趙陽(yáng)，王翼騰，李楠，，陳詩(shī)雅，李覃，陳虹，，劉艷霞

（1.天津醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，天津市臨床藥物關(guān)鍵技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津300070；2.中國(guó)人民武裝警察部隊(duì)后勤學(xué)院生藥與藥劑學(xué)教研室，天津300309）

論著

新型吲哚類衍生物的合成及體外免疫抑制活性的初步研究

趙陽(yáng)1，王翼騰2，李楠1，2，陳詩(shī)雅2，李覃2，陳虹1，2，劉艷霞1

（1.天津醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，天津市臨床藥物關(guān)鍵技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津300070；2.中國(guó)人民武裝警察部隊(duì)后勤學(xué)院生藥與藥劑學(xué)教研室，天津300309）

目的：以土槿乙酸結(jié)構(gòu)特征為模板，吲哚為母核合成類土槿乙酸化合物，以期得到有更高免疫抑制活性的吲哚類衍生物。方法：對(duì)5-醛基吲哚和5-羧基吲哚的1，3，5位進(jìn)行改造。1位進(jìn)行烷基化改造，3位通過(guò)維爾斯邁爾－哈克反應(yīng)與醛胺縮合反應(yīng)進(jìn)行延長(zhǎng)，5位通過(guò)克腦文格爾反應(yīng)與縮合酰化反應(yīng)進(jìn)行延長(zhǎng)，得到吲哚類衍生物。經(jīng)氫譜和高分辨質(zhì)譜對(duì)其進(jìn)行結(jié)構(gòu)表征。采用噻唑藍(lán)（MTT）法檢測(cè)目標(biāo)化合物對(duì)小鼠T、B淋巴細(xì)胞增殖的抑制作用。結(jié)果：合成得到兩個(gè)系列共7個(gè)化合物，所有的化合物都經(jīng)過(guò)HR-ESI-MS和1H-NMR驗(yàn)證，其中化合物5c對(duì)T細(xì)胞和B細(xì)胞有一定的增殖抑制活性，化合物9a，9b對(duì)B細(xì)胞有一定增殖抑制活性。結(jié)論：通過(guò)模擬土槿乙酸的兩個(gè)長(zhǎng)鏈結(jié)構(gòu)合成了新的吲哚的類似物，發(fā)現(xiàn)了具有一定的免疫抑制活性的先導(dǎo)化合物。

5-醛基吲哚；5-羧基吲哚；土槿乙酸；免疫抑制活性

土槿皮是松科植物金錢(qián)松的根皮及近根皮，其在我國(guó)作為抗真菌的中藥已有悠久的歷史[1]。土槿乙酸（pseudolaric acid B）是從土槿皮中分離得到的新型二萜酸化合物，本課題組系列研究顯示土槿乙酸具有良好的抑制淋巴細(xì)胞增殖的作用，作用機(jī)制新穎[2-3]。金錢(qián)松為我國(guó)特有松科植物，生長(zhǎng)周期較長(zhǎng)使土槿乙酸來(lái)源受限導(dǎo)致其進(jìn)一步的研究受阻。其次，土槿乙酸全合成步驟繁瑣，產(chǎn)率低，無(wú)實(shí)用價(jià)值[4-5]。所以亟需探索它的類似結(jié)構(gòu)的新化合物。非甾體抗炎藥吲哚美辛（indomethacin）通過(guò)對(duì)環(huán)氧合酶的抑制而起到抗炎作用，除了用于解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎外，還廣泛地應(yīng)用于泌尿生殖系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)以及眼科、小兒科疾病的治療，吲哚母核為人體內(nèi)源性物質(zhì)，具有良好的生物兼容性[6-8]。此外，與吲哚環(huán)相似的其它類型的苯并五元環(huán)結(jié)構(gòu)如苯并咪唑也被發(fā)現(xiàn)具有一定的免疫抑制活性[9-10]。因此，基于土槿乙酸結(jié)構(gòu)特征，探索與土槿乙酸結(jié)構(gòu)類似的且有一定免疫抑制活性的吲哚母核類似物，具有重要的意義。本文根據(jù)土槿乙酸和吲哚美辛結(jié)構(gòu)特點(diǎn)對(duì)5-醛基吲哚和5-羧基吲哚的1、3、5位進(jìn)行結(jié)構(gòu)改造，設(shè)計(jì)合成了兩個(gè)系列共7個(gè)化合物，以期得到具有一定免疫抑制活性的吲哚類衍生物。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 核磁共振儀：Bruker Advance 2B/400M；XT顯微熔點(diǎn)儀；高分辨質(zhì)譜儀：Agilent 6210 LC-TOF；酶標(biāo)儀：美國(guó)，BIORAD 550；土槿乙酸系武警后勤學(xué)院生藥學(xué)實(shí)驗(yàn)室從金錢(qián)松根皮中提取分離得到；霉酚酸酯、1-羥基苯并三唑（HOBT）、1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳酰二亞胺（EDCI）鹽酸鹽、N，N-二甲基甲酰胺（DMF）（分子篩干燥）、CH2Cl2（鈉塊回流干燥）、CH3OH（鎂粉回流干燥）等所用藥品及化學(xué)合成溶劑均購(gòu)自天津康科德科技有限公司。

