張明杰, 李 恒, 蔣 敏, 郝 瑤, 許正宏, 史勁松

(江南大學(xué) 藥學(xué)院, 江蘇 無(wú)錫 214122)

低分子質(zhì)量褐藻寡糖的高效酶法制備及其抗氧化活性評(píng)價(jià)

張明杰, 李 恒, 蔣 敏, 郝 瑤, 許正宏, 史勁松

(江南大學(xué) 藥學(xué)院, 江蘇 無(wú)錫 214122)

褐藻寡糖具有多種生理活性, 本研究通過(guò)酶解與分級(jí)條件的優(yōu)化, 獲得了低分子質(zhì)量褐藻寡糖的酶法制備工藝, 并在體外模型上評(píng)價(jià)了不同分子質(zhì)量組分的抗氧化活性。結(jié)果表明, 優(yōu)化后的褐藻寡糖制備條件為: 底物濃度1.20%, 酶底比4.35 U/mg, 酶解時(shí)間4 h。進(jìn)一步采用乙醇沉淀和超濾分離后, 獲得了重均分子質(zhì)量分別為0.84、1.40、2.25和34.56 kDa的4種組分, 其得率分別為50.82%、5.15%、11.48%和12.00%。各組分均具有一定的還原能力, 可有效清除DPPH和羥自由基, 其中低分子質(zhì)量組分A的抗氧化活性最為顯著, 其清除羥自由基的能力與維生素C相近。

褐藻寡糖; 制備工藝; 乙醇沉淀; 超濾; 抗氧化

褐藻寡糖主要由褐藻類(lèi)植物細(xì)胞壁中的褐藻膠降解獲得, 與多糖形式相比, 褐藻寡糖具有更高的溶解度和生物利用度, 有著抗氧化、免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤等多種生物活性[1-8]。其中, 抗氧化活性是其他生物活性產(chǎn)生的基礎(chǔ)[9], 能夠減緩生物體內(nèi)活性氧自由基所造成的細(xì)胞和組織損傷。相關(guān)研究也顯示, 自由基的過(guò)量產(chǎn)生和累積與癌癥、帕金森病等一系列疾病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[10-11], 而褐藻寡糖對(duì)上述疾病均有一定程度的改善作用。因此, 對(duì)褐藻寡糖的抗氧化性進(jìn)行評(píng)價(jià), 可以指導(dǎo)其生產(chǎn)工藝, 也可為產(chǎn)品開(kāi)發(fā)提供依據(jù)。

研究表明, 褐藻寡糖的抗氧化活性不僅與其制備方式、M/G比例等相關(guān), 還與組分的分子質(zhì)量大小相關(guān)[12-16]。Zhao等[17]通過(guò)酶解制備得到三種褐藻寡糖, 其中分子質(zhì)量低于1.0 kDa的組分具有較強(qiáng)的羥自由基清除能力, 且分子質(zhì)量大小對(duì)抗氧化性能的影響程度要大于M/G比值。目前, 褐藻寡糖作為功能因子已受到較多關(guān)注, 需要建立一種高效、安全、簡(jiǎn)便的低分子質(zhì)量褐藻寡糖的制備工藝來(lái)推動(dòng)其產(chǎn)業(yè)進(jìn)程。本研究以海藻酸鈉為原料, 通過(guò)褐藻膠裂解酶水解方法制備褐藻寡糖, 在水解條件優(yōu)化的基礎(chǔ)上, 利用乙醇沉淀和超濾方法對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行分級(jí)分離,對(duì)所獲得的4種組分進(jìn)行抗氧化活性分析。

1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

褐藻膠裂解酶: 由嗜鹽白蟻菌WX (Isoptericola halotolerans WX)發(fā)酵產(chǎn)酶[18-19], 純化得到酶液, 酶活為870 U/mL; 海藻酸鈉、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、無(wú)水乙醇、酒石酸鉀鈉、3, 5-二硝基水楊酸、氫氧化鈉、苯酚、亞硫酸氫鈉等購(gòu)自國(guó)藥化學(xué)試劑有限公司; 抗壞血酸(Vitamin C, VC)、1, 1-二苯基-2-三硝基苯肼(2, 2-diphenyl-1-picrylhydrazyl, DPPH)、鐵氰化鉀、鄰苯三酚、鹽酸、水楊酸均為分析純。二到七糖標(biāo)準(zhǔn)品, 購(gòu)自青島博智匯力生物科技公司。

