賀小青

臺(tái)州市中醫(yī)院，浙江 臺(tái)州 317700

?

杭白菊壓制前后品質(zhì)和穩(wěn)定性比較研究

賀小青

臺(tái)州市中醫(yī)院，浙江 臺(tái)州 317700

[摘要]目的研究杭白菊壓縮前后品質(zhì)的變化和穩(wěn)定性。方法通過性狀、水分、薄層色譜、有效成分含量比較傳統(tǒng)飲片和壓縮飲片的穩(wěn)定性及品質(zhì)差異。結(jié)果杭白菊壓縮前后，性狀、水分、浸出物、薄層色譜和指標(biāo)性成分含量無明顯變化；壓縮飲片比傳統(tǒng)飲片穩(wěn)定性好。結(jié)論壓縮飲片適合花類藥材生產(chǎn)及推廣。

[關(guān)鍵詞]杭白菊；壓縮飲片；品質(zhì)；穩(wěn)定性

0引言

杭白菊為菊花的一個(gè)中藥品種，是我國的傳統(tǒng)中藥之一，已有2 000多年的應(yīng)用歷史。2002年列入我國衛(wèi)生部公布的既是食品又是藥品的物品之一。其性味甘、苦、微寒，歸肺肝經(jīng)，菊花具有疏風(fēng)、清熱解毒、平肝明目、消疲怡神之功效[1]。杭白菊化學(xué)成分比較復(fù)雜，其中黃酮類[2]、揮發(fā)油[3-4]、綠原酸[5]、木犀草苷[6]和3,5-O-二咖啡?；鼘幩醄6]是其主要有效成分，另外，杭白菊中含有維生素A、B、C、E等，還含有17種氨基酸，其中8種為人體必需氨基酸[7]。經(jīng)臨床藥理研究杭白菊具有抗菌[4]、抗炎、抗自由基、抗氧化[8-9]、舒血管[10]、降血脂、增強(qiáng)毛細(xì)血管抵抗力、抗腫瘤[11]、驅(qū)鉛等作用。

目前，杭白菊的醫(yī)藥處方及日常食用量比較大，但其質(zhì)地疏松、體積龐大，難以儲(chǔ)存及包裝，在儲(chǔ)存過程中占用較大的空間，其易受環(huán)境的影響而使品質(zhì)發(fā)生變化。為改進(jìn)生產(chǎn)儲(chǔ)存的方便性及藥材品質(zhì)的穩(wěn)定性，本試驗(yàn)選取花類藥材杭白菊為實(shí)驗(yàn)對象，進(jìn)行定量壓制成為定量壓縮飲片，比較傳統(tǒng)飲片和壓縮飲片在壓制前后及儲(chǔ)存過程中相關(guān)性狀、鑒別、有效成分含量的差異。

1儀器與試藥

1.1儀器戴安U3000高效液相色譜儀(美國賽默飛世爾科技有限公司)；智能壓制機(jī)；電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(上海一恒科技有限公司)；薄層掃描色譜儀(瑞士卡瑪公司)；數(shù)顯電子恒溫水浴鍋(天津泰斯特儀器有限公司)；高速臺(tái)式離心機(jī)(上海安亭儀器廠)；電子分析天平(梅特勒AL-204)；Agilent Eclipse XDB-C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)色譜柱。

1.2試藥杭白菊(批號：20130501，產(chǎn)地：浙江)，購自溫州華宇中藥飲片有限公司；綠原酸對照品(批號：110753-200413)，木犀草苷對照品(批號：111720-200905，含量94.0%)，3,5-O-二咖啡酰基奎寧酸對照品(批號：111782-201204，含量：94.2%)，均購自中國藥品生物制品檢定所；甲醇、乙醇、甲酸、磷酸、乙酸乙酯、冰醋酸、甲苯為分析純；液相用甲醇、乙腈為色譜純；水為娃哈哈純凈水。

2方法與結(jié)果

2.1壓縮飲片的制備選取杭白菊傳統(tǒng)飲片，定量稱取于智能壓制機(jī)的壓制模具中，設(shè)置智能壓制機(jī)壓制參數(shù)，壓力為30 t，壓制時(shí)間5～20 s，壓制成型，包裝保存，供實(shí)驗(yàn)用。