1.2 合成方法

1.2.1 合成路線 見(jiàn)圖1、2。

圖1 化合物5a-5e的合成路線Fig 1 Schematic route of 5a-5e compound

圖2 化合物9a、9b的合成路線Fig 2 Schematic route of 9a，9b compound

1.2.2 化合物5a-5e的合成通法 將5-醛基吲哚（0.145 g，1 mmol）溶于10 mL DMF中，冰浴下緩慢加入NaH（0.048 g，2 mmol），冰浴攪拌2 h，然后逐滴加入鹵代烴（1.2 mmol），0.5 h后移至室溫條件下反應(yīng)2 h，TLC檢測(cè)反應(yīng)完全。在冰浴條件下向反應(yīng)液中滴加蒸餾水，不斷攪拌，直至析出固體不再增加，抽濾得固體即化合物1，40℃減壓干燥24 h。

將化合物1（1 mmol）溶于10 mL DMF中，加入CH2（COOH）2（0.312 g，3 mmol）、哌啶（0.043 g，0.5 mmol）后于90℃條件下不斷攪拌，回流反應(yīng)8 h，TLC檢測(cè)反應(yīng)完全。于冰浴條件下向反應(yīng)液中滴加蒸餾水，不斷攪拌，直至析出固體不再增加，抽濾得固體即化合物2，40℃減壓干燥24 h。

將化合物2（1 mmol）溶于10 mL無(wú)水CH2Cl2中，冰浴下加入1.2倍量的HOBT和EDCI鹽酸鹽，滴加兩滴三乙胺溶液，反應(yīng)0.5 h后加入脂肪胺（1.2 mmol）置于常溫反應(yīng)8 h，TLC檢測(cè)反應(yīng)完全，依次用5%的鹽酸溶液、飽和碳酸氫鈉溶液、蒸餾水以及飽和食鹽水洗滌1次，減壓蒸干，經(jīng)柱層析分離，得化合物3。

將POCl3（1.615 g，10 mmol）逐滴滴入DMF（0.731 g，10 mmol）中，15℃混合攪拌0.5 h，將化合物3（1 mmol）溶于DMF中，然后逐滴滴加POCl3和DMF的混合溶液，加熱70°C反應(yīng)6 h，TLC檢測(cè)反應(yīng)完全。反應(yīng)液稀釋于冰水中，40%NaOH中和，攪拌3 h后靜置于冰箱，直至固體析出，抽濾得固體即化合物4，40℃減壓干燥24 h。

將化合物4（1 mmol）和芳香胺(1.2 mmol)溶于10 mL無(wú)水CH3OH中，滴加兩滴冰醋酸，冰浴下緩慢加入NaBH3CN（1.5 mmol，0.095 g），0.5 h后移至常溫反應(yīng)2 h，TLC檢測(cè)反應(yīng)完全，向反應(yīng)液中逐滴滴加蒸餾水，直至析出固體不再增加，抽濾得固體即終產(chǎn)物5，40℃減壓干燥24 h。

