凌寧，劉毅，彭明利

（重慶醫(yī)科大學(xué)：1附屬第二醫(yī)院感染病科；2病毒性肝炎研究所，中國重慶400010）

HBeAg定量檢測對預(yù)測阿德福韋酯治療慢性乙型肝炎療效的價值*

凌寧1，劉毅1，彭明利2

（重慶醫(yī)科大學(xué)：1附屬第二醫(yī)院感染病科；2病毒性肝炎研究所，中國重慶400010）

目的：探討外周血HBeAg定量水平的變化與阿德福韋酯治療HBeAg陽性慢性乙型肝炎（CHB）患者療效的關(guān)系。方法：對57例接受阿德福韋酯治療的HBeAg陽性CHB患者隨訪96周，分別在抗病毒治療的基線、12周、24周、48周、96周收集患者血清，化學(xué)發(fā)光法定量檢測HBeAg水平，實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）檢測HBV DNA水平，全自動生化分析儀檢測血清ALT水平。根據(jù)患者治療96周后是否達(dá)到完全應(yīng)答，分成完全應(yīng)答組和非完全應(yīng)答組，對兩組患者相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。結(jié)果：96周治療后完全應(yīng)答組有15例，非完全應(yīng)答組有42例。①完全應(yīng)答組基線、24、48、96周HBV DNA水平均較非完全應(yīng)答組低，P＜0.01；②完全應(yīng)答組12、24、48周、HBeAg定量水平的變化與同時期的HBV DNA定量的變化均有相關(guān)性，與96周HBeAg血清轉(zhuǎn)換相關(guān)；③完全應(yīng)答組基線、12、24、48周HBeAg水平可預(yù)測96周完全應(yīng)答，AUC分別是0.977、0.977、0.992、0.953，敏感性均為100%，特異性分別為96.87%、93.75%、96.87%、90.62%。12周、24周、48周HBeAg定量的變化亦可預(yù)測96周完全應(yīng)答，AUC分別是0.969、0.992、0.953，敏感性均為100%，特異性分別為93.75%、96.87%、90.62%。④12、48周HBV DNA水平，12、24周HBeAg水平及HBeAg定量的變化均能預(yù)測隨訪結(jié)束時患者發(fā)生病毒學(xué)突破。結(jié)論：①基線HBV DNA和HBeAg水平可以預(yù)測96周的完全應(yīng)答，有助于優(yōu)化治療，選擇適合的患者；②12周、24周、48周HBeAg的水平及其變化能預(yù)測96周的完全應(yīng)答，其效能優(yōu)于HBV DNA的水平及其變化；③12周、24周HBeAg定量的變化能預(yù)測隨訪結(jié)束時患者發(fā)生病毒學(xué)突破，其效能優(yōu)于同時期HBeAg水平。

慢性乙型肝炎；HBeAg定量；預(yù)測；阿德福韋酯；

目前慢性乙型肝炎（Chronic hepatitis B，CHB）抗病毒藥物包括干擾素和核苷（酸）類藥物，其療效有限，與藥物、病毒和宿主多因素有關(guān)[1]?！堵砸倚透窝追乐沃改稀分赋觯和Ｋ帢?biāo)準(zhǔn)為達(dá)到ALT恢復(fù)正常，HBV DNA小于最低檢測限和血清HBeAg轉(zhuǎn)換后鞏固治療至少3年，總療程4年。療程與療效是影響患者依從性的重要因素[2]。研究發(fā)現(xiàn)，HBeAg定量監(jiān)測有助于預(yù)測持久病毒學(xué)應(yīng)答和HBeAg血清學(xué)轉(zhuǎn)換[3-4]。

本研究通過檢測使用阿德福韋酯治療HBeAg陽性慢性乙型肝炎的療效指標(biāo)，探索血清HBeAg定量水平及其變化與預(yù)測抗病毒療效之間的關(guān)系。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選取重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院感染科門診確診的CHB患者，診斷均符合《2010版慢性乙型肝炎防治指南》[5]。共入組57例，男42例，女15例，年齡18～55歲。入組符合：HBsAg、HBeAg陽性，抗-HBe陰性，HBVDNA＞105拷貝／mL，ALT＞80 U/L。病例均排除HCV、HIV重疊感染以及自身免疫性肝炎、酒精性肝病、代謝性肝病。

