楊婷婷 呂軼 張東升 唐曄 袁藝 張海濤 汪海峰
摘 要 以rProtein A-瓊脂糖凝膠為載體,同時(shí)偶聯(lián)抗黃曲霉素B1(AFB1)、玉米赤霉烯酮(ZEN)和脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(DON)單抗, 制備了AFB1-ZEN-DON三合一免疫親和柱,并對(duì)非特異性吸附、柱空白、柱容量、柱效及樣品加標(biāo)回收率等指標(biāo)進(jìn)行評(píng)價(jià)。結(jié)果表明,0.25 mL膠對(duì)應(yīng)的柱容量分別為:AFB1 295 ng,ZEN 905 ng,DON 2342 ng;柱空白為0;rProtein A-瓊脂糖凝膠(0.25 mL膠)對(duì)3種毒素的非特異吸附率均低于8%,3種毒素不同濃度的平均柱回收分別為97.4%、98.0%和98.4%。通過優(yōu)化條件,選擇80%甲醇-水(80∶20, V/V)為提取溶劑,PBST稀釋; FAPAS質(zhì)控樣本經(jīng)不同批次三合一親和柱凈化后測定結(jié)果接近靶心值。制備的三合一免疫親和柱能滿足食品及飼料樣品的前處理,可替代常規(guī)單一親和柱,為多種毒素的一步富集、凈化、檢測奠定基礎(chǔ)。
關(guān)鍵詞 黃曲霉毒素B1; 玉米赤霉烯酮; 脫氧雪腐鐮刀菌烯醇; 定向偶聯(lián); 免疫親和柱