1.2.3 化合物9a、9b的合成通法 將5-羧基吲哚（0.161 g，1 mmol）溶于10 mL無(wú)水CH2Cl2中，冰浴下加入1.2倍量的HOBT和EDCI鹽酸鹽，滴加兩滴三乙胺溶液，反應(yīng)0.5 h后加入正戊胺（此為化合物11a，11b則加入2-乙基丙胺）（1.2 mmol）置于常溫反應(yīng)8 h，TLC檢測(cè)反應(yīng)完全，依次用5%的鹽酸溶液、飽和碳酸氫鈉溶液、蒸餾水以及飽和食鹽水洗滌1次，減壓蒸干，經(jīng)柱層析分離，得化合物6。

將化合物6溶于10 mL DMF中，冰浴下緩慢加入NaH（0.048 g，2 mmol），冰浴攪拌2 h，然后逐滴加入6-溴己酸甲酯（1.2 mmol），0.5 h后移至室溫條件下反應(yīng)2 h，TLC檢測(cè)反應(yīng)完全。于冰浴條件下向反應(yīng)液中滴加蒸餾水，不斷攪拌，直至析出固體不再增加，抽濾得固體即化合物7，40℃減壓干燥24 h。

將POCl3（1.615 g，10 mmol）逐滴滴入DMF（0.731 g，10 mmol）中，15℃混合攪拌0.5 h，將化合物7（1 mmol）溶于DMF中，然后逐滴滴加POCl3和DMF的混合溶液，加熱70℃反應(yīng)6 h，TLC檢測(cè)反應(yīng)完全。反應(yīng)液稀釋于冰水中，40%NaOH中和，攪拌3 h后靜置于冰箱，直至固體析出，抽濾得固體即化合物8，40℃減壓干燥24 h。

將化合物8（1 mmol）和對(duì)甲基苯胺（1.2 mmol）溶于10 mL無(wú)水CH3OH中，滴加兩滴冰醋酸，冰浴下緩慢加入NaBH3CN（0.095 g，1.5 mmol），0.5 h后移至常溫反應(yīng)2 h，TLC檢測(cè)反應(yīng)完全，向反應(yīng)液中逐滴滴加蒸餾水，直至析出固體不再增加，抽濾得固體即終產(chǎn)物9，40℃減壓干燥24 h。

1.3 MTT法檢測(cè)化合物對(duì)小鼠T細(xì)胞和B細(xì)胞增殖的抑制作用活性 無(wú)菌條件下取小鼠脾臟并制備淋巴細(xì)胞懸液，調(diào)整細(xì)胞濃度為1×106~5×106/mL，加入ConA（B細(xì)胞則為L(zhǎng)PS）至終濃度為10 μg/mL。以每孔100 μL培養(yǎng)于96孔板中，每個(gè)藥物設(shè)置4個(gè)濃度（10 μg/mL、1 μg/mL、0.1 μg/mL、0.01 μg/mL），每個(gè)濃度3個(gè)平行復(fù)孔，以土槿乙酸和霉酚酸酯為陽(yáng)性藥，并以RPMI1640培養(yǎng)液代替細(xì)胞為調(diào)零孔。陰性對(duì)照組加入與給藥組等體積的培養(yǎng)基，置于37℃，5%CO2溫箱中，孵育48 h。48 h后，每孔加20 μL 5 mg/mL MTT溶液（PBS配制）。37℃繼續(xù)孵育4 h，吸棄上清，每孔加入三聯(lián)液100 μL溶解甲簪顆粒，輕度振蕩溶解，放置過(guò)夜。用酶標(biāo)儀檢測(cè)，以波長(zhǎng)490 nm測(cè)定光密度值（OD），以ConA（B細(xì)胞則為L(zhǎng)PS）處理的細(xì)胞為陰性對(duì)照組，以RPMI1640培養(yǎng)液為空白對(duì)照組，用以下公式計(jì)算抑制率：

抑制率=（陰性對(duì)照組OD值－加藥組OD值）/（陰性對(duì)照組OD值－空白對(duì)照組OD值）×100%。

2 結(jié)果

2.1 化合物的表征數(shù)據(jù)