DNS試劑: 準(zhǔn)確稱(chēng)取酒石酸鉀鈉 244.40 g加入煮沸的500 mL蒸餾水中溶解, 然后依次加入6 g 3, 5-二硝基水楊酸, 21 g氫氧化鈉, 5 g苯酚和5 g亞硫酸氫鈉, 攪拌溶解后定容至1 L, 在棕色瓶中貯存7~10 d后使用。

TLC展開(kāi)劑: 由正丁醇、甲酸、水按4︰6︰1配制; 顯色劑: HCl 1 mL, 苯胺 2 mL, 二苯胺2 g, 85%磷酸10 mL, 溶于100 mL丙酮中, 棕色瓶?jī)?chǔ)存。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器

恒溫水浴鍋: 金壇市富華電器有限公司; Milli-Q超濾裝置: Milford公司; 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀: 德國(guó)Heidolph公司; 真空冷凍干燥機(jī): 美國(guó)Labconco公司; 恒溫磁力攪拌器: 鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 褐藻寡糖的酶法制備工藝研究

2.1.1 酶解時(shí)間的影響

以50 mmol/L pH 7.0的磷酸緩沖液配制10 mL 1%(W/V)海藻酸鈉溶液, 加入2 mL酶液。40℃下分別水解1~9 h, 反應(yīng)結(jié)束后測(cè)定還原糖含量。

2.1.2 酶底比的影響

以50 mmol/L pH 7.0的磷酸緩沖液配制10 mL 1%(W/V)海藻酸鈉溶液, 分別加入不同體積的酶液,在40℃下水解4.0 h, 通過(guò)測(cè)定反應(yīng)結(jié)束后的還原糖含量, 考察不同酶底比水解效果的影響。

2.1.3 底物濃度對(duì)酶解效果的影響

以50 mmol/L pH 7.0的磷酸緩沖液分別配制0、0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%、1.2%、1.4%、1.6%、1.8%、2.0%(W/V)海藻酸鈉溶液, 按最適加酶量和水解時(shí)間考察底物濃度的影響。

2.2 DNS法測(cè)定還原糖含量

2.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線制作

準(zhǔn)確稱(chēng)取10 mg無(wú)水葡萄糖醛酸溶解定容至100 mL。分別吸取0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0 mL標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖醛酸溶液, 用去離子水補(bǔ)至1 mL, 各加入1 mL DNS, 沸水浴3 min, 立即冷卻定容至10 mL, 520 nm處測(cè)定吸光值。以1 mL去離子水按同樣顯色操作為空白, 以橫坐標(biāo)為葡萄糖醛酸含量(mg), 縱坐標(biāo)為吸光值, 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2.2.2 酶解樣品還原糖含量測(cè)定方法

分別取1 mL降解產(chǎn)物, 用同樣的方法測(cè)定吸光度值, 帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算其還原糖含量。

2.3 咔唑-硫酸法測(cè)定總糖含量

2.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線制作

準(zhǔn)確稱(chēng)取20 mg葡萄糖醛酸溶解定容至50 mL,分別吸取0、0.05、0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.35、0.4 mL標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖醛酸溶液, 用去離子水補(bǔ)至1 mL,冰浴條件下加入5mL 0.025 mol/L H2SO4-四硼酸鈉溶液, 混勻后在沸水浴中加熱25 min, 冷卻至室溫后加入0.2 mL 0.1%咔唑-無(wú)水乙醇溶液, 震蕩搖勻, 沸水浴加熱15 min, 冷卻至室溫, 520 nm處測(cè)定吸光度值, 以橫坐標(biāo)為葡萄糖醛酸含量(mg), 縱坐標(biāo)為吸光度值, 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2.3.2 酶解樣品總糖含量測(cè)定方法

分別取1 mL降解產(chǎn)物, 用同樣的方法測(cè)定吸光度值, 帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算其總糖。

