賀紅早，張玉武，李　青，孫　超，劉盈盈

(貴州省生物研究所，貴州　貴陽　550009)

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二種外生菌根菌對(duì)無籽刺梨扦插繁殖的影響*

賀紅早，張玉武，李青，孫超，劉盈盈▲

(貴州省生物研究所，貴州貴陽550009)

摘要：為探求一種最佳的無籽刺梨扦插繁殖技術(shù)，本研究擬通過擁有獨(dú)立知識(shí)產(chǎn)權(quán)的專利技術(shù)：一種雞油菌液體菌種的制備方法(專利號(hào)：ZL201210095414.8)和一種紫色馬勃液體菌種的制作方法(專利號(hào)：201410082596.4)所生產(chǎn)的2種外生菌根菌菌種，應(yīng)用到無籽刺梨扦插繁殖中。結(jié)果表明：處理水平2(雞油菌液體菌種50 g和紫色馬勃液體菌種50 g)扦插成活率較高(90 %)，處理水平3(雞油菌液體菌種100 g)(82 %)次之，處理水平4(紫色馬勃液體菌種100 g)為80 %，處理水平1(不使用外生菌根菌菌種)成活率最小，為73 %；處理水平1株高590 mm，處理水平2株高為860 mm，處理水平3株高為780 mm，處理水平4株高為750 mm；處理水平2生物量總計(jì)為868 g，處理水平4次之(661 g)，處理水平3為634 g，處理水平1為479 g。說明經(jīng)外生菌根菌處理的插穗，其扦插成活率、株高生長(zhǎng)、生物量明顯優(yōu)于未處理，在處理的插穗中，處理水平2(雞油菌液體菌種50 g，紫色馬勃液體菌種50 g)強(qiáng)于其它二個(gè)處理，二種外生菌根菌相互協(xié)調(diào)，共同促進(jìn)無籽刺梨的扦插后的生長(zhǎng)與發(fā)育。

關(guān)鍵詞：外生菌根菌；扦插繁殖；無籽刺梨

無籽刺梨(Rosasterilis)為貴州特有種。它屬薔薇科，多年生落葉攀緣性灌木，高4 m～6 m，生長(zhǎng)強(qiáng)旺。成熟果暗橙黃色，果面皮刺基本脫落，種子敗育，故名無籽刺梨。無籽刺梨栽植3年開始掛果，果實(shí)清香爽口，酸甜適度，維C含量特別豐富，并含多種礦物營養(yǎng)元素，被譽(yù)為“新山珍”，而且具有多種醫(yī)療保健作用，鮮食加工均宜。無籽刺梨的藥用價(jià)值高，花、果、籽皆可入藥。有健胃消食、滋補(bǔ)、止瀉等功效。成熟的刺梨果肉肥厚、味酸甜、富含SOD(超氧化物歧化酶)、維生素含量特別高，是加工保健食品的上等原料。

植物和外生菌根真菌組成的共生體，在植物生理、生態(tài)中發(fā)揮著基礎(chǔ)作用(如植物生長(zhǎng)、水分和營養(yǎng)物質(zhì)吸收、保護(hù)植物根系免遭致病細(xì)菌侵襲等)[1-3]。同時(shí)，寄主植物為外生菌根真菌提供營養(yǎng)物質(zhì)[4，5]。外生菌根真菌浸染寄主植物后，能夠促進(jìn)植物生長(zhǎng)[6-8]，同時(shí)還能調(diào)整寄主植物適應(yīng)環(huán)境的能力[9，10]。使用接種菌根后的苗木造林在實(shí)驗(yàn)室和大田應(yīng)用中均有報(bào)道[11，12]，但所使用的菌根種類非常有限[13]。而且引進(jìn)的外來菌根真菌由于適應(yīng)性等方面的原因不一定能有效的形成菌根菌落集群[14，15]，從而促進(jìn)植物的生長(zhǎng)與發(fā)育[16，17]。

本研究擬通過擁有獨(dú)立知識(shí)產(chǎn)權(quán)的專利技術(shù)：一種雞油菌液體菌種的制備方法(專利號(hào)：ZL201210095414.8)和一種紫色馬勃液體菌種的制作方法(專利號(hào)：201410082596.4)所生產(chǎn)的2種外生菌根菌菌種，應(yīng)用到無籽刺梨扦插繁殖中。通過比較無籽刺梨扦插成活率、株高生長(zhǎng)及生物量等指標(biāo)，從而分析外生菌根真菌在無籽刺梨扦插繁殖中應(yīng)用效果，為無籽刺梨產(chǎn)業(yè)化發(fā)展及喀斯特環(huán)境治理提供理論基礎(chǔ)和技術(shù)支持。

1材料與方法

1.1材料

1)扦插基質(zhì)制備：在覆蓋遮陽網(wǎng)的240 m2標(biāo)準(zhǔn)大棚中將河沙2-3份，蛭石2-3份，食用菌菌渣4-6份，外生菌根菌菌種0～100 g(如表1所示)混勻，pH控制在5.5～6.5，平鋪于長(zhǎng)0.5 m、寬0.3 m、高0.1 m的木箱中備用。