5a：黃色固體，產(chǎn)率27%，m.p.165℃-166℃；1H NMR（400 MHz,CDCl3）δ 7.73（s,1H,H-1′）,7.72–7.67(m,1H,H-3),7.32(m,J=26.1,9.6,1.6 Hz,2H, H-2,2′),7.11 (s,1H,H-4),6.83 (m,J=8.8,2.9 Hz, 2H,H-3″,4″),6.76-6.71(m,2H,H-2″,5″),6.26(dd, J=13.7,6.4 Hz,1H,H-1),4.43(d,J=9.6 Hz,2H,HCH2-1″),4.22(m,J=13.7,7.2 Hz,1H,H-3′),4.12(q, J=7.3 Hz,2H,H-CH2-1?),3.79-3.76 (s,3H,HOCH3),1.44 (dd,J=9.4,5.2 Hz,3H,H-CH3-2?), 1.25-1.19(s,6H,H-CH3-4′,5′)。HR-ESI-MS:m/z414.214 4 for[M+Na]+(calcd for C24H29N3O2Na+,414.215 2)。

5b：黃色固體，產(chǎn)率23%，m.p.155℃-156℃；1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ 7.79(s,J=10.7 Hz,1H,H-1'),7.71(d,J=15.5 Hz,1H,H-3),7.38-7.17(m,3H, H-4,4?,5?),7.11 (s,1H,H-2),7.09-7.03 (m,1H, H-2?),7.00(t,J=8.7 Hz,3H,H-2′，3″，4″),6.85(m, J=22.1,11.1,4.3 Hz,1H,H-3?),6.61(t,J=9.9 Hz, 2H,H-2″,5″),6.32(d,J=15.5 Hz,1H,H-1),5.25(s, 2H,H-CH2-1?),4.39(s,2H,H-CH2-1″),4.26-4.15 (m,1H,H-3′),2.24(d,J=10.0 Hz,3H,H-CH3-5″), 1.20(d,J=6.5 Hz,6H,H-CH3-4′,5′)。HR-ESI-MS: m/z 478.226 5 for[M+Na]+(calcd for C29H30FN3ONa+, 478.226 1)。

5c：黃色固體，產(chǎn)率21%，m.p.143℃-144℃；1H NMR (400 MHz,CDCl3）δ 7.78（d,J=14.6 Hz,1H, H-1′),7.75-7.62(m,1H,H-3),7.33(m,J=13.3,8.5, 3.1 Hz,3H,H-2,4,4?),7.16 (s,1H,H-2?),7.11-7.05(m,1H,H-2′),7.01(dd,J=6.7,6.0 Hz,2H,H-4, 3?),6.91-6.83(m,1H,H-5?),6.64(dd,J=17.9,7.7 Hz,2H,H-3″,4″),6.36-6.26(m,2H,H-2″,5″),5.30(s, 2H,H-CH2-1?),4.43(s,J=7.8 Hz,2H,H-CH2-1″), 3.63-3.52(m,3H,H-6,H-CH2-5),3.49(dd,J=12.1, 5.9 Hz,2H,H-CH2-3″),2.30-2.20(s,3H,H-CH3-6″), 1.82(dt,J=11.9,5.9 Hz,2H,H-CH2-4′),1.20-1.14 (m,6H,H-CH3-7′,8′)。HR-ESI-MS:m/z 536.267 8 for[M+Na]+(calcd for C32H36FN3O2Na+,536.268 4)。

5d：黃色固體，產(chǎn)率25%，m.p.166℃-167℃；1H NMR (400 MHz,CDCl3)δ 7.80(s,1H,H-1′),7.75-7.66(m,1H,H-3),7.37-7.31 (m,1H,H-2),7.27-7.25(m,2H,H-4,4?),7.18-7.14(s,1H,H-2′),7.11 -7.04(m,2H,H-2?,3?),7.02(d,J=8.6 Hz,3H,H-3″，4″，4?),6.72(t,J=9.4 Hz,2H,H-2″，5″),6.41(d,J =15.5 Hz,1H,H-1),5.26(d,J=9.8 Hz,2H,H-CH2-1?),4.49-4.40(m,2H,H-CH2-1″),4.01-3.88(m,1H, H-3′),2.24(d,J=8.2 Hz,3H,H-CH3-6″),1.66-1.54 (m,2H,H-CH2-6′),1.44(td,J=14.4,7.3 Hz,2H,HCH2-4′),0.93(t,J=7.4 Hz,6H,H-CH3-5′,7′)。HRESI-MS:m/z 506.255 4 for[M+Na]+(calcd for C31H34N3ONa+,506.257 8)。

