麻艷群++黃凱++于丹++陳濤

摘要：研究飼料磷脂水平對(duì)蘇氏圓腹血清生化、肌肉磷脂等生理機(jī)制的影響。將900尾蘇氏圓腹（Pangasius sutchi）[初始體質(zhì)量約（1.45±0.08）g/尾]隨機(jī)分成5組，分別投喂5組飼料，各組磷脂水平分別為0%（PL0組）、1%（PL1組）、2%（PL2組）、3%（PL3組）、4%（PL4組）。結(jié)果表明：（1）各組間血清磷脂含量差異不明顯；（2）PL4組的膽固醇含量最低，為（5.53±0.23） mmol/L；（3）蘇氏圓腹肌肉磷脂含量隨飼料磷脂水平的升高而升高?？梢钥闯觯猴暳现刑砑恿字苡行ё柚鼓懝檀荚谘軆?nèi)壁沉積，促進(jìn)脂類的代謝；同時(shí)相應(yīng)增加蘇氏圓腹幼魚肌肉中貯存的磷脂量，從而滿足魚體生長(zhǎng)需要、提高蘇氏圓腹肉的品質(zhì)風(fēng)味。

關(guān)鍵詞：磷脂；蘇氏圓腹；血清生化指標(biāo)；肌肉磷脂

中圖分類號(hào)： S963.16+1文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A文章編號(hào)：1002-1302（2016）02-0274-03

收稿日期：2015-01-13

基金項(xiàng)目：廣西自然科學(xué)基金（編號(hào)：2012GXNSFBA053053）；廣西大學(xué)科研基金（編號(hào)：XBZ130020）。

作者簡(jiǎn)介：麻艷群（1980—），女，廣西南寧人，博士，副教授，主要從事水產(chǎn)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與生理的研究。E-mail：mayanqun@163.com。 蘇氏圓腹（Pangasius sutchi）是我國(guó)新興的一種名貴淡水養(yǎng)殖品種，屬鲇形目科圓腹屬，別稱巴沙魚、虎頭鯊、暹羅河鲇或八珍魚，原產(chǎn)于馬來西亞、泰國(guó)等地[1-2]，近幾年來我國(guó)開始引種馴養(yǎng)。蘇氏圓腹在生長(zhǎng)過程中，腹腔內(nèi)會(huì)逐漸積累出3塊較大的油脂肪，可達(dá)體質(zhì)量的5%～8%，這一特征在其他魚類中極為罕見。蘇氏圓腹在越南等地因此被稱為卡巴沙——三塊脂肪魚，該魚肉質(zhì)細(xì)嫩，無細(xì)小骨刺，口感鮮美，同時(shí)在其類似海鯊的軟骨組織中含有營(yíng)養(yǎng)及藥用價(jià)值頗高的硫酸軟骨素，被譽(yù)為飲食中的“軟黃金”，具有廣闊的市場(chǎng)前景[3]。

國(guó)外對(duì)蘇氏圓腹的研究報(bào)道不多，關(guān)于蘇氏圓腹?fàn)I養(yǎng)需求方面的研究報(bào)道較少。Zainuddin用4種含磷水平（0.151%、0.658%、1.162%、1.664%）的等能、等氮的日糧飼喂初始體質(zhì)量為（0.600+0.014）g的蘇氏圓腹幼魚 56 d，發(fā)現(xiàn)魚體、魚骨中的磷、鈣、鎂濃度隨日糧中磷水平的升高（0.151%～1.162%）而升高[4]。在我國(guó)，由于蘇氏圓腹引進(jìn)的時(shí)間不長(zhǎng)，因此目前國(guó)內(nèi)對(duì)蘇氏圓腹的研究多數(shù)集中在人工繁殖試驗(yàn)[5-6]，池塘、網(wǎng)箱或水泥池養(yǎng)殖模式[7-10]，以及工廠化養(yǎng)殖技術(shù)[11]的初探上，對(duì)營(yíng)養(yǎng)需求、機(jī)體生理機(jī)能方面的研究很少。

磷脂是魚類尤其是仔稚魚生長(zhǎng)的重要營(yíng)養(yǎng)因子；另一方面，磷脂也是重要的香味前體物質(zhì)，肌肉中磷脂含量的多少會(huì)直接影響肉的品質(zhì)風(fēng)味。

本試驗(yàn)用不同水平磷脂飼料飼喂蘇氏圓腹，研究各組血清生化指標(biāo)、血清磷脂含量和肌肉磷脂含量的變化規(guī)律，以期通過營(yíng)養(yǎng)調(diào)控方式，為今后在蘇氏圓腹人工飼料中添加磷脂、推廣養(yǎng)殖蘇氏圓腹提供必要的理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

