陳靜 謝小花 戴緣緣 安曉婷

摘 要：蜂王漿營養(yǎng)豐富，是傳統(tǒng)的滋補(bǔ)佳品，具有多項(xiàng)生理保健功效，其生理活性與干重中含量最高的蛋白質(zhì)關(guān)系密切，但蜂王漿中蛋白質(zhì)不穩(wěn)定，儲藏過程中容易發(fā)生變化，影響其生理活性的發(fā)揮。該文主要綜述了蜂王漿酶解產(chǎn)物的穩(wěn)定性等特性及生理功能，為蜂王漿在食品、藥品、化妝品等領(lǐng)域的應(yīng)用提供一定的參考。

關(guān)鍵詞：蜂王漿；酶解產(chǎn)物；特性；生理功能

中圖分類號 S896.3 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A 文章編號 1007-7731（2016）13-0044-03

蜂王漿又名蜂王乳、蜂皇漿等，由5～15日齡工蜂舌腺和上顎腺分泌，呈乳白色或淡黃色，是一種專門用來喂養(yǎng)蜂王及3日齡幼蜂的特殊漿狀物質(zhì)。蜂王漿是介于食品和藥品之間的天然保健食品，營養(yǎng)價(jià)值極高且沒有任何毒副作用[1-2]。新鮮蜂王漿中水分含量占62.5%～70%，干物質(zhì)含量占30.0%～37.5%，蛋白質(zhì)在其干重中所占比例最高，另外還含有脂類、糖類、游離氨基酸、維生素、礦物質(zhì)、活性蛋白酶等物質(zhì)，具有延緩衰老、增強(qiáng)機(jī)體免疫力、抗氧化、抗腫瘤、抗菌、抗高血壓等多項(xiàng)生理保健功效[3-4]。但是蜂王漿很不穩(wěn)定，尤其是其中含量較高且與其生理功效關(guān)系密切的蛋白質(zhì)在儲藏的過程中很容易發(fā)生變化，從而影響了蜂王漿生理功效的發(fā)揮并使其營養(yǎng)價(jià)值降低。本文主要介紹蜂王漿酶解產(chǎn)物的特性及其生理保健功效，為蜂王漿儲藏、產(chǎn)品開發(fā)、功能性研究提供參考。

1 蜂王漿蛋白質(zhì)穩(wěn)定性的研究

新鮮蜂王漿中蛋白質(zhì)含量占12%～15%，由水溶性蛋白和水不溶性蛋白組成，含量在46%～89%的水溶性蛋白是蜂王漿蛋白的主要組成成分。蜂王漿成分復(fù)雜，含有多種生理活性成分，其對儲藏條件要求較高，一般在低溫條件下冷凍保藏，其中的蛋白質(zhì)隨著溫度和時(shí)間等條件的變化會發(fā)生降解[5]。

張紅城等通過SDS-PAGE凝膠電泳法對在常溫下貯存5個(gè)月的蜂王漿品質(zhì)進(jìn)行研究，結(jié)果表明，蜂王漿中的兩種水溶性蛋白（相對分子質(zhì)量分別為85.2kD和60.7kD）發(fā)生了降解，且比57kD的蛋白降解更明顯[6]。張娟等研究表明，在-20℃儲存條件下，蜂王漿水溶性蛋白較穩(wěn)定，在40d后P1（分子量為88kDa）譜帶開始降解，且降解速度較慢；而在4℃條件下，5d內(nèi)P1譜帶就迅速降解；20℃條件下，P1譜帶的降解速度更快，而水溶性蛋白中P1譜帶變化可在一定程度上代表蜂王漿的新鮮度[7]。孫曉軍等研究了35d內(nèi)蜂王漿在不同的儲藏溫度下（-18℃、4℃及25℃）品質(zhì)的變化，發(fā)現(xiàn)隨著溫度升高及貯存時(shí)間的延長，蜂王漿的穩(wěn)定性漸漸變差，水溶性蛋白含量也逐漸下降[8]。