5e：黃色固體，產(chǎn)率19%，m.p.171℃-172℃；1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ 7.93(s,1H,H-1′),7.87(d,J=15.3 Hz,1H,H-3),7.38 (dt,J=11.3,5.6 Hz,1H, H-4),7.31-7.26(m,1H,H-2),7.14-7.06(m,3H,H-2′,3″,4″),6.96(dd,J=12.3,6.3 Hz,3H,H-1,3″,5″), 6.81-6.77(m,4H,H-2?,3?,4?,5?),5.21 (d,J= 7.0 Hz,2H,H-CH2-1?),4.48(s,2H,H-CH2-1″),4.41 -4.32 (m,1H,H-3′),3.75 (d,J=3.0 Hz,3H,HOCH3),2.30 (d,J=12.1 Hz,3H,H-CH3-6?),2.07-1.92(m,2H,H-CH2-6′),1.81-1.69(m,2H,H-CH2-4′), 0.87(t,J=7.4 Hz,6H,H-CH3-5′,7′)。HR-ESI-MS: m/z 518.277 3 for[M+Na]+(calcd for C32H37N3O2Na+, 518.277 8)。

9a：黃色固體，產(chǎn)率30%，m.p.122℃-123℃；1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ 8.06(t,J=4.4 Hz,1H,H-2),7.71 (m,J=6.9,3.5 Hz,1H,H-3),7.36-7.29(m, 1H,H-3),7.11(s,J=3.3 Hz,1H,H-4),7.02 (d,J= 8.2 Hz,2H,H-3″,4″),6.66(d,J=8.4 Hz,2H,H-2″, 5″),4.46(s,2H,H-CH2-1″),4.09(m,J=7.0 Hz,2H, H-CH2-1?),4.05-3.99(m,1H,H-1′),3.67-3.62(m, 3H,H-CH3-6?),2.30 (m,J=14.9,6.4 Hz,2H,HCH2-5?),2.26(s,3H,H-CH3-6″),1.87-1.77(m,2H, H-CH2-2?),1.69-1.60(m,4H,H-CH2-2′,4′),1.51 (m,J=14.4,7.4 Hz,2H,H-CH2-4?),1.34-1.25(m, 2H,H-CH2-3?),0.96(m,J=7.4 Hz,6H,H-CH3-3′, 5′)。HR-ESI-MS:m/z 500.288 0 for[M+Na]+(calcd for C29H39N3O3Na+,500.288 4)。

9b：黃色固體，產(chǎn)率32%，m.p.128℃-129℃；1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ 8.05(d,J=1.4 Hz,1H,H-2),7.71(dd,J=8.6,1.6 Hz,1H,H-1),7.30(t,J=8.2 Hz,1H,H-3),7.11 (s,1H,H-4),7.01 (d,J=8.1 Hz, 2H,H-3′,4′),6.64(d,J=8.4 Hz,2H,H-2′,5′),4.44 (s,2H,H-CH2-1″),4.07(t,J=7.0 Hz,2H,H-CH2-1?), 3.64(s,J=3.7 Hz,3H,H-CH3-6?),3.45(dd,J=13.1, 7.2 Hz,2H,H-CH2-1′),2.28(dd,J=12.1,4.7 Hz,2H, H-CH2-5?),2.25(s,3H,H-CH3-6″),1.82(dt,J= 14.8,7.2 Hz,2H,H-CH2-2?),1.66-1.59(m,4H,HCH2-2′,4?),1.40-1.31(m,6H,H-CH2-2′,3′,3″), 0.92-0.88(m,3H,H-CH3-5′)。HR-ESI-MS:m/z 500.288 1 for[M+Na]+(calcd for C29H39N3O3Na+, 500.288 4)。