1.2 儀器和試劑

HBV血清標(biāo)志物檢測：HBV血清標(biāo)記物化學(xué)發(fā)光試劑盒（羅氏公司）。HBeAg檢測：AXSYM HBe2.0,Abbott Laboratories,Abbott Park,IL。HBVD NA檢測：COBAS AMPLICOR HBV Monitor,Roche Diagnostics,Branchburg,NJ；HBV DNA熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）試劑盒（上海復(fù)星長征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司）；檢測下限為500拷貝／mL。肝功能檢測：HITACHI7100全自動生化分析儀，ALT正常上限為40 U／L。

1.3 研究方案

所有CHB患者接受阿德福韋酯（10 mg，qd）治療，共隨訪96周。分別檢測患者治療前、治療12、24、48周及96周的ALT水平、HBV DNA載量、HBV血清標(biāo)記物及HBeAg定量。根據(jù)檢測結(jié)果分為兩組：一組為完全應(yīng)答，即ALT正常、HBV DNA低于檢測值、HBeAg血清轉(zhuǎn)換(HBeAg轉(zhuǎn)陰，HBeAb轉(zhuǎn)陽)。另一組為非完全應(yīng)答組，即未達(dá)到以上標(biāo)準(zhǔn)的患者。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

以SPSS 19.0軟件進(jìn)行分析。所有資料行正態(tài)分布檢驗，計量資料數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s），若服從正態(tài)分布且方差齊性，差異以t檢驗（兩組）進(jìn)行比較，相關(guān)性分析采用Spearman秩相關(guān)檢驗。診斷性能評價采用受試者工作特征曲線（Receiver operating characteristic curve，ROC）分析，計算曲線下面積、敏感度、特異度、陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 基礎(chǔ)資料

共入組57例，男42例，女15例。隨訪結(jié)束后，15例患者達(dá)到完全應(yīng)答，男11例，女4例，平均年齡（26.0±5.1）歲；42例患者未達(dá)到完全應(yīng)答，其中男31例，女11例，平均年齡（28.6±7.9）歲。

2.2 兩組患者HBeAg定量水平與HBVDNA水平在治療前后的檢測結(jié)果

兩組患者HBV DNA水平和HBeAg定量值在基線時差異即有統(tǒng)計學(xué)意義，P＜0.01。

完全應(yīng)答組24、48、96周HBV DNA及HBeAg定量水平均較非完全應(yīng)答組低，P＜0.05，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，表1。

表1 兩組患者治療前后HBVDNA水平和HBeAg定量值水平（±s）

表1 兩組患者治療前后HBVDNA水平和HBeAg定量值水平（±s）

組別基線完全應(yīng)答組非完全應(yīng)答組t P 12周完全應(yīng)答組非完全應(yīng)答組t P 24周完全應(yīng)答組非完全應(yīng)答組t P 48周完全應(yīng)答組非完全應(yīng)答組t P 96周完全應(yīng)答組非完全應(yīng)答組t P HBVDNA（log10拷貝/mL）7.28±0.74 9.12±0.64 -3.92 0.000 3.41±0.51 5.49±1.83 -1.58 0.123 2.35±0.06 4.87±1.85 -1.91 0.000 2.30±0.00 4.64±2.09 -1.56 0.000 2.30±0.00 4.51±1.97 -1.57 0.000 HBeAg（log 10PEIU/mL）2.85±0.05 3.09±0.11 -3.07 0.004 1.02±1.53 2.85±0.58 -3.97 0.338 -0.18±0.01 2.68±0.79 -5.04 0.000 -0.63±0.41 2.44±1.11 -3.85 0.001 -0.82±0.20 2.06±1.42 -2.83 0.008

2.3 完全應(yīng)答組，HBeAg定量水平變化與同時期HBV DNA水平變化、96周HBeAg血清學(xué)轉(zhuǎn)換之間的相關(guān)性

完全應(yīng)答組12、24、48、96周HBeAg定量水平較基線的變化與同時期的HBV DNA定量的變化均有相關(guān)性（r值分別為0.726、0.873、0.839、0.828，P＜0.01）。12、24、48周HBeAg定量水平的變化亦與96周HBeAg血清轉(zhuǎn)換相關(guān)（P值分別為0.01、0.014、0.028）。

2.4 完全應(yīng)答組，HBeAg定量水平、HBV DNA水平及其變化對預(yù)測96周完全應(yīng)答的價值

完全應(yīng)答組，各隨訪點HBV DNA水平及其變化可預(yù)測96周完全應(yīng)答，各隨訪點HBeAg水平及其變化亦可預(yù)測96周完全應(yīng)答。HBeAg定量變化的預(yù)測效能優(yōu)于HBV DNA水平的變化，表2。