我國是蜂王漿的生產(chǎn)大國，研制出了很多的蜂王漿產(chǎn)品，如凍干粉、口服液、膠囊等。由于蜂王漿尤其是其中蛋白質(zhì)的不穩(wěn)定性，使蜂王漿產(chǎn)品的應(yīng)用推廣受到了一定的限制，有時(shí)候也會將其中蛋白質(zhì)去除后再添加進(jìn)各類食品中去，但這樣會造成資源浪費(fèi)和營養(yǎng)損失。通過酶法對蛋白質(zhì)進(jìn)行改性后，不僅可使蛋白質(zhì)的消化吸收率和穩(wěn)定性得到了提高，而且改善了其持水性、溶解性等功能特性[9]。

2 蜂王漿酶解產(chǎn)物特性及生理功能研究

2.1 穩(wěn)定性 程尚等選用蛋白酶K對蜂王漿進(jìn)行酶解，并研究了在優(yōu)化水解條件下獲得的酶解產(chǎn)物經(jīng)過酸（pH4.0）、堿（pH10.0）和熱（70℃）處理30min后的穩(wěn)定性，結(jié)果表明該酶解產(chǎn)物在酸、堿及熱的條件下穩(wěn)定性均較高[10]。戚向陽分別采用4種蛋白酶對蜂王漿進(jìn)行酶解，發(fā)現(xiàn)酶解產(chǎn)物的對熱和酸穩(wěn)定性與原漿相比明顯增強(qiáng)，其中復(fù)合蛋白酶酶解效果最好，對復(fù)合蛋白酶水解條件優(yōu)化后制備出的酶解產(chǎn)物酸、熱穩(wěn)定性和水溶性提高很多[9]。劉佳霖等選用4種不同蛋白酶（木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、菠蘿蛋白酶和無花果蛋白酶）對蜂王漿進(jìn)行酶解，發(fā)現(xiàn)中性蛋白酶酶解產(chǎn)物中水溶性蛋白質(zhì)提取率明顯高于其余3種酶解產(chǎn)物，且與對照組比較，水溶性蛋白總量差異不顯著，酶解產(chǎn)物在酸堿及熱的環(huán)境下穩(wěn)定性較強(qiáng)[11]。

2.2 吸濕保濕性 季文靜等采用木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶對蜂王漿進(jìn)行水解，發(fā)現(xiàn)在20℃、相對濕度分別為81%、43%條件下，胰蛋白酶的吸濕保濕性能較好。在優(yōu)化后的胰蛋白酶酶解條件下制備的酶解物與原漿和骨膠原相比表現(xiàn)出更好的吸濕保濕性能，且具有分子量小、溶解性好等優(yōu)點(diǎn)[12]。李英華等采用堿性蛋白酶對蜂王漿進(jìn)行水解，并以蜂王漿凍干粉及骨膠原為參照，測定了酶解產(chǎn)物在25℃、相對濕度分別為20%、50%及65%條件下吸濕及保濕性能，結(jié)果表明，在優(yōu)化后的酶解條件下，酶解產(chǎn)物與凍干粉及骨膠原相比吸濕保濕性明顯提高[13]。

2.3 抗氧化作用 Hang Guo等選用6種蛋白酶對對蜂王漿進(jìn)行酶解，并分別比較了不同酶解物對亞油酸過氧化的抑制作用，結(jié)果表明，與鮮漿相比酶解物抑制亞油酸過氧化的作用顯著提高，且蛋白酶N的活性最高，其酶解物中小于1kDa的組分抗氧化活性優(yōu)于其他組分[14]。許建香等采用胃蛋白酶、胰蛋白酶以及胃-胰蛋白酶對蜂王漿進(jìn)行水解，分別測定蜂王漿水溶性蛋白和各酶解產(chǎn)物的抗氧化活性，結(jié)果表明，蜂王漿水溶性蛋白本身抗氧化活性非常弱，但是酶解以后抗氧化活性明顯增強(qiáng)，且胃-胰酶解產(chǎn)物活性最強(qiáng)，采用膜分離技術(shù)對該產(chǎn)物分離后發(fā)現(xiàn)，其小于1kDa的酶解物表現(xiàn)出最強(qiáng)的清除DPPH、抑制亞油酸氧化以及總抗氧化能力[15]。