1.1.1試驗(yàn)用魚蘇氏圓腹（Pangasius sutchi）由廣西水產(chǎn)引育種中心提供。馴養(yǎng)7 d后選擇健康、狀態(tài)佳的魚苗900尾，初始體質(zhì)量約（1.45±0.08） g/尾，隨機(jī)分成5組，每組設(shè)3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)60尾，將每個(gè)重復(fù)的魚放養(yǎng)于1個(gè)水泥池（規(guī)格為1.52 m×1.00 m×1.00 m）中。

1.1.2飼料在基礎(chǔ)飼料中添加不同比例的大豆磷脂（磷脂含量75%），配制成5組試驗(yàn)飼料，各組飼料組成、營(yíng)養(yǎng)組成分別見表1、表2，各組磷脂水平分別為0%（PL0組）、1%（PL1組）、2%（PL2組）、3%（PL3組）、4%（PL4組）。

1.2飼養(yǎng)管理

飼養(yǎng)周期為56 d，各組使用相應(yīng)的飼糧。每天9：00、17：00 投喂，投喂量一般為魚體質(zhì)量的3%，以每次投食在1 h內(nèi)吃完為宜。飼養(yǎng)期間于每日清晨投喂前用虹吸法吸出飼料殘?jiān)?、糞便，測(cè)定水溫、pH值、溶解氧含量、氨態(tài)氮含量，觀察記錄各池魚體活動(dòng)及采食情況。

1.3測(cè)定指標(biāo)及方法

1.3.1血清生化指標(biāo)的測(cè)定飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，每個(gè)重復(fù)取10尾魚，尾靜脈抽血，4 000 r/min離心10 min，取上清，使用美國(guó)邁瑞B(yǎng)S-300全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定相關(guān)血清生化指標(biāo)。采用紫外-蘋果酸脫氫酶法測(cè)定谷丙轉(zhuǎn)氨酶（alanine aminotransferase，ALT）活性、谷草轉(zhuǎn)氨酶（aspartate aminotransferase，AST）活性；用氧化酶法測(cè)定甘油三酯（triglyceride，TG）含量；用CHOD-PAP法測(cè)定膽固醇（cholesterol，CHOL）含量；用直接選擇抑制法測(cè)定高密度脂蛋白（high density lipoprotein cholesterol，HDLC）含量、低密度脂蛋白（low density lipoprotein cholesterol，LDLC）含量；用連續(xù)監(jiān)測(cè)法測(cè)定淀粉酶（amylase，AMY）活性；用乳酸-丙酮酸法測(cè)定乳酸脫氫酶（LDH）活性；用酶顯色法測(cè)定磷脂（phospholipid，PL）含量。

1.3.2肌肉磷脂的測(cè)定取2 g左右的肌肉樣品，加入Folch液（三氯甲烷 ∶甲醇=2 ∶1）5 mL，研磨組織樣；隨后轉(zhuǎn)到圓底燒瓶中，加15 mL Folch液，回流2 h；過濾液體，裝入25 mL容量瓶定容。從容量瓶中取10 mL溶液，用氮?dú)獯蹈?，稱總脂質(zhì)量。而后采用溶劑法（即液-液分離法）將總脂分離為極性脂（主要是磷脂）、中性脂，2個(gè)液相分別為石油醚（90 ～120 ℃，上層）、95%的含水甲醇（下層）。具體步驟：（1）制備飽和的上述2個(gè)液相，按1 ∶1比例等體積加至總脂中，充分振蕩后靜置分層，移去下層甲醇溶液；再用等量的甲醇重復(fù)前面操作2次，將極性脂、中性脂徹底分離。在甲醇中的為極性脂（即磷脂），在石油醚層中的為中性脂。將含極性脂的甲醇溶液用氮?dú)獯蹈刹?zhǔn)確稱質(zhì)量，計(jì)算肌肉磷脂含量：

肌肉磷脂含量=磷脂質(zhì)量肌肉鮮樣質(zhì)量×100%。

以上各測(cè)定指標(biāo)中用到的各種化學(xué)試劑均為分析純，水為蒸餾水。

1.4數(shù)據(jù)處理與分析

數(shù)據(jù)均以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差”表示。用SPSS 11.5軟件對(duì)所有數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)合Duncans多重比較法，顯著水平為0.05。

2結(jié)果與分析

2.1飼料磷脂水平對(duì)蘇氏圓腹血清生化指標(biāo)的影響

由表3可知，各組間血清磷脂含量差異不明顯；PL4組的膽固醇含量最低，為（5.53±0.23）mmol/L；甘油三酯、高密度脂蛋白含量基本隨著飼料磷脂水平的提高而降低；PL4組的低密度脂蛋白含量最低，但與其他4組差異不明顯。