表1　試驗(yàn)因素水平

2)插穗制備：于春季萌芽前(2014年1月)采集1年生無籽刺梨硬技，切成50～80 mm的小段，浸入800～1 000 mg/kg的ABT生根粉溶液30 s，然后輕輕插入基質(zhì)20～30 mm，株距100～150 mm，行距200～250 mm，澆足定根水。

1.2方法

1)環(huán)境條件控制：扦插完成后，將大棚溫度控制在20～25 ℃，濕度控制在65 %～75 %；60天后，將遮陽網(wǎng)揭開，并使大棚通風(fēng)排氣。

2)澆水：前期2天澆水一次，新葉萌發(fā)后7天澆水一次。

3)施肥：扦插30天后，每個(gè)大棚施復(fù)合肥3 kg，方法為：將3 kg復(fù)合肥溶于100 kg水中，澆在插穗基部；60天后，將遮陽網(wǎng)揭開，每個(gè)大棚施肥6 kg，方法為將3 kg復(fù)合肥溶于100 kg水中，澆在插穗基部。

4)除草：除草的原則為“除早、除小、除了”。

5)成活率、株高及生物量測(cè)定：于扦插完成后2個(gè)月開始(2014年2月、4月、6月、8月、10月、12月)分別測(cè)定無籽刺梨扦插成活率、株高生長(zhǎng)，扦插完成后1.5年(2015年6月)測(cè)定扦插成活后無籽刺梨生物量(根、莖、枝、葉等部位)。

1.3數(shù)據(jù)分析

所有的試驗(yàn)均設(shè)置三個(gè)重復(fù)。所有數(shù)據(jù)均采用IBM SPSS version 20.0進(jìn)行分析，包括算術(shù)平均值，標(biāo)準(zhǔn)偏差和方差分析(one-way ANOVA test)。

2結(jié)果與分析

2.1無籽刺梨扦插成活率

于扦插完成后的2個(gè)月，即2014年2月、4月、6月、8月、10月、12月開始測(cè)定無籽刺梨扦插成活率(表2所示)，處理水平1(雞油菌液體菌種0 g，紫色馬勃液體菌種0 g)2個(gè)月后扦插成活率為98 %，10個(gè)月后成活率趨于穩(wěn)定，為73 %；處理水平2(雞油菌液體菌種50 g，紫色馬勃液體菌種50 g)2個(gè)月后扦插成活率為100 %，且出芽整齊，4個(gè)月后成活率為96 %，10個(gè)月后成活率為90 %，開始趨于穩(wěn)定，沒有死亡株產(chǎn)生；處理水平3(雞油菌液體菌種100 g)2個(gè)月成活率為99 %，4-10個(gè)月間略有死亡株產(chǎn)生，10個(gè)月后成活率為82 %，開始趨于穩(wěn)定；處理水平4(紫色馬勃液體菌種100 g)2個(gè)月成活率為99 %，4-10個(gè)月間略有死亡株產(chǎn)生，10個(gè)月后成活率為80 %，開始趨于穩(wěn)定。從表2可以看出，2個(gè)月和4個(gè)月內(nèi)各處理間無差異，6個(gè)月后處理水平1成活率下降較大，處理水平3和處理水平4有較小降幅，處理水平2降幅較小，處理水平2與其它處理間差異顯著，各處理在10個(gè)月后成活率均處于穩(wěn)定，其中處理水平2成活率較高(90 %)，處理水平3(82 %)次之，處理水平4為80 %，處理水平1成活率最小，為73 %，說明經(jīng)外生菌根菌處理的插穗，其成活率明顯優(yōu)于未處理，在處理的插穗中，處理水平2(雞油菌液體菌種50 g，紫色馬勃液體菌種50 g)強(qiáng)于其它二個(gè)處理，二種外生菌根菌相互協(xié)調(diào)，共同促進(jìn)無籽刺梨的扦插成活率。

表2　無籽刺梨扦插成活率

注：不同小寫字母表示差異性(One-Way ANOVAs：P<0.05)(下同)。

2.2株高生長(zhǎng)

扦插完成后的2個(gè)月，即2014年2月、4月、6月、8月、10月、12月開始測(cè)定無籽刺梨株高生長(zhǎng)。從表3可知，扦插完成后的第六個(gè)月無籽刺梨株高開始生長(zhǎng)，處理水平1株高為100 mm，處理水平2株高為200 mm，處理水平3株高170 mm，處理水平4株高180 mm，處理水平2株高為處理水平1株高的1倍；8個(gè)月后，處理水平1株高330 mm，處理水平2株高為540 mm，處理水平3株高為460 mm，處理水平4株高為420 mm；10個(gè)月后，處理水平1株高590 mm，處理水平2株高為860 mm，處理水平3株高為780 mm，處理水平4株高為750 mm；10-12月進(jìn)入休眠期，株高生長(zhǎng)停止。處理水平2株高生長(zhǎng)最快，與其它處理差異明顯；處理水平3和處理水平4株高生長(zhǎng)次之，二個(gè)處理間差異不明顯；處理水平1株高生長(zhǎng)較慢。表明，外生菌根菌處理對(duì)無籽刺梨株高生長(zhǎng)具有明顯促進(jìn)作用。