2.4 降血壓作用 近年來，隨著經(jīng)濟(jì)的高速發(fā)展和生活水平的快速提高，高血壓已經(jīng)成為人們危害健康的一類多發(fā)疾病，對健康危害極大。血管緊張素轉(zhuǎn)化酶（簡稱ACE）能使血管緊張素I結(jié)構(gòu)改變，轉(zhuǎn)化為具有較強(qiáng)升血壓作用的血管緊張素II，而且ACE還能使舒緩激肽失去降血壓作用[16]，因此能抑制ACE活性的物質(zhì)都有顯著的降血壓活性。Toshiro Matsui等采用胃蛋白酶、胰凝乳蛋白酶和胰蛋白酶三種蛋白酶共同對蜂王漿進(jìn)行水解，制備的酶解物對ACE的 IC50達(dá)0.099mg/mL，表現(xiàn)出很高的降血壓活性，而鮮漿及蜂王漿蛋白組分則未表現(xiàn)出ACE抑制活性，對自發(fā)性高血壓大鼠飼喂酶解物，發(fā)現(xiàn)其心臟收縮壓明顯降低[17]。許建香等運(yùn)用RP-HPLC法分別測定了蜂王漿水溶性蛋白及兩種純化蛋白、酶解產(chǎn)物、水溶性蛋白質(zhì)及酶解產(chǎn)物分離物的ACE抑制活性，結(jié)果表明，水溶性蛋白及純化蛋白ACE抑制活性較弱，而酶解產(chǎn)物ACE抑制活性顯著增強(qiáng)，且分子量小于1kDa的分離物ACE抑制活性最強(qiáng)[18]。Katsu-hiko T等用蛋白酶N對蜂王漿進(jìn)行酶解，從酶解產(chǎn)物中分離得到3種小肽，其體內(nèi)外試驗(yàn)結(jié)果均表明其具有很強(qiáng)的降血壓活性[19]。張偉光等研究表明，采用胃-胰蛋白酶對蜂王漿進(jìn)行酶解后制備的酶解物與原漿相比表現(xiàn)出很強(qiáng)的ACE抑制活性，其中分子量小于1kDa的分離物活性最強(qiáng)，IC50為0.33mg/mL[20]。

2.5 其他生理活性 季文靜研究發(fā)現(xiàn)蜂王漿酶解產(chǎn)物有一定的抗衰老和提高免疫力的作用。在優(yōu)化的胰蛋白酶水解條件下，制備出的蜂王漿酶解產(chǎn)物低劑量時(shí)，可干預(yù)由D-半乳糖誘導(dǎo)的小鼠體重降低狀況，高劑量能改善抗衰老小鼠的活動能力下降情況。同時(shí)，與衰老小鼠相比，低劑量蜂王漿酶解物表現(xiàn)出顯著的對脂多糖刺激下小鼠的脾臟B淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化的促進(jìn)作用，高劑量效果更顯著，且與原漿相比差異顯著[21]。勵建榮等采用胃蛋白酶、胰蛋白酶以及胃-胰蛋白酶對蜂王漿進(jìn)行酶解，比較了蜂王漿水溶性蛋白以及不同酶解產(chǎn)物對α-葡萄糖苷酶和胰脂肪酶的抑制活性，結(jié)果表明，胃蛋白酶酶解產(chǎn)物與原漿及其他酶解產(chǎn)物相比抑制活性最強(qiáng)，且分子量在650Da以下的組分抑制活性最強(qiáng)，說明酶解產(chǎn)物可能對肥胖、Ⅱ型糖尿病患者以及潛在人群健康有利[22]。

3 結(jié)語

蜂王漿中蛋白質(zhì)含量豐富，且與其生理功效密切相關(guān)，但由于蛋白質(zhì)在儲藏過程中不穩(wěn)定，容易發(fā)生變化，嚴(yán)重影響蜂王漿的品質(zhì)，通過對蜂王漿進(jìn)行酶法修飾以后，制備出的酶解物多肽含量高，且由于多肽分子量較小，酶解物消化吸收率和穩(wěn)定性都得到了明顯提高。本文主要介紹了目前有關(guān)蜂王漿酶解產(chǎn)物的特性及生理功效的研究進(jìn)展，為蜂王漿產(chǎn)品的開發(fā)利用提供一定的借鑒。

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