2.5 治療早期HBeAg定量水平、HBV DNA水平變化對隨訪結(jié)束時患者發(fā)生病毒學(xué)突破的預(yù)測價值

針對所有患者，12周、48周HBV DNA水平，12、24周HBeAg水平，12、24周HBeAg定量的變化均能預(yù)測隨訪結(jié)束時患者發(fā)生病毒學(xué)突破，但12周HBeAg定量水平的變化的預(yù)測效能最強，表3。

3 討論

HBeAg是由HBV C基因轉(zhuǎn)錄生成的可溶性蛋白，引起HBV的持續(xù)慢性感染，目前被認(rèn)為是免疫耐受的指標(biāo)[6]。HBeAg血清轉(zhuǎn)換常意味著病毒持續(xù)抑制，病情由活動性趨于靜止[7]。

在干擾素治療HBeAg陽性慢乙肝的研究中發(fā)現(xiàn)，不同時間點HBV DNA、HBeAg及ALT與治療結(jié)束時HBeAg血清轉(zhuǎn)換有不同程度的關(guān)系，但基線HBeAg的水平，以及治療早期HBeAg的下降程度是否獲得HBeAg血清轉(zhuǎn)換的最強預(yù)測因子[8-14]。Fried的研究認(rèn)為，在PEG-IFNa-2a治療HBeAg陽性CHB患者的HBeAg血清轉(zhuǎn)換率預(yù)測上，HBeAg水平較HBV DNA的靈敏度及特異度更高?；€HBeAg≤31 PEIU/mL的患者發(fā)生HBeAg血清轉(zhuǎn)換的陽性預(yù)測值為54%。治療12周HBeAg水平下降至＜10 PEIU/mL時，53%患者可獲得血清學(xué)轉(zhuǎn)換。治療24周HBeAg水平下降至＜10 PEIU/mL時，52%患者可獲得血清學(xué)轉(zhuǎn)換。而治療24周時HBeAg水平≥100 PEIU/mL，則僅4%患者獲血清學(xué)轉(zhuǎn)換，其陰性預(yù)測值達(dá)96%[8]。而Tangkijvanich等[9]人的研究提示，與HBsAg及HBV DNA相比，HBeAg水平對HBeAg血清轉(zhuǎn)換有更好的預(yù)測作用。12周HBeAg＜2.4 s/co及24周HBeAg＜2.0 s/co的陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值分別是65.2%、86.5%和80.9%、92.3%，均高于同期HBsAg、HBV DNA的陽/陰性預(yù)測值。

在核苷類似物治療HBeAg陽性慢乙肝的研究中，發(fā)現(xiàn)HBeAg血清轉(zhuǎn)換以及后期可能出現(xiàn)的病毒突破，與HBV DNA、HBeAg及ALT也有類似的關(guān)系。Lu H等對48例接受阿德福韋酯治療的HBeAg陽性CHB患者隨訪5年的結(jié)果顯示，基線HBeAg滴度越低（＜800 s/co），HBV DNA水平越低（＜109 copies/mL），ALT水平越高（＞5倍上限），獲得HBeAg轉(zhuǎn)換率的幾率越大[15]。這也與本文的研究結(jié)果一致，完全應(yīng)答組與非完全應(yīng)答組的HBV DNA和HBeAg水平在基線時即有統(tǒng)計學(xué)差異。提示抗病毒治療應(yīng)優(yōu)化對患者的選擇。

表2 HBV DNA水平、HBeAg定量水平及其變化對預(yù)測96周完全應(yīng)答的價值

本研究中，完全應(yīng)答組治療過程中各隨訪點的HBeAg定量水平的變化與同時期的HBV DNA定量的變化均有相關(guān)性?；€、12周、24周、48周HBV DNA及HBeAg水平可預(yù)測96周完全應(yīng)答。12周、24周、48周HBV DNA及HBeAg定量的變化也可預(yù)測96周完全應(yīng)答。抗病毒治療早期HBeAg的水平及其變化的效能優(yōu)于HBV DNA的水平及其變化。這與黃晶等多人多項研究的結(jié)果相似[16-19]。