2.2性狀比較杭白菊呈蝶形或扁球形，直徑2.5～4 cm，常數(shù)個(gè)相連成片。舌狀花類白色或黃色，平展或微折疊，彼此粘連，通常無腺點(diǎn)；管狀花多數(shù)，外露。壓縮飲片散開后以上性狀特點(diǎn)在壓縮飲片均可見，葉花未見破碎，并且壓縮飲片斷面壓制緊實(shí)，層狀，儲(chǔ)存體積大大減小。

2.3煮散時(shí)間取杭白菊壓縮飲片，單個(gè)，置20倍量水中，靜置浸泡30 min后進(jìn)行煎煮，記錄煎液開始沸騰至本品全部散開所需時(shí)間，飲片在5 min內(nèi)全部散開，結(jié)果煮散時(shí)間符合要求。

2.4薄層鑒別取本品1.0 g，剪碎，加石油醚(30～60 ℃)20 mL，超聲處理10 min，棄去石油醚，藥渣揮干，加稀鹽酸1 mL與乙酸乙酯50 mL，超聲處理30 min，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，作為供試品溶液。取菊花對照藥材1 g，同法制成對照藥材溶液。取綠原酸對照品，加乙醇制成每1 mL含0.5 mg的對照品溶液。照薄層色譜法[1]，吸取上述3種溶液各0.5～1 μL，分別點(diǎn)于同一聚酰胺薄膜上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水(1∶15∶1∶1∶20)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365 nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。杭白菊傳統(tǒng)飲片和壓縮飲片無差別。

2.5水分測定取0、3、6、9、12、18個(gè)月的杭白菊傳統(tǒng)飲片與壓縮飲片，照水分測定方法[1]測定杭白菊傳統(tǒng)飲片和壓縮飲片的水分含量，見表1。

表1　杭白菊傳統(tǒng)飲片和壓縮飲片水分含量比較(%)

由表1結(jié)果可知，同一批杭白菊藥材，在壓縮之后，水分含量無明顯變化；在18個(gè)月儲(chǔ)存期內(nèi)，傳統(tǒng)飲片和壓縮飲片水分含量都略有增加，但壓縮飲片相較于傳統(tǒng)飲片更加穩(wěn)定，故從水分方面分析，壓縮飲片優(yōu)于傳統(tǒng)飲片。

2.6菊花含量測定[1,5-6]

2.6.1色譜條件以Agilent Eclipse XDB-C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)為色譜柱。以乙腈為流動(dòng)相A，以0.1%磷酸溶液為流動(dòng)相B，按如下比例進(jìn)行梯度洗脫：0～11 min，10%～18% A；11～30 min，18%～20% A；30～40 min，20%～80% A。檢測波長為348 nm。菊花對照品和杭白菊樣品色譜圖如圖1所示。

圖1　菊花對照品及杭白菊樣品色譜圖

2.6.2對照品溶液的制備精密稱取綠原酸對照品3.42 mg、木犀草苷對照品3.24 mg、3,5-O-二咖啡?；鼘幩釋φ掌?.14 mg，分別置于10 mL容量瓶中，加70%甲醇至刻度，搖勻，制成儲(chǔ)備液。據(jù)下述實(shí)驗(yàn)要求，將對照品溶液稀釋，濃度分別為：綠原酸114.0、68.4、34.2、17.1、13.7 μg/mL，木犀草苷101.5、60.9、30.5、15.2、12.2 μg/mL，3,5-O-二咖啡?；鼘幩釋φ掌?30.0、78.0、39.0、19.5、15.6 μg/mL。

