王玉紅　楊瑞芳　林善麗　張培娟　曲遠(yuǎn)萍　高金祥

1 濱州醫(yī)學(xué)院煙臺附屬醫(yī)院腎內(nèi)科　煙臺　264100；2 濱州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院腎內(nèi)科

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維持性血液透析患者血清IL-35與心腦血管疾病的關(guān)系

王玉紅1楊瑞芳1林善麗1張培娟1曲遠(yuǎn)萍1高金祥2

1 濱州醫(yī)學(xué)院煙臺附屬醫(yī)院腎內(nèi)科煙臺264100；2 濱州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院腎內(nèi)科

【摘要】目的探討維持性血液透析(MHD)患者血清白細(xì)胞介素-35(IL-35)與心腦血管疾病的關(guān)系。方法選取穩(wěn)定的MHD患者72例，體檢健康人30例為對照組。酶聯(lián)免疫吸附法測定血清IL-35。Spearman相關(guān)分析IL-35與其它指標(biāo)的相關(guān)性。結(jié)果MHD患者IL-35水平顯著低于健康對照組。心腦血管疾病患者IL-35水平明顯低于無心腦血管疾病者。IL-35與左室射血分?jǐn)?shù)呈正相關(guān)，與高敏C反應(yīng)蛋白、氨基末端腦鈉肽前體、頸動脈內(nèi)膜中層厚度呈負(fù)相關(guān)。結(jié)論MHD患者血清IL-35水平與心腦血管疾病相關(guān)，血清IL-35可能成為MHD患者心腦血管疾病新的標(biāo)志物。

【關(guān)鍵詞】IL-35；血液透析；心血管疾病；炎癥

心腦血管疾病(cardiovascular and cerebrovascular diseases)在維持性血液透析(maintenance hemodialysis，MHD)患者中發(fā)病率及死亡率皆很高，但其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，目前爭議較多，其中炎癥與其心腦血管疾病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。針對普通人群的研究中發(fā)現(xiàn)抗炎細(xì)胞因子水平及抗炎與促炎細(xì)胞因子比例可預(yù)測心腦血管事件的發(fā)生及急性冠脈綜合征的預(yù)后[1]，而在血液透析患者中尚無這方面的報道。白細(xì)胞介素-35(interleukin-35)是2007年發(fā)現(xiàn)的一種新型抗炎因子，近年其在心腦血管疾病發(fā)病機(jī)制中的研究成為熱點。本研究旨在探討MHD患者血清白細(xì)胞介素-35和心腦血管疾病的關(guān)系，擬為MHD患者心腦血管疾病的早期預(yù)防提供新的思路。

1對象與方法

1.1研究對象2015年11—12月濱州醫(yī)學(xué)院煙臺附屬醫(yī)院血液凈化中心MHD患者72例，其中男性38例，女性34例，年齡為60(28～82)歲；健康對照組男性16例，女性14例，年齡為58歲(49～72)歲。入選標(biāo)準(zhǔn)：維持性血透3個月以上；年齡大于18歲，病情穩(wěn)定的患者。排除標(biāo)準(zhǔn)：嚴(yán)重心力衰竭、肝臟疾病、嚴(yán)重感染、活動性結(jié)核、惡性腫瘤、活動性炎癥性疾病服用免疫抑制劑者；近1個月有急性心腦血管事件；腹膜透析、腎移植轉(zhuǎn)為血液透析者；近期手術(shù)或有輸血史；不愿參與研究者。透析方式：透析器均為一次性使用，膜材料為聚砜膜，面積1.3～1.5 m2。透析用水為反滲水，標(biāo)準(zhǔn)碳酸氫鹽透析液，透析液流量為 500 mL/min，血流量 200～300 mL/min。每周透析3次，每次4 h。采用普通肝素或低分子肝素抗凝。血管通路均為自體動靜脈內(nèi)瘺或中心靜脈置管。另選本院體檢中心無肥胖、吸煙史等健康體檢者30例為對照。心腦血管疾病指既往確診心肌梗死、心絞痛、心力衰竭、腦出血、腦梗死、內(nèi)瘺閉塞等或接受血管重建術(shù)者(包括心臟血管和外周血管)。

1.2方法

1.2.1臨床資料 包括年齡、性別、吸煙史、糖尿病史和心腦血管疾病史及透析相關(guān)資料等。體重指數(shù)(BMI)=體重(kg)/ [身高(m)]2。用單室模型 spKt/V 評價透析充分性。

