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天仙果預(yù)防關(guān)節(jié)炎活性部位篩選

2016-06-18 07:13張秋萍陳雪梅李少華王增烈高忠坂
武夷學(xué)院學(xué)報(bào) 2016年3期

張秋萍,陳雪梅,李少華,王增烈,高忠坂

(1.廈門市中醫(yī)院藥劑科,福建廈門361009;2.武夷學(xué)院茶與食品學(xué)院,福建武夷山354300;3.廈門市馬巷衛(wèi)生院藥劑科,福建廈門361009;4.三明市食品藥品檢測中心,福建三明365001)

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天仙果預(yù)防關(guān)節(jié)炎活性部位篩選

張秋萍1,陳雪梅1,李少華2,王增烈3,高忠坂4

(1.廈門市中醫(yī)院藥劑科,福建廈門361009;2.武夷學(xué)院茶與食品學(xué)院,福建武夷山354300;3.廈門市馬巷衛(wèi)生院藥劑科,福建廈門361009;4.三明市食品藥品檢測中心,福建三明365001)

摘要:采用溶劑法提取分離天仙果不同極性部位,以Freund's完全佐劑型關(guān)節(jié)炎大鼠模型對(duì)天仙果提取分離的各部位進(jìn)行預(yù)防關(guān)節(jié)炎的藥效學(xué)篩選。實(shí)驗(yàn)表明天仙果醇提、醇提水沉部位具有明顯的預(yù)防關(guān)節(jié)炎作用,其中以醇提水沉組效果最佳,即中等極性部位具有預(yù)防關(guān)節(jié)炎作用。

關(guān)鍵詞:天仙果;活性部位;預(yù)防關(guān)節(jié)炎;Freund's完全佐劑

天仙果為??崎艑僦参锾煜晒‵icus erecta)的根,俗稱“牛奶籽根”、“牛奶漿根”。在福建省武夷地區(qū)民間常將天仙果與肉類煲湯食用,香氣四溢,湯水醇美,是當(dāng)?shù)鼐用耦A(yù)防關(guān)節(jié)炎藥膳煲湯首選食材。本文以佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠模型[1]對(duì)天仙果提取分離的各部位[2]進(jìn)行預(yù)防關(guān)節(jié)炎的藥效學(xué)篩選,現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 材料

天仙果,購于福建省武夷山市,足容量測量裝置,70%酒精(食用級(jí)),F(xiàn)reund's完全佐劑(批號(hào):SLBK1731V sigma),蒸餾水。

1.2 動(dòng)物

Wistar大鼠,體質(zhì)量(180±20)g,清潔級(jí)(上海斯萊克公司,合格證號(hào):2014-0005)。正常飼養(yǎng)3天后供試。

2 方法與結(jié)果

2.1 天仙果不同部位的制備

2.1.1 天仙果水提部位的制備:

取天仙果粉末(過12目篩)40 g,置于1 L燒瓶中,加20倍量水,浸泡1 h,煎煮兩次,每次1 h,濾過,合并濾液,濃縮至2.5 g/mL(以生藥量計(jì)),備用。

2.1.2 天仙果水提醇沉部位的制備:

取天仙果粉末(過12目篩)40 g,置于1 L燒瓶中,加20倍量水,浸泡1 h,煎煮兩次,每次1 h,濾過,合并濾液,濃縮至1∶1.1,加3倍量70%乙醇沉淀,冰箱靜置過夜,除去上清液,下層溶液回收乙醇至無醇味,加水調(diào)整為2.5 g/mL(以生藥量計(jì)),備用。

2.1.3 天仙果醇提部位的制備:

取天仙果粉末(過12目篩)40 g,置于1 L燒瓶中,加20倍量70%乙醇,浸泡1 h,煎煮兩次,每次1 h,濾過,合并濾液,回收乙醇至無醇味,加水調(diào)整為2.5 g/mL(以生藥量計(jì)),備用。

2.1.4 天仙果醇提水沉部位的制備:

取天仙果粉末(過12目篩)40 g,置于1 L燒瓶中,加20倍量70%乙醇,浸泡1 h,煎煮兩次,每次1 h,濾過,合并濾液,回收乙醇至無醇味,加3倍量水沉淀,冰箱靜置過夜,除去上清液,濃縮,加水調(diào)整為2.5 g/mL(以生藥量計(jì)),備用。

2.2 方法與結(jié)果

2.2.1 天仙果提取物對(duì)弗氏完全佐劑型大鼠足腫脹度的影響

?。?80±20)g Wistar雄性大鼠,實(shí)驗(yàn)前先適應(yīng)性喂養(yǎng)3 d,隨機(jī)分為六組,每組10只,預(yù)留一組做為空白對(duì)照組,其余各組于每只大鼠右后足跖皮內(nèi)注射Freund's完全佐劑0.1 mL致炎。測量致炎及給藥后大鼠足腫脹度,造模后第8 d開始灌胃給藥,連續(xù)給藥7 d,各給藥組按照為5 g/kg(以生藥量計(jì))體重劑量的灌胃,空白對(duì)照組、模型對(duì)照組給予相同體積的生理鹽水。觀察天仙果提取物對(duì)弗氏完全佐劑型大鼠足腫脹度的影響[3]。

