劉晶 王大勇
摘要:本文是對(duì)興安杜鵑的愈傷組織培養(yǎng)進(jìn)行了初步研究。本實(shí)驗(yàn)選擇MS基本分化培養(yǎng)基,經(jīng)過(guò)數(shù)據(jù)的整理與分析找到適合興安杜鵑生長(zhǎng)的最佳培養(yǎng)基。結(jié)果表明:外植體消毒6分鐘為最佳時(shí)間,最佳啟動(dòng)生長(zhǎng)培養(yǎng)基為MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L,接種苗生長(zhǎng)正常,能產(chǎn)生分化。最佳增殖培養(yǎng)基為MS+6-BA 1.5mg/L+NAA 0.1mg/L,形成部分愈傷組織。
關(guān)鍵詞:興安杜鵑;組織培養(yǎng)
中圖分類(lèi)號(hào): S685.21 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼: A DOI編號(hào): 10.14025/j.cnki.jlny.2016.11.024
目前關(guān)于興安杜鵑人工繁殖方面的研究報(bào)道較少,如果能成功的培育出大量的興安杜鵑,將豐富國(guó)內(nèi)園林植物的類(lèi)型,解決純正的優(yōu)質(zhì)杜鵑種苗在我國(guó)苗木市場(chǎng)上短缺的問(wèn)題。
1研究地點(diǎn)
1.1 原料的取材地點(diǎn)和時(shí)間
4月中旬,對(duì)興安杜鵑進(jìn)行取材。選取4月份剛長(zhǎng)出的生長(zhǎng)良好、無(wú)病蟲(chóng)害、生長(zhǎng)狀況相近的嫩枝進(jìn)行水培1~2周作為原材料。
1.2 進(jìn)行組織培養(yǎng)工作的地點(diǎn)
在實(shí)驗(yàn)室里,按照一定的步驟和方法對(duì)興安杜鵑進(jìn)行組織培養(yǎng)。
2研究方法
在實(shí)驗(yàn)中采用的基本分化培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基,細(xì)胞分裂素選擇6-BA,生長(zhǎng)素選擇NAA,首先準(zhǔn)備1個(gè)不加任何植物激素的空白實(shí)驗(yàn)用以對(duì)照,再以不同濃度的6-BA和NAA分別配成5組濃度組合,每個(gè)組合再以不同的外植體消毒時(shí)間再分成3組,消毒4分鐘、5分鐘和6分鐘的接種瓶數(shù)均為20瓶。接種完后放在培養(yǎng)室中培養(yǎng),以7天為一個(gè)單位,每隔7天觀察一次,查看并記錄興安杜鵑接種苗在培養(yǎng)基上的長(zhǎng)勢(shì)情況。最后通過(guò)數(shù)據(jù)的整理與分析比較,在15組培養(yǎng)基中,篩選出分化培養(yǎng)基中最佳植物激素濃度配比和最佳消毒時(shí)間。
2.1 數(shù)據(jù)的處理
觀察外植體在不同消毒時(shí)間與植物激素不同濃度配比的培養(yǎng)基中的分化狀態(tài),其數(shù)據(jù)如下表:
由表1,2,3中記錄的數(shù)據(jù)可以計(jì)算出分別消毒了4分鐘,5分鐘,6分鐘的興安杜鵑葉芽在不同植物激素濃度配比的培養(yǎng)基中的污染程度、分化程度、生長(zhǎng)狀態(tài)等情況。污染率=。
2.2興安杜鵑的增殖培養(yǎng)
將培養(yǎng)出的興安杜鵑無(wú)菌苗進(jìn)行增殖培養(yǎng),1~5組培養(yǎng)基分別為MS+6-BA 0.1mg/L+NAA 0.1mg/L;MS+6-BA 0.5mg/L
+NAA 0.1mg/L;MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L;MS+6-BA 1.5mg/L+NAA 0.1mg/L;MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L。將無(wú)菌苗嚴(yán)格按照無(wú)菌操作接種到增殖培養(yǎng)基上,增殖情況見(jiàn)表4。
通過(guò)以7天為一個(gè)周期,共進(jìn)行為期30天的觀察,挑選出已染菌的接種苗,并及時(shí)對(duì)接種苗的生長(zhǎng)狀態(tài)、分化狀態(tài)、是否褐化等狀態(tài)進(jìn)行詳細(xì)的記錄并拍照,歸納并整理數(shù)據(jù),得出相應(yīng)的結(jié)論并對(duì)得到的結(jié)論進(jìn)行合理的分析。
3 主要結(jié)果
3.1 最佳植物激素的不同濃度配比
由表5中所記錄的數(shù)據(jù)進(jìn)行整理歸納與分析,并通過(guò)對(duì)接
種苗生長(zhǎng)、分化狀態(tài)的觀察與對(duì)比分析,得到以下結(jié)果:長(zhǎng)勢(shì)最好的是MS+6-BA 2.0mg/L+NAA0.1mg/L ;其次是MS+6-BA
1.5mg/L+NAA 0.1mg/L,長(zhǎng)勢(shì)最不好的是MS+6-BA 0.5mg/L
+NAA0.1mg/L 。
3.2結(jié)論
通過(guò)實(shí)驗(yàn)和對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)整理與分析,結(jié)果表明:外植體消毒6分鐘,MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L的為最佳培養(yǎng)基,接種苗生長(zhǎng)正常,形成少量的愈傷組織;培養(yǎng)基MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L的組合效果最差,接種苗幾乎全部慢慢褐化死亡。
作者簡(jiǎn)介:劉晶,本科學(xué)歷,乾安縣森防站,工程師,研究方向:森林病蟲(chóng)害防治。