份血清，其中母豬血清340份，豬口蹄疫免疫次數(shù)為4～5次；種公豬共120份血清，豬口蹄疫免疫次數(shù)為2～3次；育肥豬共460份血清，免疫背景不同，豬口蹄疫免疫2次的有78份，免疫3次的有359份，免疫4次的有23份。

1.3 檢測(cè)試劑

豬口蹄疫正向間接血凝抗原、標(biāo)準(zhǔn)陽性血清和標(biāo)準(zhǔn)陰性血清均購自中國農(nóng)科院蘭州獸醫(yī)研究所，檢測(cè)所用均為同一批次，生產(chǎn)批號(hào)為160125。

1.4 儀器設(shè)備

V型96孔血凝板購自江蘇姜堰市新康醫(yī)療器械有限公司；振蕩器；微量加樣器。

1.5 豬口蹄疫抗體的檢測(cè)

本試驗(yàn)采用正向間接血凝試驗(yàn)對(duì)種公豬、母豬、育肥豬及不同免疫次數(shù)的育肥豬進(jìn)行豬口蹄疫抗體檢測(cè)。該方法的具體操作步驟如下：

（1）待檢血清的滅活：將待檢血清放入56℃水浴中滅活30 min。

（2）待檢血清的稀釋：用稀釋液將待檢血清稀釋成1∶4、1∶8、1∶16、1∶32、1∶64、1∶128、1∶256、1∶512等8個(gè)稀釋度。

（3）陰、陽性血清的稀釋：用稀釋液將陰性血清稀釋成1∶16，將陽性血清稀釋成1∶512。

（4）加血清：用微量加樣器在V型96孔血凝板上每排的第1～8孔加各稀釋度待檢血清50 μl，加第10孔1∶16的豬口蹄疫陰性對(duì)照血清，每孔50 μl，加第11孔加豬口蹄疫陽性對(duì)照血清50 μl（1：512）；第12孔各加稀釋液50 μl（空白對(duì)照）。

（5）加診斷液：用前搖勻，每排1～8孔和10～12孔加豬口蹄疫診斷液，每孔25 μl。

（6）振蕩搖勻：加樣完畢后，立即將血凝板置于震蕩器上，振蕩1min，取下放在白紙上，觀察血球應(yīng)均勻懸浮，不得沉淀，否則應(yīng)繼續(xù)振蕩。

（7）靜置：振蕩混勻后，取下血凝板并蓋上大小適中的玻璃板，防止水分蒸發(fā)，室溫靜置1.5～2 h觀察結(jié)果。

結(jié)果判定：先觀察對(duì)照孔，第10孔（陰性對(duì)照）、第12孔（空白對(duì)照）應(yīng)無凝集現(xiàn)象，呈小圓點(diǎn)（－）。第11孔（陽性對(duì)照）應(yīng)有50%以上的血球產(chǎn)生凝集，即（++）（陽性反應(yīng)）。在對(duì)照孔合格的情況下，觀察1～8孔，以紅細(xì)胞呈“++”凝集的待檢血清的最大稀釋度為其抗體效價(jià)。判定標(biāo)準(zhǔn)以豬口蹄疫的抗體效價(jià)達(dá)到 1∶32 為免疫合格。

2 結(jié)果

豬口蹄疫抗體檢測(cè)結(jié)果：母豬血清檢測(cè)340份，其中免疫合格（抗體效價(jià)達(dá)到 1：32為免疫合格）326份，合格率95%；種公豬血清檢測(cè)120份，免疫合格120份。合格率100%；育肥豬血清檢測(cè)460份，免疫合格389份，合格率84.6%，結(jié)果見表1。