2.6.3供試品溶液的制備取本品粉末(過一號篩)約0.25 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇25 mL，密塞，稱定重量，超聲處理(功率300 W，頻率45 kHz)40 min，放冷，再稱定重量，用70%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.6.4線性關(guān)系考察精密取濃度分別為114.0、68.4、34.2、17.1、13.7 μg/mL的綠原酸對照品溶液，101.5、60.9、30.5、15.2、12.2 μg/mL的木犀草苷對照品溶液，130.0、78.0、39.0、19.5、15.6 μg/mL的3,5-O-二咖啡?；鼘幩釋φ掌啡芤焊?0 μL，注入高效液相色譜儀，以進(jìn)樣量(μg/mL)為橫坐標(biāo)，測定峰面積為縱坐標(biāo)，作標(biāo)準(zhǔn)曲線。并以最小二乘法計(jì)算得回歸方程：綠原酸Y=0.159 6 X+0.101 8，R2=0.999 8；木犀草苷Y=0.250 9 X-0.216 0，R2=0.999 7；3,5-O-二咖啡?；鼘幩醂=0.185 4 X-0.148 7，R2=0.999 7。結(jié)果顯示，綠原酸在線性范圍13.7～114.0 μg/mL、木犀草苷在線性范圍12.2～101.5 μg/mL、3,5-O-二咖啡?；鼘幩嵩诰€性范圍15.6～130.0 μg/mL內(nèi)有良好的線性關(guān)系，符合試驗(yàn)要求。

2.6.5精密度考察取對照品溶液綠原酸68.4 μg/mL、木犀草苷60.9 μg/mL、3,5-O-二咖啡?；鼘幩?8.0 μg/mL，按以上色譜條件，重復(fù)進(jìn)樣6次，測定峰面積，計(jì)算RSD值結(jié)果顯示，綠原酸的RSD為0.59%，木犀草苷為1.06%，3,5-O-二咖啡酰基奎寧酸為0.94%，表明儀器精密度符合試驗(yàn)要求。

2.6.6準(zhǔn)確度考察精密稱取已知含量菊花粉末6份，每份約0.25 g，吸取綠原酸、木犀草苷、3,5-O-二咖啡酰基奎寧酸對照品溶液適量，按“2.6.3”項(xiàng)下的方法進(jìn)行提取制備，對照品溶液和供試品溶液各進(jìn)樣10 μL，測得峰面積并計(jì)算含量，得綠原酸平均回收率為99.05%、RSD=1.73%，木犀草苷為98.74%、RSD=1.32%，3,5-O-二咖啡?；鼘幩釣?01.35%、RSD=1.91%，結(jié)果表明，準(zhǔn)確度符合試驗(yàn)要求。

2.6.7穩(wěn)定性考察稱取菊花粉末約0.25 g，按“2.6.3”項(xiàng)下的方法進(jìn)行提取制備，取供試液10 μL，分別在0、5、10、15、20、25 h進(jìn)樣，測定綠原酸、木犀草苷、3,5-O-二咖啡?；鼘幩?，在25 h內(nèi)綠原酸峰面積為3.683 5、3.571 6、3.592 8、3.663 6、3.637 2、3.660 2，RSD=1.21%；木犀草苷為2.457 5、2.439 1、2.516 8、2.485 2、2.409 4、2.505 9，RSD=1.67%；3,5-O-二咖啡酰基奎寧酸為12.727 9、12.518 3、12.693 7、12.705 6、12.649 2、12.593 6，RSD=0.63%。結(jié)果表明，樣品溶液在25 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.6.8重復(fù)性考察稱取菊花粉末6份，每份約0.25 g，按“2.6.3”項(xiàng)下的方法進(jìn)行提取制備，對照品溶液和供試品溶液各進(jìn)樣10 μL，測得峰面積并計(jì)算含量，綠原酸平均含量為0.24%、RSD=1.53%，木犀草苷平均含量為0.17%、RSD=0.87%，3,5-O-二咖啡?；鼘幩崞骄繛?.91%、RSD=1.15%。

2.6.9樣品測定取杭白菊傳統(tǒng)飲片和壓縮飲片，以及儲(chǔ)存0、3、6、9、12、18個(gè)月的杭白菊相應(yīng)樣品，打粉，按“2.6.3”項(xiàng)下方法進(jìn)行提取制備，對照品溶液和供試品溶液各進(jìn)樣10 μL，測得峰面積并計(jì)算含量。如表2所示杭白菊飲片經(jīng)過壓縮后，含量無明顯變化；在18個(gè)月儲(chǔ)存期內(nèi)，杭白菊傳統(tǒng)飲片含量有所減少，壓縮飲片含量無明顯變化，壓縮飲片較傳統(tǒng)飲片更加穩(wěn)定，故從含量方面分析，壓縮飲片優(yōu)于傳統(tǒng)飲片。

