張開松

（河南省水產(chǎn)科學(xué)研究院，鄭州450044）

加工工藝對酶活作用的影響研究

張開松

（河南省水產(chǎn)科學(xué)研究院，鄭州450044）

酶制劑因在制粒環(huán)節(jié)失活而影響其作用的發(fā)揮，因此本試驗從酶制劑的添加工藝入手，避免酶活的損失，并驗證其養(yǎng)殖效果。試驗采用2種添加工藝，分別是用酶制劑預(yù)處理原料后制粒，以及制粒后采用液體酶制劑噴涂。經(jīng)過為期兩個月的養(yǎng)殖試驗，后噴涂酶制劑組明顯促進(jìn)鯉魚生長，而兩種工藝均能提高鯉魚免疫力。

鯉魚；酶制劑；預(yù)處理；后噴涂；養(yǎng)殖效果

酶制劑作為“綠色”添加劑能夠提高飼料的轉(zhuǎn)化率，促進(jìn)動物的生長，降低環(huán)境污染，綜合提高動物的生產(chǎn)性能，具有廣闊的應(yīng)用前景，被認(rèn)為是一種無殘留、無污染、無公害的環(huán)保型添加劑。但因其熱敏性問題嚴(yán)重制約了酶制劑在飼料工業(yè)中的應(yīng)用，如何在加工工藝上最大限度減少酶制劑的損失是當(dāng)今研究的熱點(diǎn)。本研究主要解決的問題就是酶制劑添加工藝的改進(jìn)，這對降低飼料成本，提高飼料綜合利用率具有積極作用，并使大規(guī)模生產(chǎn)“綠色”飼料成為可能。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗用魚為鯉魚，共1800條。試驗共分5個處理（對照組、木聚糖酶組、纖維素酶組、β-葡聚糖酶組和后噴涂木聚糖酶組），每個處理4個重復(fù)。共20個缸，每缸放養(yǎng) 90條，鯉魚的平均體重為 34.25± 3.12 g。

1.2 試驗飼料

試驗所用飼料以魚粉、豆粕、膨化大豆、玉米蛋白等原料為主要蛋白原（表1）。原料經(jīng)粉碎后通蒸汽熟化，熟化后成粉狀料平均分成5份，其中3份粉狀料中分別添加0.8%的木聚糖酶、纖維素酶和β-葡聚糖酶，在含水量為12%、溫度為40℃的條件下反應(yīng)8 min，經(jīng)滅活后由無錫華明HKJ-218配合顆粒飼料機(jī)制成粒徑為1.5 mm的硬顆粒飼料。

另外2份經(jīng)熟化的粉狀料，由無錫華明HKJ-218配合顆粒飼料機(jī)制粒，其中一份作為對照組飼料為基礎(chǔ)飼料，另外一份顆粒飼料用后噴涂的方法添加0.8%的液體木聚糖酶，所有飼料經(jīng)自然風(fēng)干后備用。

表1 基礎(chǔ)飼料主要成分含量

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗魚養(yǎng)殖于室內(nèi)循環(huán)水系統(tǒng)中。用基礎(chǔ)飼料投飼馴化到魚主動來搶食為止，馴化時間15天，正式飼喂60天。每天投喂3次，時間分別為7:30、11: 30、16:30。投飼率為魚體重的2-3%，每周調(diào)整一次投飼率。試驗期間水溫為23±2℃，池水pH為7.3-8.0，溶氧>5 mg/L。

1.4 測定

1.4.1 生長性能

試驗開始及結(jié)束時分別對各水族缸的魚進(jìn)行稱重并記錄其初重（g）和末重（g），計算其增重率及餌料系數(shù)。

增重率=（末重－初重）（g）/初重（g）×100%

餌料系數(shù)=總投飼量（g）/（末重－初重）（g）

1.4.2 生化指標(biāo)

從每個水族缸隨機(jī)抽取6尾魚，于尾動脈取血。首先每條魚抽取1mL血液并用檸檬酸鈉溶液抗凝，之后馬上用于血紅蛋白的測定。接下來每條魚抽取全血，無須抗凝，4℃放置 2 h后，于離心機(jī)中3500 r/min、4℃離心30 min，取上清為血清，所取血清-20℃保存用于超氧化物歧化酶（SOD）及溶菌酶（LSZ）的測定。以上指標(biāo)的測定均采用南京建成生物技術(shù)研究所生產(chǎn)的測試盒進(jìn)行測試。

SOD計算公式如下：

式中各符號意義如下：A-對照管吸光度；Aw-測定管吸光度；V-反應(yīng)液總體積 (mL)；V0-取樣體積(mL)。

LSZ計算公式如下：

式中符號表示如下：A-測定管透光度；A0-空白管透光度；Aw-標(biāo)準(zhǔn)管透光度；T-標(biāo)準(zhǔn)管濃度；N-樣本稀釋倍數(shù)。

1.5 數(shù)據(jù)分析

應(yīng)用SPSS11.0進(jìn)行One-Way ANOVA分析，Duncan多重比較，數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 試驗結(jié)果