由表3還可以看出，PL4組的谷草轉(zhuǎn)氨酶、乳酸脫氫酶活性最低，分別為（438.90±3.00）、（748.10±52.50） U/L，與其他4組差異顯著（P<0.05）。淀粉酶活性以PL2組的最高，與其他4組差異顯著（P<0.05），對(duì)照組最低。

2.2飼料磷脂水平對(duì)蘇氏圓腹肌肉磷脂含量的影響

由表4可見，蘇氏圓腹肌肉磷脂含量隨飼料磷脂水平的升高而升高，PL4組的肌肉磷脂含量最高，與PL3組沒有顯著差異，分別比PL2、PL1、PL0組高17.74%、32.73%、40.38%（P<0.05）。

表4飼料磷脂對(duì)蘇氏圓腹肌肉磷脂含量的影響

組別磷脂含量（%）PL01.04±0.09cPL11.10±0.09cPL21.24±0.08bPL31.43±0.06aPL41.46±0.10a

3結(jié)論與討論

3.1飼料磷脂水平對(duì)蘇氏圓腹血清生化指標(biāo)的影響

一般認(rèn)為，臨床血清生化指標(biāo)能有效且靈敏地反映出魚類機(jī)體的生理病理變化狀況[12-13]。有研究表明，飼料磷脂會(huì)降低血液中的膽固醇、甘油三酯的濃度[14]。在本試驗(yàn)中，飼料中添加磷脂，蘇氏圓腹血液中的膽固醇、甘油三酯含量均有不同程度的下降，其中對(duì)膽固醇的影響最為明顯，這說明飼料中添加一定量的磷脂能有效阻止膽固醇在血管內(nèi)壁沉積，促進(jìn)脂類的代謝。對(duì)于膽固醇含量的降低，可能是因?yàn)轱暳现刑砑恿字档虷DL、LDL的含量，而HDL、LDL又是膽固醇的主要載體，從而最終導(dǎo)致膽固醇含量的降低。

谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶是氨基酸代謝過程中的重要酶類。ALT催化丙酮酸、谷氨酸之間的氨基轉(zhuǎn)運(yùn)；AST催化草酰乙酸和谷氨酸之間的氨基轉(zhuǎn)換。這2種酶中，ALT更能專一反映肝臟細(xì)胞的損傷性，AST的反映靈敏度更高[13]。乳酸脫氫酶作為糖酵解過程中的重要酶，主要催化乳酸轉(zhuǎn)化為丙酮酸，它存在于機(jī)體內(nèi)所有組織細(xì)胞的胞質(zhì)中。如果肝細(xì)胞損傷，AST、LDH就會(huì)從胞質(zhì)中逸出進(jìn)入血液，從而導(dǎo)致血漿中的AST、LDH含量升高[13]。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，隨著飼料中磷脂水平添加量增加，AST、LDH含量大致降低；當(dāng)飼料磷脂水平達(dá)到4%時(shí)，AST、LDH含量顯著低于其他4組，這說明飼料中添加一定量的磷脂可有效緩解魚體肝臟細(xì)胞的損傷程度。

淀粉酶主要催化糖原、淀粉的分解，提高魚類利用碳水化合物的能力，并通過影響血糖水平的方式最終影響脂肪的代謝[15]。本試驗(yàn)中，對(duì)照組的AMY活性最低，間接說明了該組動(dòng)員、轉(zhuǎn)運(yùn)脂肪的能力最弱。

3.2飼料磷脂水平對(duì)蘇氏圓腹肌肉磷脂含量的影響

趙娜用不同磷脂水平餌料飼喂黃顙魚仔稚魚，發(fā)現(xiàn)14日齡的黃顙魚體磷脂含量隨著餌料中磷脂水平的升高而升高[16]。本試驗(yàn)結(jié)果與趙娜的報(bào)道[16]類似，隨著飼料磷脂水平的升高，蘇氏圓腹幼魚肌肉的磷脂含量顯著升高，這表明飼料中添加磷脂能夠使幼魚體內(nèi)肌肉中貯存的磷脂量相應(yīng)增加，以滿足魚體生長(zhǎng)需要，這也與筆者之前做過的飼料磷脂對(duì)蘇氏圓腹生長(zhǎng)影響的試驗(yàn)結(jié)果相吻合。由于磷脂是香味的重要前體物質(zhì)，肌肉磷脂的含量也會(huì)影響肉的品質(zhì)風(fēng)味[17]，根據(jù)本試驗(yàn)結(jié)果，在飼料中添加磷脂有助于提高蘇氏圓腹肉的品質(zhì)風(fēng)味。

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