用藍(lán)色記號(hào)筆在大鼠右足踝關(guān)節(jié)處劃圈,用足容量測量裝置測量大鼠足腫脹度。采用graphpad prism5.01[4],各組結(jié)果以(mean±s)表示,組間比較采用均數(shù)比較法,實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1,分析結(jié)果見圖1。計(jì)算公式:

其中Ec和Et分別代表模型對(duì)照組和給藥組的平均腫脹度。

表1 天仙果提取物對(duì)弗氏完全佐劑型大鼠足腫脹度的影響(mean±s,n=10)

圖1 天仙果提取物對(duì)弗氏完全佐劑型大鼠足腫脹度的影響

根據(jù)統(tǒng)計(jì),模型組與空白組比較,受試大鼠足腫脹度P<0.01,差異具有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,提示造模成功;給藥后,醇提部位組與模型組比較P<0.05,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;醇提水沉組與模型組比較P<0.05,差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.2.2 天仙果提取物對(duì)弗氏完全佐劑型大鼠體質(zhì)量的影響

稱量致炎前及給藥前后2.2.1中大鼠體質(zhì)量,采用graphpad prism5.01,各組結(jié)果以(mean±s)表示,組間比較采用均數(shù)比較法,實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2,分析結(jié)果見圖2。

表2 天仙果提取物對(duì)弗氏完全佐劑型大鼠體重的影響(mean±s,n=10)

圖2 天仙果提取物對(duì)弗氏完全佐劑型大鼠體質(zhì)量的影響

各組在造模前和給藥后體質(zhì)量比較P>0.05,差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 討論

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎是一類致殘性極高的自身免疫功能障礙性疾病,現(xiàn)今抗風(fēng)濕藥物一線藥物以激素、非甾體抗炎藥為主,療效明確、毒副作用較大。天仙果作為武夷山地區(qū)民間藥食同源植物,主要用于預(yù)防關(guān)節(jié)炎性疾病,因此本實(shí)驗(yàn)選用弗氏完全佐劑型關(guān)節(jié)炎模型,采用造模后7 d給藥方法進(jìn)行研究,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,天仙果對(duì)弗式完全佐劑型關(guān)節(jié)炎模型具有明顯的效果,其中尤以醇提、醇提水沉組效果為佳,也側(cè)面印證了當(dāng)?shù)孛癖妼⑻煜晒c肉類煲湯方法的科學(xué)性;通過對(duì)弗氏完全佐劑型大鼠體重的分析,天仙果各提取部位均對(duì)大鼠體重?zé)o影響,不影響大鼠體重的正常增長,大鼠的體重波動(dòng)都在正常范圍內(nèi)。

參考文獻(xiàn):

[1]夏麗娟,陳飛虎,阮晶晶,等.重組人內(nèi)抑素誘導(dǎo)佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠滑膜細(xì)胞凋亡的研究[J].中國藥理學(xué)通報(bào),2008,24 (8)∶52-56.

[2]龔莉,向大雄,隋艷華.黃精心血管活性部位的篩選[J].中藥新藥與臨床藥理,2007,18(4)∶301-302.

[3]徐叔云,卞如濂,陳修.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].北京∶人民衛(wèi)生出版社,2001∶920-921.

[4]彭芳,金建華,余方.Graphad prism 5.01在科技期刊統(tǒng)計(jì)圖表中的應(yīng)用[J].中國科技縱橫,2010(1)∶104-105.

(責(zé)任編輯:夏婷婷)

Screening on the Active Fractions of Prevent Arthritis from Ficus Erecta

ZHANG Qiuping1,CHEN Xuemei1,LI Shaohua2,WANG ZengLie3,GAO Zhongban4

(1.Department of Pharmacy,Xiamen TraditionaL Chinese HospitaL,Xiamen,F(xiàn)ujian 361009;2.SchooL of Tea and Food Science,Wuyi University,Wuyishan,F(xiàn)ujian 354300;3.Xiamen Maxiang HospitaL Pharmacy,Xiamen,F(xiàn)ujian 361009;4.Sanming Food and Drug Inspection Center,Sanming,F(xiàn)ujian 365001)

Abstract:The active components from Ficus erecta were extracted by soLvent separation methods,and their Prevent Arthritis effects on AA rat modeL. Among the extracts from Ficus erecta,ethanoL and ethanoL-water extract has good Prevent arthritis effect,ethanoL-water extract better,the parts with medium poLarity from Ficus erecta have the best Prevent arthritis.

Key words:Fairy fruit;active site;prevent arthritis;Freund 's compLete adjuvant

中圖分類號(hào):R284.2

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A

文章編號(hào):1674-2109(2016)03-0015-03

收稿日期:2015-09-10

基金項(xiàng)目:福建省衛(wèi)生廳青年課題(2013-2-97)。

作者簡介:張秋萍(1985-),女,漢族,藥師,主要從事中藥制劑學(xué)方向研究。