2.4 低聚糖樣品的平均聚合度

2.5 低分子質(zhì)量褐藻寡糖的分級(jí)制備

褐藻寡糖水解液經(jīng)10 000 r/min離心5 min去除沉淀, 加入無(wú)水乙醇至60%(V/V), 4℃靜置過(guò)夜, 離心收集上清, 經(jīng)濃縮、凍干后得到組分A。離心所得沉淀經(jīng)去離子水復(fù)溶后, 依次通過(guò)截留分子質(zhì)量10 kDa和3 kDa的中空纖維膜進(jìn)行超濾處理, 再分別經(jīng)濃縮、凍干得到10 kDa膜截留組分(D)、3 kDa膜截留組分(C)和3 kDa透過(guò)組分(B)。

2.6 重均分子質(zhì)量分析

采用高效凝膠滲透色譜(HPGPC)法檢測(cè)并分析褐藻寡糖平均分子質(zhì)量, 以不同分子質(zhì)量葡聚糖標(biāo)準(zhǔn)品制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。色譜柱為Shodex Ohpak SB-803HQ (8.0 mm×300 mm), 流動(dòng)相為0.1 mol/L Na2SO4, 流速為0.5 mL/min, 檢測(cè)器為示差折光檢測(cè)器, 采用Chemstation色譜工作站和GPC軟件計(jì)算分子質(zhì)量。

2.7 褐藻寡糖抗氧化性活性測(cè)定

2.7.1 DPPH自由基清除能力的測(cè)定

用無(wú)水乙醇配制成0.04 g/L DPPH溶液。分別取2 mL不同濃度的褐藻寡糖和多糖(2、4、6和8 g/L)溶液, 加入等體積的DPPH溶液, 混合均勻后室溫放置30 min, 5000 r/min離心10 min后取上清液于517 nm處測(cè)定吸光值。以維生素C(VC)作為陽(yáng)性對(duì)照。樣品對(duì)DPPH自由基的清除率用以下公式計(jì)算:

A0—無(wú)水乙醇與DPPH溶液混合液的吸光值;

A1—樣品溶液與DPPH溶液混合液的吸光值;

A2—樣品溶液與無(wú)水乙醇混合液的吸光值。

2.7.2 羥自由基(·OH)清除率的測(cè)定

分別吸取1 mL的9 mmol/L FeSO4和9 mmol/L水楊酸-乙醇溶液, 依次加入1 mL不同濃度褐藻寡糖和多糖(2、4、6和8 g/L)的溶液和1 mL 8.8 mmol/L H2O2, 37℃反應(yīng)30 min, 以蒸餾水為對(duì)照, 于510 nm處測(cè)定吸光值。以VC作為陽(yáng)性對(duì)照。樣品吸光值為測(cè)定吸光值減去不加H2O2時(shí)的溶液本底吸光值。按下式計(jì)算羥自由基清除率:

A0—空白對(duì)照液的吸光值; Ax—加入樣品溶液后扣除本底的吸光值;

Ax0—不加顯色劑H2O2樣品溶液本底的吸光值。

2.7.3 總還原能力的測(cè)定

分別吸取2.5 mL 0.2 mol/L的磷酸緩沖液(pH 6.6)和1 mL不同濃度褐藻寡糖和多糖(2、4、6和8 g/L)的溶液, 加入2.5 mL 1%鐵氰化鉀, 混合均勻后于50℃反應(yīng)20 min, 加入2.5 mL 10%三氯乙酸終止反應(yīng)。反應(yīng)液經(jīng)5000 r/min離心10 min后取2.5 mL上清液,依次加入2.5 mL蒸餾水和0.5 mL FeCl3, 混勻后靜置10 min, 于700 nm處測(cè)定吸光值。以VC作為陽(yáng)性對(duì)照。

3 結(jié)果與分析

3.1 褐藻寡糖酶法制備工藝優(yōu)化

3.1.1 酶解時(shí)間對(duì)降解效果的影響

酶解過(guò)程中, 隨時(shí)間的推移, 酶解所得褐藻低聚糖的平均聚合度也隨之快速下降(圖1)。酶解4 h后, 低聚糖的平均聚合度趨于平穩(wěn), 其平均聚合度為24.42左右。進(jìn)一步延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間, 底物的轉(zhuǎn)化率有所增加, 但從生產(chǎn)效率角度考慮, 適宜的酶解時(shí)間4 h。

圖1 時(shí)間對(duì)海藻酸鈉水解效果的影響Fig. 1 Effect of hydrolysis time on sodium alginate hydrolysis