Yen等[20]報道，定量HBeAg測定能預(yù)測未發(fā)生HBeAg血清轉(zhuǎn)換患者病毒突破的出現(xiàn)。本研究也觀察了所有患者HBV DNA、HBeAg與隨訪結(jié)束時發(fā)生病毒學(xué)突破的關(guān)系。結(jié)果顯示：12周、48周HBVDNA和HBeAg水平，12周、24周HBeAg定量水平的變化均能預(yù)測96周時患者發(fā)生病毒學(xué)突破，但12周HBeAg定量水平的變化預(yù)測效能最強。

因此，本研究的數(shù)據(jù)說明：接受抗病毒治療前，患者的HBeAg定量水平及HBV DNA水平越低，越有利于96周時達(dá)到完全應(yīng)答。提示在抗病毒治療前，對患者的優(yōu)化選擇，有利于達(dá)到滿意的治療效果。而在抗病毒治療過程中除了檢測HBV DNA定量水平的變化，加強對HBeAg水平監(jiān)測，觀察HBeAg水平的動態(tài)變化，對預(yù)測慢性乙肝患者抗病毒治療能否獲得完全應(yīng)答，以及后期是否會出現(xiàn)病毒突破也有較大的價值?？梢灾笇?dǎo)慢乙肝抗病毒方案的選擇和調(diào)整，達(dá)到優(yōu)化治療的目的。

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（2016-07-31收稿）

Evaluation of the therapeutic effect of Adefovir using quantitative analysis of HBeAg on chronic hepatitis B

Ling Ning1，Liu Yi1，Peng Mingli21Department of Infectious Disease of the 2ndAffiliated Hospital；2Institute for Viral Hepatitis,the Chongqing Medical University,Chongqing,400010,China

Objective：To investigate the value of using quantitative serum HBeAg(hepatitis B e antigen)for evaluating the antivirus efficacy in HBeAg positive CHB(chronic hepatitis B)patients treated with adefovir dipivoxil.Methods：Fifty seven HBeAg-positive chronic hepatitis B patients treated with adefovir dipivoxil were enrolled and followed up for 96 weeks.Serum HBV DNA load,quantitative HBeAg and ALT levels were detected at baseline,week 12,24,48 and 96 respectively.Results：After 96 weeks,patients were divided into either complete response group when their ALT level was normal,HBV DNA load was less than the detective values, and HBeAg was converted,or incomplete response group otherwise.Fifteen cases were complete response while 42 cases were incomplete response.①There was statistically significant difference between the two groups at baseline level of HBV DNA and HBeAg（P＜0.01）.Compared to the incomplete response group,HBV DNA and quantitative HBeAg levels were significantly lower in complete response group at 24,48 weeks and 96 weeksrespectively(P＜0.05)，②In complete response group,at 12 weeks,24 weeks and 48 weeks,the changes of HBeAg were associated with the changes of HBV DNA and HBeAg seroconversion at 96 weeks in the same period (P＜0.05)，③In complete response group,HBeAg levels at baseline,12 weeks,24 weeks and 48 weeks could be used to predict whether a patient would have a complete response at 96 weeks,AUC were 0.977,0.977,0.992, 0.953 respectively(P＜0.01),the sensitivity were 100%in all time points and specificity were 96.87%,93.75%, 96.87%,90.62%respectively.Tha changes of HBeAg at 12 weeks,24 weeks and 48 weeks could be used to predict complete response at 96 weeks,with AUC were 0.969,0.992,0.953 respectively(P＜0.01),sensitivity were all 100%in each time point,and specificity of 93.75%,96.87%,90.62%respectively.④HBV DNA levels, HBeAg levels,and changes of HBeAg at 12 weeks and 24 weeks could be used to predict whether a patient would have a viral breakthrough at the end of the follow-up.Conclusion：①HBV DNA and HBeAg levels at baseline can be used to predict the complete response at 96 weeks,which helps to optimize the antivirus treatment and choose suitable patients.②HBeAg levels at 12,24 and 48 weeks and their changes can be used to predict the complete response at 96 weeks.The level of HBeAg level is a better predictor than that of HBV DNA.③The changes of HBeAg at 12 and 24 weeks can be used to predict whether a patient will have virological breakthrough at the end of the follow-up and are better predictors than the absolute values of HBeAg at the same period.

Chronic hepatitis B;Therapy；Hepatitis B antigen quantitative detection;Prognosis；Adefovir dipivoxil

R512.62

A

10.3969/j.issn.1000-2669.2016.05.010

*重慶市衛(wèi)計委醫(yī)學(xué)科研項目（2008-2-193）

凌寧（1973-），女，博士。E-mail：zjlovelning@sina.com