1.2.2實驗室檢查常規(guī)方法檢測血紅蛋白(Hb)、白細(xì)胞計數(shù)(WBC)、血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、尿酸、鈣(Ca)、磷(P)、全段甲狀旁腺素(iPTH)、白蛋白、前白蛋白、甘油三酯(TG)、總膽固醇(Tch)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、和高敏 C 反應(yīng)蛋白(hsCRP)。電化學(xué)發(fā)光法檢測氨基末端腦鈉肽前體(amino-terminal pro-B-natriuretic peptide,NT-proBNP)。

1.2.3血清IL-35測定 采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定。MHD患者于周中透析透前空腹抽血，健康對照晨起空腹抽血，置血清管，取血后30 min內(nèi)1000 g離心10 min，取血清置-20℃保存?zhèn)錅y，檢測前標(biāo)本常溫解凍。根據(jù)ELISA試劑盒說明書操作。檢測所得光密度值經(jīng)Curve expert軟件作出標(biāo)準(zhǔn)曲線，并計算出樣本對應(yīng)的濃度。

1.2.4頸動脈內(nèi)膜中層厚度(intima-media thickness，IMT)測量 血透結(jié)束后用PHILLIPS SD800超聲儀測定IMT，探頭頻率為7.5 MHz。患者仰臥位，選擇頸總動脈遠(yuǎn)端近分叉部1 cm，分叉部及頸內(nèi)動脈起始部上方1 cm處后壁進(jìn)行測量。從頸根部開始向上逐段連續(xù)觀察頸總動脈及分叉處的橫軸和縱軸實時二維圖像，取舒張末期圖像，測量從管腔內(nèi)膜內(nèi)表面至中膜外表面的垂直距離作為頸動脈IMT。

1.2.5超聲心動圖檢查MHD患者均在HD結(jié)束后2 h內(nèi)行超聲心動圖檢查。由兩位有經(jīng)驗的超聲科醫(yī)師進(jìn)行，采用PHILLIPS IE33型彩色多普勒超聲心動圖儀，探頭頻率為3.5 MHz。受檢者左側(cè)臥位，在胸骨旁標(biāo)準(zhǔn)左心室長軸觀。采用美國超聲心動圖協(xié)會推薦方法，測量左心室射血分?jǐn)?shù)(left ventricular ejection fraction，LVEF)，測3個心動周期，取其平均值。

2結(jié)果

2.1患者一般資料兩組的性別構(gòu)成和年齡無統(tǒng)計學(xué)顯著差異。共27例患者發(fā)生心腦血管疾病(37.5%)，其中腦梗死7例(25.9%)，心肌梗死4例(14.8%)，腦出血5例(18.5%)，心力衰竭5例(18.5%)，心絞痛3例(11.1%)，外周血管病1例(3.7%)，內(nèi)瘺閉塞2例(7.4%)。MHD患者一般資料見表1。

表1　MHD患者血清IL-35與臨床及實驗室指標(biāo)

2.2血透患者血清IL-35水平MHD患者血清IL-35顯著低于健康對照組【(74.7±29.6)vs(112.5±28.3)，P<0.05】。發(fā)生心腦血管疾病患者IL-35水平明顯低于無心腦血管疾病者【(60.3±25.6)vs(87.5±20.8)，P<0.05)】，見表2。

表2　心腦血管疾病與非心腦血管疾病患者透析前相關(guān)指標(biāo)比較

注：*P<0.05vs心腦血管疾病組。

2.3MHD患者血清IL-35相關(guān)因素分析Spearman相關(guān)分析顯示IL-35與LVEF呈正相關(guān)，與hs-CRP、NT-proBNP、IMT呈負(fù)相關(guān)，見表1。

3討論

Il-35是2007年新發(fā)現(xiàn)的具有強大抗炎作用的新型細(xì)胞因子，其可促進(jìn)抗炎因子IL-10的分泌，促進(jìn)可誘導(dǎo)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的增殖分化，抑制效應(yīng)性T細(xì)胞的增殖分化[2～4]，對感染、炎癥性疾病以及心腦血管疾病等的發(fā)生、發(fā)展起抑制作用[5]。針對普通人群的研究中發(fā)現(xiàn)冠心病及心力衰竭患者IL-35水平較正常人明顯下降，提示IL-35水平可能成為預(yù)測冠心病合并慢性心力衰竭患者預(yù)后的新型標(biāo)志物[1]。我們的研究顯示了血透患者IL-35水平明顯低于正常人，且合并心腦血管疾病的患者IL-35水平低于非心腦血管疾病者，MHD患者IL-35水平與LVEF呈正相關(guān)，提示抗炎因子水平下降，抗炎功能減弱亦與MHD患者心腦血管疾病的發(fā)生密切相關(guān)。