2.1 養(yǎng)殖效果試驗

養(yǎng)殖試驗中0組為對照組，飼喂基礎(chǔ)飼料。試驗1、2、3組是酶預(yù)處理飼料，就是在基礎(chǔ)飼料中分別添加0.8%的木聚糖酶、β-葡聚糖酶和纖維素酶，在含水量為12%、溫度為40℃的條件下反應(yīng)8 min后制成顆粒飼料。試驗4組是在基礎(chǔ)飼料表面后噴涂液體木聚糖酶，添加比例為0.8%。

表2 酶制劑的添加對鯉魚生長指標(biāo)的影響

從表2可以看出，經(jīng)過60天的飼喂，第4組鯉魚的增重率與對照組相比有顯著性差異 （p＜0.05），較對照組提高了10.29%，第1、2、3組鯉魚的增重率與對照組相比差異不顯著（p＞0.05）。第3和第4組的飼料系數(shù)與對照組相比有顯著性差異 （p＜0.05），分別較對照組降低了9.01%和11.23%。

2.2 免疫指標(biāo)

從表3中各組的血紅蛋白含量可以看出，第4組也就是后噴涂木聚糖酶組鯉魚血液中的血紅蛋白含量最高，并且顯著高于其它各組（p＜0.05），其中較對照組提高了11.58%。第1、2、3組與對照組相比沒有顯著性差異（p＞0.05）。

超氧化物歧化酶（SOD）是使細(xì)胞免受氧化傷害的關(guān)鍵酶之一，也就是SOD的含量越高，動物體的免疫力越強(qiáng)。從表3中可以看出，第1組即用木聚糖酶預(yù)處理飼料組鯉魚血清中SOD含量與對照組0組相比有顯著性差異 （p＜0.05），較對照組提高了24.08%。第2、3、4組鯉魚血清中SOD的含量與對照組相比沒有顯著性差異（p＞0.05）。

溶菌酶（LSZ）也是衡量機(jī)體免疫力的指標(biāo)之一，血清中LSZ的含量高在一定程度上也說明了動物體有較強(qiáng)的免疫力。從表3各組鯉魚血清中LSZ的數(shù)值可以看出，第4組即后噴涂液體木聚糖酶組鯉魚血清中LSZ的含量顯著高于對照組（p＜0.05），較對照組提高了43.98%。第1、2、3組與對照組相比沒有顯著性差異（p＞0.05）。

3 討論

酶制劑作為一種新型“綠色”環(huán)保型添加劑，在生產(chǎn)中的正效應(yīng)已得到了充分驗證，但是飼用酶制劑屬于蛋白質(zhì)，在飼料的成型加工工藝中，因制粒過程中溫度及壓力的急劇升高，大部分酶活都會消失。為了解決這一問題，本研究主要從酶制劑的添加工藝入手，避免酶活的損失，使酶制劑的效果得以真正實現(xiàn)。本次試驗主要采用兩種添加工藝，分別是用酶制劑對飼料原料進(jìn)行預(yù)先處理然后再制粒，以及制粒結(jié)束后，在顆粒飼料表面進(jìn)行液體酶制劑的噴涂。通過養(yǎng)殖試驗對其作用效果進(jìn)行驗證。從上面的試驗結(jié)果可以看出，后噴涂液體木聚糖酶組鯉魚的增重率較對照組顯著提高，飼料系數(shù)較對照組顯著降低。用纖維素酶預(yù)處理飼料組的鯉魚飼料系數(shù)也較對照組顯著降低。因此，就鯉魚的生長效果來看，后噴涂酶制劑的作用效果更加明顯。

通過對鯉魚免疫指標(biāo)的測定可以看出，用后噴涂酶制劑的方法可以顯著提高鯉魚血液中血紅蛋白及血清中溶菌酶的含量。而用木聚糖酶預(yù)先處理飼料原料的方法，可以顯著提高鯉魚血清中超氧化物歧化酶（SOD）的含量。因此，用酶制劑預(yù)處理飼料原料及用液體酶后噴涂顆粒飼料的方法都可以起到提高養(yǎng)殖魚類免疫力的作用。

Study on the effects of processing technology on enzyme activity

Zhang Kaisong

(Henan Academy of Fishery Science,Zhengzhou 450044,Henan,China)

Owing to the inactivation of enzyme preparation in the granulation step,which affected the function of the enzyme preparation.Therefore,this experiment started from the adding process of the enzyme preparation for the sake of avoiding the enzyme activity loss,then the effects of the corresponding feed was verified in a growth trial.Two adding processes,namely the raw materials pretreated with enzyme preparation and then granulated,as well as liquid enzyme preparation spraying after the granulation were adopted.After a two-month growth trial,the growth performance of common carp was obviously promoted in the enzyme preparation post-spraying group.Both processes can improve the immunity of common carp.

common carp;enzyme preparation;pretreatment;post-spraying;growth performance

表3 酶制劑的添加對鯉魚免疫指標(biāo)的影響