3.1.2 酶底比對(duì)降解效果的影響

從圖2可以看出, 在海藻酸鈉降解過(guò)程中, 褐藻低聚糖平均聚合度隨著加酶量的提高而逐漸降低。在酶用量4.35 U/mg時(shí), 酶解所得低聚糖的平均聚合度值近似達(dá)到穩(wěn)定, 為16.95。繼續(xù)增加酶量時(shí)平均聚合度變化并不顯著, 所以選擇最適加酶量為4.35 U/mg。

圖2 酶底比對(duì)海藻酸鈉水解效果的影響Fig. 2 Effect of the ratio of enzyme and substrate addition on sodium alginate hydrolysis

3.1.3 底物濃度對(duì)降解效果的影響

海藻酸鈉的水溶液具有高粘度特性, 且隨底物濃度增加, 溶液黏度呈幾何級(jí)數(shù)上升[20]。因此在能夠保證均勻攪拌的前提下, 底物濃度一般低于2%, 否則呈現(xiàn)凝膠狀態(tài)。實(shí)驗(yàn)考查了不同底物濃度下的水解效果(圖3), 發(fā)現(xiàn)海藻酸鈉濃度為1.2%時(shí), 所得低聚糖的平均聚合度最低, 平均聚合度為9.84, 水解率最高; 之后平均聚合度不再顯著變化。

圖3 底物濃度對(duì)海藻酸鈉水解效果的影響Fig. 3 Effect of substrate concentration on sodium alginate hydrolysis

3.2 低分子質(zhì)量褐藻寡糖的制備工藝

實(shí)驗(yàn)采用乙醇沉淀與超濾法對(duì)酶解后的褐藻寡糖進(jìn)行分級(jí)分離。如圖4所示, 采用TLC對(duì)4種組分進(jìn)行分析, 組分A主要由聚合度2-7的褐藻寡糖組成, 推測(cè)其平均分子質(zhì)量小于1.50 kDa; 組分B、C、D分子質(zhì)量較大, 僅有少量的2-7的褐藻寡糖。

圖4 4種組分TLC圖譜Fig. 4 TLC profile of alginate oligosaccharides

進(jìn)一步采用HPGPC法檢測(cè)各組分分子質(zhì)量, HPGPC圖譜如圖5所示。4種樣品中均含有多個(gè)分子質(zhì)量分布的寡糖片段。組分A中主要含重均分子質(zhì)量為0.48 kDa的組分; 組分B中主要含重均分子質(zhì)量為5.03 kDa的組分; 組分C中主要含重均分子質(zhì)量為3.68 kDa的組分; 組分D中主要含重均分子質(zhì)量為51.15kDa和68.23 kDa的兩個(gè)組分。

依據(jù)Chemstation色譜工作站和GPC軟件計(jì)算得到4種組分的重均分子質(zhì)量(Mw), 如表1所示。褐藻寡糖(平均聚合度<13)的總得率達(dá)到67.45%, 其中,組分A得率最高, 達(dá)到50.82%。結(jié)合制備工藝分析可知, 利用60%的乙醇沉淀, 可以一步得到重均分子質(zhì)量0.84 kDa的較低分子質(zhì)量褐藻寡糖組分, 得率達(dá)到50%以上; 進(jìn)一步結(jié)合膜分離的方法, 雖無(wú)法對(duì)不同分子質(zhì)量低聚糖進(jìn)行精確分離, 但可高效率的得到較低分子質(zhì)量的寡糖部分, 并實(shí)現(xiàn)不同分子質(zhì)量分布低聚糖的有效分級(jí)。

由以上酶解與分級(jí)分離過(guò)程得到低分子質(zhì)量褐藻寡糖的制備工藝, 如圖6所示:

