吳觀土　李波

[摘要] 目的 探討慢性睪丸疼痛大鼠外周痛閾變化及其意義。 方法 選擇24只Wistar大鼠，根據(jù)隨機數(shù)字表法分為對照組、模型組及假手術(shù)組，模型組采用免疫誘導(dǎo)法建立大鼠睪丸纖維化慢性疼痛模型，造模前及造模10周后檢測3組大鼠的外周熱刺激潛伏期（HPL）、機械刺激閾值（PWT）。比較3組大鼠的HPL、PWT。 結(jié)果 3組大鼠造模前的外周HPL、PWT差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），造模10周后，對照組及假手術(shù)組的HPL、PWT較造模前無明顯變化，模型組的HPL短于造模前，HPL低于造模前（P<0.05）；造模10周后，模型組的HPL短于對照組及假手術(shù)組，PWT低于對照組及假手術(shù)組（P<0.05），對照組及假手術(shù)組的HPL、PWT差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。 結(jié)論 慢性睪丸疼痛大鼠外周疼痛閾值降低，其可能同慢性疼痛的致敏作用有關(guān)。

[關(guān)鍵詞] 慢性睪丸疼痛；睪丸纖維化；外周痛閾；熱刺激潛伏期；機械刺激閾值

[中圖分類號] R332 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-4721（2016）02（c）-0043-03

[Abstract] Objective To investigate the change of peripheral pain threshold in rats with chronic orchialgia and it significance. Methods 24 Wistar rasts were selected and divided into control group，model group and sham operation group.Model group was given immune induction way to make the chronic pain model of testicular fibrosis.Peripheral hot plate latency （HPL） and paw withdrawal threshold （PWT） was detected respectively before modeling and after 10 weeks modeling.HPL and PWT among three groups was compared respectively. Results There was no statistical difference of peripheral HPL and PWT before modeling among three groups （P>0.05）.After 10 weeks modeling，compared with before modeling，HPL and PWT had no obvious change after 10 weeks modeling in control group and sham operation group，HPL of model group was shorter than that before modeling，PWT was lower than that before modeling （P<0.05）；after 10 weeks modeling，HPL of model group was shorter than that of control group and sham operation group （P<0.05），PWT was lower than that of control group and sham operation group （P<0.05）.There was no significant difference in control group and sham operation group （P>0.05）. Conclusion Periphera pain threshold is decreased in rats with chronic orchialgia，and it may be related to the sensitization role of chronic pain.

[Key words] Chronic orchialgia；Testicular fibrosis；Peripheral pain threshold；Hot？plate latency；Paw withdrawal threshold

慢性睪丸疼痛是臨床常見的泌尿系統(tǒng)疾病，多病程持久，對患者的生活及工作影響較大，臨床治療也頗為困難，嚴(yán)重者甚至需要切除睪丸及附睪進(jìn)行治療，存在影響患者性能力、生殖能力的風(fēng)險[1]。近年來的研究表明[2-4]，局部的慢性疼痛能夠引起全身的反應(yīng)，如內(nèi)分泌失衡及神經(jīng)心理障礙等，其與慢性疼痛引起的內(nèi)分泌神經(jīng)機制的變化有關(guān)，為進(jìn)一步探討慢性睪丸疼痛對外周痛閾的影響，本文就慢性睪丸疼痛大鼠模型外周痛閾的變化進(jìn)行研究。

1 材料與方法

1.1 材料及儀器

動物實驗臺、電子天平、移液器、DM.7-YLS-21A冷熱板測痛儀（北京達(dá)美科技有限公司），Vonfrey絲測痛套件（Aesthesio，Danmic/美國），研磨器，百日咳桿菌、卡介苗、生理鹽水等。