2.2 目標(biāo)化合物體外免疫抑制活性測(cè)定 表1是合成化合物與陽(yáng)性對(duì)照藥霉酚酸酯（MMF)和土槿乙酸（PB）對(duì)T細(xì)胞和B細(xì)胞的藥理活性結(jié)果，可以看出化合物5c對(duì)T細(xì)胞和B細(xì)胞增殖有一定的抑制活性，化合物9a、9b對(duì)B細(xì)胞增殖有一定抑制活性。

表1 化合物對(duì)T、B細(xì)胞增殖的體外增殖抑制活性（s,n=3）Tab1 In vitro inhibitoryeffectsofnovelindolederivatives（s,n=3 ）

表1 化合物對(duì)T、B細(xì)胞增殖的體外增殖抑制活性（s,n=3）Tab1 In vitro inhibitoryeffectsofnovelindolederivatives（s,n=3 ）

抑制率（10-5μmol/L）化合物 T Cell B Cell 5a -2.593±0.204 -9.820±0.587 5b 21.453±1.246 -6.757±0.254 5c 37.417±1.822 38.568±0.651 5d 24.393±0.843 10.000±0.472 5e 14.018±0.756 0.905±0.045 9a 7.187±0.367 43.455±1.309 9b 25.365±1.114 44.909±0.884 PB 50.773±1.965 43.604±1.449 MMF 60.241±1.624 55.128±1.804

3 討論

3.1 合成方法 由5-醛基吲哚得到目標(biāo)化合物5a-5e共經(jīng)過(guò)了5步化學(xué)反應(yīng)，5-羧基吲哚得到目標(biāo)化合物9a、9b共經(jīng)過(guò)4步化學(xué)反應(yīng)，它們的反應(yīng)類型是基本一致的，區(qū)別在于吲哚環(huán)1位進(jìn)行烷基化的順序不一樣。對(duì)于5-醛基吲哚來(lái)說(shuō)，其應(yīng)該首先進(jìn)行烷基化反應(yīng)，原因在于5位的醛基需要在高溫條件下進(jìn)行克腦文格爾反應(yīng)，而吲哚環(huán)是不穩(wěn)定的，1位經(jīng)過(guò)烷基化后吲哚母核會(huì)有較好的穩(wěn)定性。對(duì)于5-羧基吲哚來(lái)說(shuō)，烷基化反應(yīng)必須在羧基經(jīng)過(guò)縮合酰化后才能進(jìn)行，如果首先進(jìn)行烷基化反應(yīng)，活化1位所用的氫化鈉會(huì)與羧基反應(yīng)，從而導(dǎo)致氫化鈉用量的增加，產(chǎn)率的降低。這兩條合成路線的缺點(diǎn)在于反應(yīng)步數(shù)較多，產(chǎn)物難處理，有的反應(yīng)還需在高溫條件下進(jìn)行，以至于產(chǎn)率降低、副產(chǎn)物增多以及分離難度加大。

3.2 藥理活性 藥理活性結(jié)果顯示：通過(guò)與化合物5b、5d相比較可以看出，化合物5c 3位的異丙氧基丙烷長(zhǎng)鏈結(jié)構(gòu)可能是其產(chǎn)生T細(xì)胞抑制活性的原因；與化合物5d相比較可知9a、9b 1位的己酸甲酯長(zhǎng)鏈結(jié)構(gòu)可能是其產(chǎn)生B細(xì)胞抑制活性的原因。因此，可以考慮在接下來(lái)的試驗(yàn)中嘗試將異丙氧基丙烷和己酸甲酯長(zhǎng)鏈結(jié)構(gòu)同時(shí)引入吲哚環(huán)結(jié)構(gòu)中。

本文通過(guò)兩種不同的反應(yīng)路線模擬土槿乙酸的兩個(gè)長(zhǎng)臂結(jié)構(gòu)合成了7個(gè)目標(biāo)化合物，其中5c、9a、9b分別對(duì)T細(xì)胞和B細(xì)胞產(chǎn)生了一定的增殖抑制活性，雖然與霉酚酸酯還有差距，但是吲哚類衍生物顯示出了很好的研究前景。