本研究顯示半數(shù)以上的MHD患者h(yuǎn)sCRP水平升高，驗證了MHD患者體內(nèi)普遍存在微炎癥狀態(tài)，大量研究已證實微炎癥狀態(tài)與MHD患者的心腦血管疾病發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[6]。本研究中心腦血管疾病患者的hsCRP水平明顯高于非心腦血管疾病患者，支持以上結(jié)論。本研究中IL-35水平與hsCRP呈負(fù)相關(guān)，與文獻(xiàn)報道[7]一致。本研究中MHD患者NT-ProBNP水平皆高于正常，與文獻(xiàn)報道[8]一致。MHD患者NT-proBNP水平升高與患者慢性心功能不全、微炎癥狀態(tài)、容量過負(fù)荷及營養(yǎng)不良等相關(guān)。我們的研究結(jié)果IL-35與NT-ProBNP水平呈負(fù)相關(guān)，提示MHD患者抗炎因子水平下降參與了患者以上情況的發(fā)生、發(fā)展。IMT為公認(rèn)的亞臨床動脈粥樣硬化指標(biāo)，是心腦血管事件的獨立危險因素。我們的研究結(jié)果顯示IL-35與IMT呈負(fù)相關(guān)，說明抗炎因子水平下降促進(jìn)了動脈粥樣硬化的發(fā)生。其可能與IL-35不僅抑制炎癥細(xì)胞粘附于血管內(nèi)皮細(xì)胞，而且抑制炎癥細(xì)胞的跨內(nèi)皮細(xì)胞浸潤有關(guān)[5]。

綜上所述，IL-35在MHD患者體內(nèi)呈低表達(dá)，且合并心腦血管疾病的患者IL-35水平更低。提示微炎癥狀態(tài)及抗炎功能減弱在MHD患者心腦血管疾病的發(fā)生中皆發(fā)揮重要作用，血清IL-35可能成為MHD患者心腦血管疾病檢測新的標(biāo)志物。但本研究樣本量較少，且為橫斷面研究，具有一定的局限性，研究結(jié)果的可靠性需今后進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量來驗證。

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Relationship between serum interleukin-35 in patients with maintenance hemodialysis and cardiovascular and cerebrovascular diseases

WANG Yuhong1YANG Ruifang1LIN Shanli1ZHANG Peijuan1QU Yuanping1GAO Jinxiang2

1 Department of Nephrology,Yantai Affiliated Hospital of Binzhou Medical University,Yantai 264100, P.R.China;2 Department of Nephrology,Binzhou Medical University Hospital

【Abstract】ObjectiveTo investigate the relationship between serum level of interleukin-35 in patients with maintenance hemodialysis (MHD) and cardiovascular and cerebrovascular diseases.Methods72 MHD patients before undergoing hemodialysis and 30 healthy controls were selected.Serum interleukin-35 was measured by enzyme-linked immunosorbant assay (ELISA).Spearman correlation was used to assess the relationship between serum interleukin-35 and other parameters.ResultsSerum interleukin-35 was significantly lower in MHD patients compared with control group;patients with cardiovascular and cerebrovascular diseases had lower serum interleukin-35 levels than those without cardiovascular and cerebrovascular diseases.MHD patients serum interleukin-35 showed positive correlation with left ventricular ejection fraction and negative correlation with high sensitive C reactive protein,amino-terminal pro-brain natriuretic peptide and carotid artery intima-media thickness.ConclusionsSerum interleukin-35 level of MHD patients was associated with cardiovascular and cerebrovascular diseases;interleukin-35 might be a novel biomarker of cardiovascular and cerebrovascular diseases.

【Keywords】interleukin-35,hemodialysis,cardiovascular disease,inflammation

(收稿日期：2015-12-29)

【中圖分類號】R692

【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A

【文章編號】1001-9510(2016)02-0106-03

通訊作者：高金祥，E-mail: gjx751012@163.com。

基金項目：濱州醫(yī)學(xué)院科技計劃(BY2013KJ51)