表3　無籽刺梨扦插株高生長(zhǎng)

2.3生物量

扦插完成后1.5年(2015年6月)分別對(duì)扦插成活的無籽刺梨根、莖、枝、葉等部位生物量進(jìn)行測(cè)定。表4結(jié)果表明，處理水平2生物量總計(jì)為868 g，處理水平4次之(661 g)，處理水平3為634 g，處理水平1為479 g，處理水平2生物量差不多為處理水平1生物量的1倍，各處理間差異顯著。從表4可以看出，處理水平2的根、莖、枝、葉生物量分別為56 g、479 g、198 g、135 g，均比其它處理生物量高，處理水平2能很好地促進(jìn)無籽刺梨根的分化與生長(zhǎng)，從而促進(jìn)植株整體的生長(zhǎng)，因而表現(xiàn)出較高的生物量積累。

表4　無籽刺梨扦插生物量

3 結(jié)論

于扦插完成后2個(gè)月開始(2014年2月、4月、6月、8月、10月、12月)分別測(cè)定無籽刺梨扦插成活率、株高生長(zhǎng)，扦插完成后1.5年(2016年6月)測(cè)定扦插成活后無籽刺梨生物量(根、莖、枝、葉等部位)。處理水平2(雞油菌液體菌種50 g，紫色馬勃液體菌種50 g)成活率較高(90 %)，處理水平3(雞油菌液體菌種100 g)(82 %)次之，處理水平4(紫色馬勃液體菌種100 g)為80 %，處理水平1(雞油菌液體菌種0 g，紫色馬勃液體菌種0 g)成活率最小，為73 %；處理水平1株高590 mm，處理水平2株高為860 mm，處理水平3株高為780 mm，處理水平4株高為750 mm；處理水平2生物量總計(jì)為868 g，處理水平4次之(661 g)，處理水平3為634 g，處理水平1為479 g。說明經(jīng)外生菌根菌處理的插穗，其扦插成活率、株高生長(zhǎng)、生物量明顯優(yōu)于未處理，在處理的插穗中，處理水平2(雞油菌液體菌種50 g，紫色馬勃液體菌種50 g)強(qiáng)于其它二個(gè)處理，二種外生菌根菌相互協(xié)調(diào)，共同促進(jìn)無籽刺梨的扦插后的生長(zhǎng)與發(fā)育。

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Effect of two ectomycorrhizal fungi for cutting propagation of Rosa sterilis

HE Hongzao，ZHANG Yuwu，LI Qing，SUN Chao，LIU Yingying

(GuizhouInstituteofBiology，Guiyang550009，China)

Abstract：In order to find out the best cutting propagation technique for the Rosa sterilis，liquid strains of ectomycorrhizal fungi with two patented technologies (a method of liquid strains preparation with Cantharellus cibarius Fr.(ZL 201210095414.8) and a method of liquid strains making with Calvatia lilacina(Mont.et Berk.) Lloyd.(ZL 201410082596.4)) were used in this research.The results show that the samples have higher stem cutting survival percentage (90 %) when 50g liquid strains of Cantharellus cibarius Fr.and 50 g liquid strains of Calvatia lilacina(Mont.et Berk.) Lloyd.(Treatment 2) are used，100 g liquid strains of Cantharellus cibarius Fr.( Treatment 3) have 82 % stem cutting survival percentage，and 100 g liquid strains of Calvatia lilacina(Mont.et Berk.) Lloyd.(Treatment 4) have 80 % stem cutting survival percentage，and Treatment 1 that without liquid strains have lower stem cutting survival percentage (73 %).Height growth of Treatment 1 is 590 mm，Treatment 2 was 860 mm，Treatment 3 is 780 mm，and Treatment 4 is 750 mm.Biomass accumulations of Treatment 1 is 479 g，Treatment 2 is 868 g，Treatment 3 is 634 g，and Treatment 4 is 661 g.The results indicate that stem cutting survival percentage，height growth and biomass accumulations can be improved when ectomycorrhizal fungi is used，and the ectomycorrhizal fungi used in proper proportions can greatly improve growth and development of Rosa sterilis after cottage.

Keywords：ectomycorrhizal fungi；cutting propagation；Rosa sterilis

通訊作者：▲劉盈盈(1979-)，女，碩士，副研究員。研究方向：森林生態(tài)學(xué)與植物學(xué)。

作者簡(jiǎn)介：賀紅早(1981-)，男，碩士，研究員。研究方向：森林生態(tài)學(xué)與植物學(xué)。

*基金項(xiàng)目：貴州省科技廳社發(fā)攻關(guān)項(xiàng)目(黔科合體SY字[2013]3159。

收稿日期：2015-08-22；修回日期：2015-09-09

中圖分類號(hào)：S 7

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1003-6563(2016)01-0025-04