表2　杭白菊傳統(tǒng)飲片和壓縮飲片含量比較

3結(jié)論

本試驗(yàn)所用綠原酸、木犀草苷、3,5-O-二咖啡?；鼘幩岬暮繙y定方法經(jīng)線性考察，精密度、準(zhǔn)確度、穩(wěn)定性及重復(fù)性均符合規(guī)定，可作為杭白菊含量的測定方法。

杭白菊壓縮飲片在煎煮的過程中，可恢復(fù)至原有藥材或飲片的形狀。不改變中藥飲片或中藥材的原有性狀，也不會(huì)改變藥性和原有煎藥效果。且在儲(chǔ)存過程中，壓縮飲片較傳統(tǒng)飲片更穩(wěn)定。因此，其既保持了傳統(tǒng)中藥方劑的療效和特點(diǎn)，又克服了傳統(tǒng)中藥劑量不準(zhǔn)和衛(wèi)生狀況差的缺點(diǎn)，

便于實(shí)現(xiàn)中藥配方的標(biāo)準(zhǔn)化、自動(dòng)化，符合中藥飲片行業(yè)的發(fā)展趨勢。

參考文獻(xiàn)：

[1]國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典(一部)[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社,2010:292.

[2]徐菊茂.杭白菊中黃酮類成分的提取動(dòng)力學(xué)研究[J].中國藥業(yè),2012,21(16):31-32.

[3]楊秀偉,韓美華,陶海燕,等.微波加工和蒸制杭白菊揮發(fā)油成分的GC-MS分析[J].中國中藥雜志,2007,32(3):227-231.

[4]殷紅,黃越燕,蔣小紅,等.杭白菊揮發(fā)油的抗菌抗炎作用及對PGE2的影響[J].浙江預(yù)防醫(yī)學(xué),2007,19(8):8-12.

[5]楊俊,蔣惠娣,戈震,等.杭白菊綠原酸及其他成分的含量在采摘期中的動(dòng)態(tài)變化[J].中國中藥雜志,2003,38(11):833-836.

[6]程亮,杜偉鋒,叢曉東,等.近紅外光譜法快速測定杭白菊中3種成分的含量[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué),2013,19(7):85-89.

[7]高學(xué)玲,賀曼曼,鄒敏亮,等.不同品種菊花中游離糖類及游離氨基酸含量的HPLC分析[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā),2012,24(5):639-643.

[8]王婷婷,王少康,黃桂玲,等.菊花主要活性成分含量及其抗氧化活性測定[J].食品科學(xué),2013,34(15):95-99.

[9]陳倩,陳尊委,徐竑珂,等.酵母細(xì)胞提取物依賴NO信號途徑提高杭白菊抗氧化活性[J].杭州師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2013,12(3):227-232.

[10]蔣惠娣,王玲飛,周新妹,等.杭白菊乙酸乙酯提取物的舒血管作用及相關(guān)機(jī)制[J].中國病理生理雜志,2005,21(2):334-338.

[11]孫向玨,沈漢明,朱心強(qiáng).菊花提取物抗腫瘤作用的研究進(jìn)展[J].中草藥,2008,39(1):148-151.

Studies on the quality and stability of Chrysanthemum morifolium before and after compression

HE Xiao-qing

(Taizhou Hospital of TCM,Taizhou 317700,China)

[Abstract]ObjectiveTo study the quality changes and stability of Chrysanthemum morifolium before and after compression.MethodsThe stability and quality of Chrysanthemum morifolium before and after compression were compared according to the changes of description,water,TLC and the content of active ingredient.ResultsBefore and after compression,the description,water,extracts,TLC and the content of active ingredient did not significantly change;the compressed Chrysanthemum morifolium was more stable than traditional dandelion.ConclusionCompressed decoction pieces are suitable for production and promotion of flower medicine.

Key words：Chrysanthemum morifolium; Compressed decoction pieces; Quality; Stability

收稿日期：2015-08-24

基金項(xiàng)目：臺(tái)州市科技資金補(bǔ)助項(xiàng)目(14SF05)

DOI:10.14053/j.cnki.ppcr.201604027