1.2 造模方法及分組

選擇24只Wistar大鼠（中山大學(xué)動物實驗室），清潔級，4周齡，（200±25）g，室溫飼養(yǎng)，定量給食，自由飲水，間隔光照，適應(yīng)環(huán)境后隨機分為對照組、假手術(shù)組及模型組，每組8支，分籠飼養(yǎng)，模型組采用免疫誘導(dǎo)法建立睪丸纖維化慢性疼痛模型[5]，模型組及假手術(shù)組取左側(cè)睪丸，稱重，研磨搗碎，加0.9%氯化鈉溶液制成勻漿，濃度為0.5 g/ml，采用等體積福氏佐劑乳化，制備大鼠睪丸組織抗原，大鼠夾脊部位注射0.8 ml致敏大鼠，模型組同時股靜脈注射百日咳桿菌1×1010個，同時右側(cè)睪丸注射卡介苗0.1 ml，間隔15 d重復(fù)免疫2次，假手術(shù)組大鼠模擬免疫過程采用生理鹽水。對照組大鼠采用空白對照，不給予藥物及手術(shù)干預(yù)。3組大鼠分別飼養(yǎng)10周。

1.3 熱刺激潛伏期（HPL）測定

HPL測定采用DM.7-YLS-21A冷熱板測痛儀，分別與造模前及造模10周后進(jìn)行，檢測時間為上午8：00～12：00，大鼠置于室溫25℃適應(yīng)環(huán)境30 min，冷熱板測痛儀設(shè)定溫度（52±0.5）℃，預(yù)熱至恒定溫度后，大鼠置于測痛儀觀察箱檢測平板上，觀察大鼠舔爪情況，大鼠放置檢測平板至舔爪時間記錄為HPL，隔日檢測，共檢測3次，取平均值。

1.4 機械刺激閾值測定

機械痛閾值測定采用Vonfrey絲測痛套件，分別與造模前及造模10周后進(jìn)行，檢測時間為上午8：00～12：00，大鼠置于室溫25℃適應(yīng)環(huán)境30 min，放置于1 mm×1 mm的網(wǎng)格底部的檢測箱內(nèi)，20 min大鼠適應(yīng)環(huán)境安靜后，自下往上采用不同刻度的Vonfrey絲刺激大鼠足底部，逐漸增加刺激強度，直至大鼠縮足舔爪的強度，間隔15 min重復(fù)刺激3次均為陽性的刺激強度為機械刺激閾值（PWT），3次取平均值。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理

數(shù)據(jù)采用SPSS 11.5統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行分析，計量資料采用方差分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3組大鼠造模前后HPL的比較

3組大鼠造模前的HPL差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），造模10周后，對照組及假手術(shù)組的HPL較造模前無明顯變化，模型組的HPL短于造模前（P<0.05）；造模10周后，模型組的HPL短于對照組及假手術(shù)組（P<0.05），對照組及假手術(shù)組的HPL差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）（表1）。

2.2 3組大鼠造模前后PWT的比較

3組大鼠造模前的PWT差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），造模10周后，對照組及假手術(shù)組的PWT較造模前無明顯變化，模型組的PWT低于造模前（P<0.05）；造模10周后，模型組的PWT低于對照組及假手術(shù)組（P<0.05），對照組及假手術(shù)組的PWT無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）（表2）。

3 討論

慢性睪丸疼痛是臨床常見的泌尿外科疾病，又稱為頑固性睪丸疼痛，病程呈現(xiàn)慢性進(jìn)展過程，其發(fā)病機制目前尚缺乏統(tǒng)一的認(rèn)識，有學(xué)者認(rèn)為，慢性睪丸疼痛與睪丸支配節(jié)段神經(jīng)元的感染、沃勒變性和α2-腎上腺受體激活有關(guān)，這些部位的神經(jīng)元的病變可能導(dǎo)致其對神經(jīng)末梢的傳入信號過度敏感，引發(fā)慢性疼痛[6-7]，也有人認(rèn)為，與睪丸的慢性病變導(dǎo)致的神經(jīng)末梢刺激以及精索靜脈曲張時精索內(nèi)溫度過高引起伴行的生殖股神經(jīng)缺血、缺氧引起的損傷有關(guān)[8-9]。由于目前對發(fā)病機制缺乏統(tǒng)一的認(rèn)識，臨床治療也頗為困難，患者往往病程較長，反復(fù)采用非甾體類抗炎藥物鎮(zhèn)痛治療，能夠緩解部分臨床癥狀，但多難以取得滿意的效果，患者的疼痛往往呈現(xiàn)慢性漸進(jìn)性發(fā)展，最終影響其工作和生活，甚至需要進(jìn)行精索靜脈結(jié)扎、神經(jīng)離斷、附睪切除等外科治療[10-11]，而且慢性睪丸疼痛的臨床療效目前尚存在爭議，是泌尿外科及男科頗為棘手的慢性疾病。