[1]李曉翠，苗愛(ài)東，張洪峰，等．土荊皮的研究進(jìn)展[J]．現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2014，23（29）：3301

[2] Li T,Chen H,Yang Z,et al.Topical application of Pseudolaric acidB improve DNFB-induced contact hypersensitivity via regulating the balance of Th1/Th17/Treg cell subsets[J].Eur J Pharm Sci,2012, 45(5):668

[3] Wei N,Li T,Chen H,et al.The immunosuppressive activity of pseudolaric acid B on T lymphocytes in vitro[J].Phytother Res, 2013,27(7):980

[4] Padwa A.Intramolecular cycloaddition of carbonyl ylides as a strategy for natural product synthesis[J].Tetrahedron,2011,67(42): 8057.

[5]Pan B C,Chang H Y,Cai G L,et al.Synthetic studies on pseudolaric acid A[J].Pure Appl Chem,1989,61(3):389

[6]孔令春．吲哚美辛的臨床應(yīng)用進(jìn)展[J]．海峽藥學(xué)，2006，18（2）：116

[7] Busbee P B,Nagarkatti M,Nagarkatti P S.Natural indoles,indole-3-carbinol and 3,3'-diindolymethane,inhibit T cell activation by staphylococcal enterotoxin B through epigenetic regulation involving HDAC expression[J].Toxicol Appl Pharmacol,2014,274(1):7

[8] Carbonnelle D,Lardic M,Dassonville A,et al.Synthetic N-pyridinyl(methyl)-indol-3-ylpropanamides as new potential immunosuppressive agents[J].Eur J Med Chem,2007,42(5):686

[9] Rajasekaran S,Rao G A.Chatterjee,synthesis,anti-inflammatory and antioxidantactivity ofsome substituted benzimidazole derivatives[J].Int J Drug Dev Res,2012,4(3):303

[10]MohammedAF,Abdel-MotySG,HusseinMA,etal.Design,synthesis and molecular docking of some new 1,2,4-triazolobenzimidazol-3-yl acetohydrazidederivativeswith anti-inflammatory-analgesic activities[J].Arch Pharm Res,2013,36(12):1465

（2015-12-18收稿）

Synthesis and evaluation of novel indole derivatives as potential immunosuppressive drugs

ZHAO Yang1,WANG Yi-teng2,LI Nan1,2,CHEN Shi-ya2,LI Tan2,CHEN Hong1,2,LIU Yan-xia1
（1.School of Pharmacy,Tianjin Medical University,Tianjin Key Laboratory on Technologies Enabling Development of Clinical Therapeutics and Diagnostics,Tianjin 300070,China;2.Department of Pharmacognosy,Logistic University of PAP,Tianjin 300309,China)

Objective：To obtain indole derivatives with higher immunosuppressive activity,by synthesizing indole derivatives.Methods：Structural modifications of indole-5-carbox-aldehyde and 5-carboxy-indole were obtained through alkylation on N-1,Vilsmeier-Haack reaction and aldehyde-amine condensation on C-3,Knoevenagel reaction and acylated condensation on C-5.All the compounds were characterized by1H-NMR and HR-MS.Meanwhile,MTT assay was used to test their inhibiting activities on murine T and B cells.Results：Seven compounds of the two series were obtained;all of them were confirmed by HR-ESI-MS and1H-NMR validation.Compound 5c showed a certain degree of inhibiting activity against T cells and B cells.Compounds 9a and 9b showed a certain degree of inhibitory activity against B cells.Conclusion：By simulating the structures of two long chains of pseudolaric acid B,new indole analogues are synthesized and some of them may show a certain degree of immunosuppressive activity.

indole-5-carboxaldehyde;5-carboxy-indole;pseudolaric acid B;immuno suprressive activity

R9

A

1006－8147（2016）03-0195-04

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（30873363）；天津市應(yīng)用基礎(chǔ)項(xiàng)目基金資助（08JCYBJC070000）

趙陽(yáng)（1993-），男，碩士在讀，研究方向：天然產(chǎn)物結(jié)構(gòu)改造；通信作者：劉艷霞，E-mail:liu_yanxia126@126.com。