3.3 褐藻寡糖體外抗氧化能力

3.3.1 褐藻寡糖對(duì)DPPH的清除能力

DPPH是一種穩(wěn)定的自由基, 可用來(lái)衡量物質(zhì)的抗氧化能力[21]。表2顯示了原料和經(jīng)過(guò)分級(jí)處理的4種組分的DPPH清除活性, 結(jié)果表明, 酶解得到的4種組分均具有一定的DPPH清除活性, 且清除作用均隨濃度的升高而增強(qiáng)。其中, 組分A對(duì)DPPH清除能力顯著高于其他三種組分。當(dāng)組分A濃度為6 g/L時(shí), 清除率達(dá)到最高, 為78.65%。組分A對(duì)DPPH自由基的半抑制濃度IC50為0.79 g/L。Liu等[22]研究了氧化法降解得到的褐藻寡糖體外抗氧化活性,其在2.50 g/L時(shí)對(duì)DPPH的清除率為40.40%。相比于化學(xué)降解法, 酶解的褐藻寡糖具有更好的DPPH清除能力, 可能與其酶解過(guò)程中形成雙鍵有關(guān)[3]。

圖5 褐藻寡糖的HPGPC色譜圖Fig. 5 High-performance gel chromatogram profiles of alginate oligosaccharides

圖6 低分子質(zhì)量褐藻寡糖的制備工藝流程圖Fig. 6 Process chart of alginate oligosaccharides

3.3.2 褐藻寡糖對(duì)羥自由基的清除能力

羥自由基是造成組織脂質(zhì)過(guò)氧化、蛋白質(zhì)解聚等的主要活性氧種類(lèi), 羥自由基清除率是反映抗氧化劑的抗氧化作用的重要指標(biāo)[23]。由表3可以看出,海藻酸鈉和4種組分對(duì)羥自由基均具有良好的清除能力。與 DPPH 清除活性相似, 4種組分對(duì)羥自由基的清除能力隨著各自濃度的升高而增強(qiáng)。在同一濃度下, 4種組分對(duì)羥自由基的清除能力均大于海藻酸鈉, 且具有隨分子質(zhì)量降低, 清除能力增大的趨勢(shì)。當(dāng)組分A的濃度為2 g/L時(shí), 可達(dá)到與VC相近的抗氧化結(jié)果, 其IC50為0.50 g/L。周緒霞等[13]研究發(fā)現(xiàn), 分子質(zhì)量小于8 kDa的褐藻寡糖在濃度為1.20 g/L時(shí), 對(duì)羥自由基的清除率達(dá)到75%。與之相比, 組分A達(dá)到75%羥自由基清除率時(shí)的濃度僅為0.59 g/L。由此可見(jiàn), 經(jīng)自行篩選的褐藻膠裂解酶降解制備的低分子量褐藻寡糖具有較強(qiáng)的羥自由基清除能力。

研究表明, 寡糖可能通過(guò)氫電轉(zhuǎn)移機(jī)制引起內(nèi)在單糖基團(tuán)中異頭氫的移動(dòng)而發(fā)揮羥自由基清除活性[24]。一些研究者也認(rèn)為, 醇類(lèi)物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)能有效地清除羥基自由基[25], 由此推測(cè), 褐藻寡糖的羥基基團(tuán)為其羥自由基清除功能的發(fā)揮提供了結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。

3.3.3 褐藻寡糖的還原能力

表4可以看出, 海藻酸鈉和4種組分均表現(xiàn)出一定的還原力。在同等濃度下, 組分A的還原力大于其他各低聚糖組分。這也可以為以上不同分子質(zhì)量低聚糖組分在DPPH和羥自由基清除能力的差異結(jié)果提供依據(jù)。

綜上所述, 酶解得到的4種褐藻低聚糖組分對(duì)DPPH、羥自由基均具有良好的清除作用, 其自身有一定的還原力, 其中, 平均分子質(zhì)量較小的組分A具有最高的抗氧化活性。文獻(xiàn)報(bào)道, 寡糖的分子質(zhì)量是影響其抗氧化活性的一個(gè)重要因素。在硫酸軟骨素、透明質(zhì)酸等的抗氧化活性評(píng)價(jià)中, 低分子質(zhì)量產(chǎn)物均表現(xiàn)出比大分子更高的自由基清除活性, 且不同聚合度低聚糖的活性程度不同。褐藻寡糖抗氧化活性與分子質(zhì)量的關(guān)系與上述結(jié)論一致[26-28]。

表2 各組分的DPPH清除活性Tab. 2 Scavenging effects of alginate oligosaccharides on DPPH

表3 褐藻寡糖對(duì)羥自由基的清除活性Tab. 3 Scavenging effects of alginate oligosaccharides on ·OH