慢性疼痛的發(fā)生目前認(rèn)為與刺激信號引起外周脊髓背根神經(jīng)和大腦中樞神經(jīng)致敏有關(guān)。慢性疼痛對機體的影響不僅與局部的疼痛刺激有關(guān)，而且對相關(guān)的外周和中樞神經(jīng)致敏作用能夠引起全身神經(jīng)內(nèi)分泌機制變化和相應(yīng)脊髓節(jié)段的神經(jīng)功能異常[12-14]，如有研究發(fā)現(xiàn)[15-16]，在慢性前列腺炎盆腔疼痛綜合征的大鼠脊髓中，炎性介質(zhì)的表達(dá)明顯升高，而且與相應(yīng)脊髓節(jié)段支配區(qū)域的痛覺過敏有關(guān)，而在脊髓損傷的大鼠，其中樞性疼痛程度與脊髓背根中P物質(zhì)的表達(dá)有關(guān)，說明脊髓背根神經(jīng)及其遞質(zhì)的表達(dá)水平變化在慢性疼痛致敏的發(fā)生過程中具有重要的作用，而且能夠引起對應(yīng)部位的牽涉痛或者器官功能障礙，甚至由于中樞神經(jīng)遞質(zhì)的表達(dá)變化引起情感障礙[17-18]，并發(fā)抑郁或焦慮等情感或心理障礙，可見慢性疼痛對機體的影響是廣泛的，不僅表現(xiàn)在對生理功能的影響，也表現(xiàn)在對心理功能的影響，其對生理功能的影響可能在相應(yīng)脊髓支配的牽涉部位表現(xiàn)得更明顯。本研究在對慢性睪丸疼痛大鼠模型的研究中發(fā)現(xiàn)，慢性睪丸疼痛大鼠模型外周痛閾發(fā)生明顯變化，造模10周后，模型組大鼠的HPL較對照組及假手術(shù)組縮短，PWT較對照組及假手術(shù)組降低，說明慢性睪丸疼痛刺激對大鼠外周熱刺激及機械刺激痛覺具有易化作用，可引起大鼠外周痛閾降低，其可能與慢性疼痛刺激對脊髓背根神經(jīng)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)的致敏作用有關(guān)[19-20]。既往的研究證實[21-23]，在疼痛發(fā)生時，脊髓背根神經(jīng)中多種與疼痛刺激相關(guān)的蛋白表達(dá)發(fā)生變化，并且與疼痛致敏作用有關(guān)，能夠為相關(guān)蛋白的拮抗劑拮抗，其可能在慢性睪丸疼痛時外周痛閾變化的過程中起關(guān)鍵作用。

綜上所述，慢性睪丸疼痛大鼠外周疼痛閾值降低，其可能與慢性疼痛的致敏作用有關(guān)。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 關(guān)宗杰，魏紅星.睪丸神經(jīng)切除術(shù)治療頑固性睪丸疼痛的療效觀察（附5例報告）[J]. 現(xiàn)代泌尿外科雜志，2008，13（6）：58.

[2] 劉銜華.慢性疼痛患者的記憶功能損傷及其神經(jīng)心理機制[J].中國康復(fù)醫(yī)學(xué)雜志，2013，28（11）：1075-1078.

[3] 趙陽，馮晨秋，婁鳳蘭.社區(qū)老年慢性疼痛患者心理健康狀況及影響因素[J].中國疼痛醫(yī)學(xué)雜志，2015，21（3）：224-227.

[4] 董宏然，楊彬奎，李啟芳.慢性軟組織損害性疼痛外周不同組織中P物質(zhì)表達(dá)的研究[J].中國疼痛醫(yī)學(xué)雜志，2015， 21（4）：304-308.

