王　霞，潘　彤，楊文玲

(天津市血液中心檢驗(yàn)科，天津 300110)

·經(jīng)驗(yàn)交流·

不同離心處理對(duì)全自動(dòng)血型分析系統(tǒng)檢測(cè)結(jié)果的影響

王霞，潘彤，楊文玲△

(天津市血液中心檢驗(yàn)科，天津 300110)

摘要:目的探討血型檢測(cè)中不同標(biāo)本處理方式對(duì)BECKMAN PK7300全自動(dòng)血型儀檢測(cè)結(jié)果的影響。方法選擇100例已知ABO血型標(biāo)本進(jìn)行3種離心處理：即3 000 r/min離心5 min(A組)、3 090 r/min離心10 min(B組)和4 000 r/min離心10 min(C組)，然后再進(jìn)行ABO及Rh血型檢測(cè)。結(jié)果A、B兩組ABO及Rh血型正確判讀率均為100%，均未出現(xiàn)錯(cuò)誤和可疑結(jié)果；C組ABO及RH血型正確判讀率分別為為79%和82%，分別出現(xiàn)可疑結(jié)果21和18例。結(jié)論作為全自動(dòng)血型檢測(cè)系統(tǒng)運(yùn)行的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一，標(biāo)本處理方式的合理選擇會(huì)直接影響血型結(jié)果的準(zhǔn)確性。

關(guān)鍵詞:全自動(dòng)血型檢測(cè)系統(tǒng)；離心處理；ABO血型

ABO血型檢測(cè)是獻(xiàn)血者常規(guī)血篩檢測(cè)項(xiàng)目之一，已有實(shí)驗(yàn)室開(kāi)始使用全自動(dòng)血型檢測(cè)系統(tǒng)。目前使用的血型儀多為開(kāi)放式檢測(cè)系統(tǒng)，設(shè)備廠(chǎng)家向用戶(hù)推薦部分設(shè)備使用參數(shù)。按照《血站實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理規(guī)范》、GBT22576-2008/ISO15189-2007《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力的專(zhuān)用要求》 、ISO/IEC15189-2007《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力的認(rèn)可準(zhǔn)則》及《血站技術(shù)操作規(guī)程》(2012版)的要求，血站血篩實(shí)驗(yàn)室在采用一項(xiàng)新的檢測(cè)方法，或更換現(xiàn)有檢測(cè)方法時(shí)，在正式投入使用之前應(yīng)對(duì)與檢測(cè)相關(guān)的參數(shù)進(jìn)行確認(rèn)。本文以BECKMAN PK7300全自動(dòng)血型儀為例探討不同標(biāo)本處理方式對(duì)血型檢測(cè)的結(jié)果是否造成影響。

1資料與方法

1.1一般資料來(lái)自本中心無(wú)償獻(xiàn)血者EDTA-K2抗凝血液標(biāo)本100例，其中A、B、O及AB型各25例。

1.2儀器與試劑BECKMAN PK7300全自動(dòng)血型儀(美國(guó)貝克曼公司)；標(biāo)準(zhǔn)A、B、O紅細(xì)胞(上海血液生物醫(yī)藥)，抗A、抗B和抗D標(biāo)準(zhǔn)抗血清(上海血液生物醫(yī)藥)； BECKMAN PK7300全自動(dòng)血型分析系統(tǒng)配套使用P3、P4梯形微孔板。

1.3方法在已知血型標(biāo)本中挑選出100例標(biāo)本其中A、B、O及AB各25例，先后進(jìn)行3種離心處理：(1)使用PK7300全自動(dòng)血型分析系統(tǒng)操作指南中推薦的標(biāo)本離心參數(shù)3 000 r/min離心5 min將此組設(shè)定為A組；(2)考慮到本血站酶免與血型同為一個(gè)標(biāo)本管，在保證酶免的離心要求下驗(yàn)證此離心條件對(duì)血型檢測(cè)是否有影響，選擇3 090 r/min離心10 min的離心參數(shù)此組設(shè)定為B組；(3)選擇本實(shí)驗(yàn)室最高離心速度即4 000 r/min離心10 min作為對(duì)照組設(shè)定為C組，用以驗(yàn)證指南中提及高速離心影響檢測(cè)結(jié)果的結(jié)論。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理利用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，采用多個(gè)獨(dú)立標(biāo)本非參數(shù)檢驗(yàn)的Kruskal-Wallis檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1BECKMAN PK7300全自動(dòng)血型儀3種離心處理后ABO血型檢測(cè)結(jié)果采用BECKMAN PK7300全自動(dòng)血型儀對(duì)3種離心處理后ABO血型進(jìn)行檢測(cè)，并對(duì)不同組正確判讀率進(jìn)行比較，三組間正確判讀率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