4 結(jié)語(yǔ)

采用自制的褐藻膠裂解酶對(duì)海藻酸鈉溶液進(jìn)行酶解制備褐藻低聚糖, 得到的產(chǎn)物通過(guò)60%乙醇沉淀和超濾法進(jìn)行分級(jí)得到4種分子質(zhì)量不同的組分。通過(guò)HPGPC對(duì)4個(gè)組分的分子量進(jìn)行檢測(cè), 其平均分子質(zhì)量分別為0.84、1.40、2.25和34.56 kDa, 其中, 分子質(zhì)量低于2.25 kDa的褐藻寡糖成分得率達(dá)67.45%, 與文獻(xiàn)結(jié)果相比, 本實(shí)驗(yàn)在酶解效率及低分子量褐藻寡糖的得率方面具有更明顯的優(yōu)勢(shì)[29]。

對(duì)這4種組分的抗氧化活性進(jìn)行評(píng)價(jià), 4個(gè)組分對(duì)DPPH均有一定的清除作用, 并具有劑量依賴(lài)關(guān)系。其中, 平均分子質(zhì)量最小的組分A清除DPPH的能力遠(yuǎn)大于其余各組分, 其IC50為0.79 g/L。此外,組分A具有較強(qiáng)的羥自由基清除活性和還原力, 2 g/L組分A即表現(xiàn)出與0.8 g/L的VC相近的羥自由基清除效果。綜合抗氧化評(píng)價(jià)結(jié)果來(lái)看, 組分A表現(xiàn)出較好的體外抗氧化活性, 也進(jìn)一步說(shuō)明分子質(zhì)量較小的低聚糖具有更強(qiáng)的抗氧化活性, 詳細(xì)的抗氧化機(jī)制以及構(gòu)效關(guān)系還有待深入研究。

表4 褐藻寡糖的還原力Tab. 4 Reducing power of alginate oligosaccharides

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Received:Mar. 15, 2016

Efficient preparation of alginate oligosaccharides by enzymatic hydrolysis and evaluation of antioxidant activities in vitro

ZHANG Ming-jie, LI Heng, JIANG Min, HAO Yao, XU Zheng-hong, SHI Jin-song
(School of Pharmaceutical Science, Jiangnan University, Wuxi 214122, China)

alginate oligosaccharides; preparation procedure; ethanol precipitation; ultrafiltration; antioxidant activity

Alginate oligosaccharides are characterized by various biological activities. In this study, we developed a technique for the efficient preparation of alginate oligosaccharides by optimizing the process conditions for enzymatic hydrolysis and separation. We evaluated the antioxidant activities of the obtained alginate hydrolysates in vitro. We found the optimized conditions for alginate oligosaccharides preparation to be as follows: a substrate concentration of 1.2%, a ratio of enzyme to substrate dosage of 4.35 U·mg–1, and a hydrolysis time of 4 h. Through successive processes of ethanol precipitation and ultrafiltration, we obtained four constituents with average molecular weights of 0.84, 1.40, 2.25, and 34.56 kDa, respectively. The yields of these four constituents were 50.82%, 5.15%, 11.48%, and 12.00%, respectively. Our in vitro antioxidation study results show that the constituent A (Mw 0.84 kDa) demonstrated the most significant antioxidant activity and the hydroxyl radical scavenging ability was similar to that of vitamin C.

Q539

A

1000-3096(2016)12-0062-09

10.11759/hykx20160315001

(本文編輯: 康亦兼)

2016-03-15;

2016-04-05

國(guó)家海洋公益性行業(yè)科研專(zhuān)項(xiàng)(201305007); “十二五”國(guó)家科技支撐項(xiàng)目(2012BAD33B06)

[Foundation: Public Science and Technology Research Funds Projects of the Ocean (No. 201305007) ; “twelfth five-year” National Science and Technology Support Program (No. 2012BAD33B06)]

張明杰(1989-), 女, 江蘇宿遷人, 碩士研究生, 研究方向?yàn)橹扑幑こ? 電話: 0510-85328177, E-mail: zhangmingjie2013@126.com;史勁松, 通信作者, 主要從事糖工程技術(shù)及功能糖產(chǎn)品開(kāi)發(fā)研究, 電話: 0510-85328177, E-mail: shijs@163.com