[5] 王濤，馬毓梅，修賀明，等.大鼠睪丸纖維化模型的建立[J].中華男科學(xué)，2002，8（4）：266-269.

[6] Masarani M，Cox R.The aetiology，pathophysiology and management of chronic orchialgia[J].BJU Int，2003，91（5）：435-437.

[7] Singh V，Sinha RJ.Idiopathic chronic orchialgia—a frustrating issue for the clinician and the patient[J].Indian J Surg，2008，70（3）：107-110.

[8] Kass EJ，Marcol B.Results of varicocele surgery in adolescents：a comparison of techniques[J].J Urol，1992，148（2 Pt 2）：694-696.

[9] 吳觀土.顯微手術(shù)聯(lián)合微血管多普勒超聲監(jiān)測治療慢性睪丸疼痛臨床分析[J].現(xiàn)代診斷與治療，2015，26（16）：3790-3792.

[10] 張志成，李明超，王濤，等.精索顯微去神經(jīng)術(shù)治療慢性睪丸疼痛1例報告并文獻(xiàn)復(fù)習(xí)[J].臨床泌尿外科雜志，2013，28（11）：860-861.

[11] 李保印，卜宏民.慢性睪丸附睪疼痛的中西醫(yī)結(jié)合治療[J].河南醫(yī)藥信息，1996，4（10）：45-46.

[12] 劉迎嘉，宋國宏，張晨，等.P物質(zhì)、c-fos在慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛綜合征大鼠脊髓中的表達(dá)[J].中華男科學(xué)雜志，2015，21（8）：681-686.

[13] 張滸，楊文燕，張小梅，等.氯諾昔康對慢性疼痛大鼠腦脊液谷氨酸含量的影響[J].云南醫(yī)藥，2009，30（3）：281-283.

[14] 宋莉，宋學(xué)軍.慢性疼痛的研究模型、外周和脊髓機制及臨床治療進(jìn)展[J].中國疼痛醫(yī)學(xué)雜志，2015，21（1）：2-7.

[15] 劉志芳，戴紅，高秀來，等.脊髓損傷后慢性中樞性疼痛與脊髓背角P物質(zhì)關(guān)系研究[J].中國康復(fù)理論與實踐，2003，9（12）：719-781.

[16] 林健清，林財珠，林獻(xiàn)忠，等.脊髓膠質(zhì)細(xì)胞及前炎性細(xì)胞因子在慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛綜合征大鼠中的作用及機制[J].中國實用醫(yī)藥，2011，6（23）：1-3.

[17] 史繼紅，王昆，李成文，等.慢性廣泛性疼痛患者的臨床特征、焦慮抑郁及述情障礙[J].中國臨床心理學(xué)雜志，2014，22（1）：107-109，114.

[18] 羅盛.慢性疼痛與心理障礙[J].醫(yī)學(xué)與哲學(xué)，2014，35（12B）：17-20.

[19] 陳勇，張建華，趙濤，等.大鼠前列腺炎模型中背根神經(jīng)節(jié)TRPV1和NGF的表達(dá)[J].重慶醫(yī)學(xué)，2012，41（4）：325-326，329.

[20] 謝文杰，孫庭，楊小榮，等.腦鈉肽及其受體在慢性前列腺炎大鼠脊髓背角神經(jīng)節(jié)中的表達(dá)[J].中華男科學(xué)雜志，2012，18（3）：204-207.

[21] Ji RR，Woolf CJ.Neuronal plasticity and signal transduction in nociceptive neurons：implications for the initiation and maintenance of pathological pain[J].Neurobiol Dis，2001，8（1）：1-10.

[22] 劉樹珍，于劍鋒.神經(jīng)病理性疼痛引起成年大鼠空間記憶損害和內(nèi)側(cè)前額葉的NMDA 受體NR2B亞基下調(diào)表達(dá)[J].中國疼痛醫(yī)學(xué)雜志，2015，21 （1）：21-27.

[23] 索占偉，楊嫻，曹靜，等.脊髓背角PKC在慢性炎性疼痛中的作用及其機制[J].中國藥理學(xué)通報，2011，27（3）：316-319.

（收稿日期：2015-10-29 本文編輯：許俊琴）