表1　　3種離心ABO檢測(cè)結(jié)果

2.2BECKMAN PK7300全自動(dòng)血型儀3種離心處理后Rh血型檢測(cè)結(jié)果 采用BECKMAN PK7300全自動(dòng)血型儀對(duì)3種離心處理后Rh血型進(jìn)行檢測(cè)，并對(duì)不同組正確判讀率進(jìn)行比較，三組間正確判讀率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表2。

表2　　3種離心處理Rh檢測(cè)結(jié)果

3討論

血型的正確鑒定是血站檢驗(yàn)科最重要的常規(guī)檢測(cè)之一，因?yàn)檠驼_與否關(guān)系到受血者的生命安全[1]。血站質(zhì)量手冊(cè)中明確規(guī)定提供給臨床的血液制品ABO及RH血型正確率必須為100%。國(guó)內(nèi)大多數(shù)血站以往普遍采用U型微板聯(lián)合酶標(biāo)儀的檢測(cè)方法，但該法的缺點(diǎn)是過(guò)程繁瑣且易受人為及外界因素的影響[2]。如反應(yīng)環(huán)境的溫濕度、離心力大小及震蕩強(qiáng)度等，使結(jié)果出現(xiàn)偏差從而造成嚴(yán)重的事件。目前多種血型自動(dòng)化檢測(cè)系統(tǒng)受到關(guān)注，BECKMAN PK7300以其自動(dòng)化程度高、標(biāo)準(zhǔn)化、檢測(cè)通量大及能實(shí)現(xiàn)批量化[3-4]檢測(cè)等優(yōu)點(diǎn)受到用戶(hù)的青睞。BECKMAN PK7300全自動(dòng)血型檢測(cè)儀加樣精密度高、血型結(jié)果有原始圖像記錄跟蹤，保證檢測(cè)結(jié)果的可靠性和可溯性、有效降低工作強(qiáng)度、防止人為錯(cuò)誤、提高實(shí)驗(yàn)效率和正反定型判讀準(zhǔn)確性及節(jié)約試劑成本等優(yōu)點(diǎn)。

本研究在儀器使用前確認(rèn)研究中在儀器用戶(hù)指南中注意到推薦的標(biāo)本離心條件有3種：(1)轉(zhuǎn)子半徑15 cm轉(zhuǎn)速3 000 r/min離心5 min；(2)轉(zhuǎn)子半徑20 cm轉(zhuǎn)速2 500 r/min離心5 min；(3)轉(zhuǎn)子半徑30 cm轉(zhuǎn)速2 000 r/min離心5 min。為此本課題對(duì)3 000 r/min離心5 min的離心條件進(jìn)行確認(rèn)。試驗(yàn)結(jié)果顯示此離心條件下ABO及RH血型正確判讀率均為100%?？紤]到本血站的體采科的留樣現(xiàn)狀無(wú)法改變，在保證酶免檢測(cè)的離心要求下驗(yàn)證此離心條件是否影響全自動(dòng)血型儀的血型檢測(cè)，因此對(duì)3 090 r/min離心10 min的離心方式來(lái)進(jìn)行驗(yàn)證及確認(rèn)，試驗(yàn)結(jié)果顯示ABO及Rh血型正確判讀率均為100%。以上2種離心方法的檢測(cè)結(jié)果均達(dá)到血型定性試驗(yàn)正確判讀率大于95%的可接受標(biāo)準(zhǔn)。為此確定3 090 r/min離心10 min作為本實(shí)驗(yàn)室血型檢測(cè)的標(biāo)本處理方法。此外，也對(duì)4 000 r/min離心10 min的檢測(cè)結(jié)果ABO及RH正確判讀率分別為79%和82%的原因進(jìn)行了分析，可能是由于高速離心使血細(xì)胞壓得過(guò)緊以至于細(xì)胞吸樣受到阻礙，導(dǎo)致細(xì)胞加注過(guò)少再進(jìn)行稀釋后從而影響結(jié)果判讀。3種離心處理的正確判斷率比較雖然無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但4 000 r/min離心10 min的正確判讀率未達(dá)到血型定性試驗(yàn)判讀率的要求，而且與指南推薦的參數(shù)差異較大因此離心條件不適用。綜上所述，全自動(dòng)血型檢測(cè)中標(biāo)本處理方式對(duì)檢測(cè)結(jié)果起到關(guān)鍵作用，應(yīng)遵照廠(chǎng)商指南中推薦條件進(jìn)行驗(yàn)證，若當(dāng)試驗(yàn)參數(shù)有所變化時(shí)應(yīng)做好檢測(cè)系統(tǒng)與標(biāo)本前處理?xiàng)l件的確認(rèn)與優(yōu)化，以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確可靠。

參考文獻(xiàn)

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DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.10.061

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B

文章編號(hào)：1673-4130(2016)10-1433-02

(收稿日期：2016-02-03)