表1 豬口蹄疫抗體檢測(cè)結(jié)果

表1可以看出種公豬、母豬、育肥豬的口蹄疫免疫合格率依次為100%，95%，84.6%，由此可以看出口蹄疫抗體水平的高低依次為種公豬，母豬，育肥豬。

3 討論與分析

3.1 種公豬口蹄疫疫苗免疫分析

從對(duì)來自全市4個(gè)區(qū)縣30家規(guī)?；i場(chǎng)，共920份血清樣品的檢測(cè)結(jié)果來看，豬口蹄疫的免疫合格率是不一致的。種公豬、母豬、育肥豬三者的免疫合格率分別為100%、95%和84.6%，種公豬的抗體水平最高，免疫合格率達(dá)到100%，這是因?yàn)榉N公豬免疫效果的好壞直接影響到母豬的配種，進(jìn)而影響仔豬的生長發(fā)育及其對(duì)病原的抵抗力，故豬場(chǎng)對(duì)種公豬最為關(guān)注[4]。

3.2 母豬口蹄疫疫苗免疫分析

與種公豬相比，母豬也受到了相當(dāng)高的關(guān)注，而母豬的免疫合格率為95%。本研究進(jìn)而調(diào)查了部分規(guī)模化豬場(chǎng)母豬的免疫背景，雖然說母豬的抗體水平也相當(dāng)高，但并沒有種公豬的免疫合格率高。從調(diào)查情況來看主要有以下幾方面的原因：① 抽檢血清的母豬并不是同一胎次的母豬，有一胎、二胎、三胎及后備母豬。由于年齡不同，母豬的免疫次數(shù)也不同，年齡大免疫次數(shù)高的母豬抗體水平相對(duì)后備母豬和一胎的母豬的抗體水平高。② 有些年齡偏大的母豬由于到了該淘汰的階段，所以在疫苗預(yù)防，飼養(yǎng)管理等方面受到了養(yǎng)殖場(chǎng)技術(shù)人員的忽視[5]。

3.3 育肥豬口蹄疫疫苗免疫分析

由檢測(cè)結(jié)果可以看出育肥豬的免疫合格率最低，只有84.6%，分析其原因主要是由于育肥豬的飼養(yǎng)時(shí)間短，重復(fù)利用

率低，因此養(yǎng)殖場(chǎng)對(duì)其不夠重視。針對(duì)育肥豬豬口蹄疫抗體水平較低的情況，通過調(diào)查育肥豬的免疫背景發(fā)現(xiàn)，總體來說免疫次數(shù)越多，抗體水平越高，豬口蹄疫免疫2次、3次、4次的免疫合格率分別為85.6%、92.7%、100%[6]。另一方面通過養(yǎng)殖戶了解到有些豬群的整體狀況不是很好，對(duì)疫苗的刺激反應(yīng)比較大，不同個(gè)體即使是相同的免疫程序，所產(chǎn)生的免疫效果也不一樣，主要與豬群先天狀況和豬場(chǎng)環(huán)境、飼養(yǎng)管理水平有關(guān)。

[1] 葉瑋，林晴，丘艷紅，等.規(guī)模化豬場(chǎng)豬瘟、口蹄疫抗體水平監(jiān)測(cè)和免疫效果分析[J].畜牧獸醫(yī)雜志，2008，27（1）：25-27.

[2] 林毅，張道永，楊曉梅，等.規(guī)?；i場(chǎng)主要疫病的免疫和監(jiān)測(cè)[J].西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2000，13（增刊）：78-83.

[3] 于桂陽.規(guī)摸化豬場(chǎng)主要疾病的杭體水平監(jiān)測(cè)與免疫效果分析[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2008，（1）：79-81

[4] 謝琴，李元?jiǎng)?，張明林，?寧夏某規(guī)?；i場(chǎng)豬瘟、口蹄疫抗體水平監(jiān)測(cè)和免疫效果分析[J].甘肅畜牧獸醫(yī)，2005，35（6）：8-10.

[5] 熊忠良，汪宏才，王紅琳，等.規(guī)?；i場(chǎng)主要傳染病抗體水平檢測(cè)及分析[J].湖北畜牧獸醫(yī)，2004，（2）：31-32.

[6] 母安雄，谷根林.規(guī)模豬場(chǎng)主要疫病抗體水平監(jiān)測(cè)及免疫效果分析[J].畜牧與獸醫(yī)，.2002，34（3）：29-31.