劉娟娟 景明 陳正君 陳暉 盧年華 張艷霞

摘要：目的 對(duì)10味常用殺蟲(chóng)中藥的殺蟲(chóng)效果進(jìn)行篩選，為研制新的植物源農(nóng)藥奠定基礎(chǔ)。方法 以中藥提取物對(duì)3種害蟲(chóng)的校正死亡率為觀察指標(biāo)，分別采用載玻片浸漬法、微量點(diǎn)滴法、蟲(chóng)體浸漬法測(cè)定10種常用殺蟲(chóng)中藥的水提物及醇提物對(duì)朱砂葉螨、甘藍(lán)蚜、黏蟲(chóng)的觸殺作用。結(jié)果 中藥醇提物對(duì)3種害蟲(chóng)均有觸殺作用，水提物無(wú)明顯效果。其中，百部醇提物對(duì)3種害蟲(chóng)均有明顯的觸殺作用，校正死亡率分別為78.7%、85.9%、96.7%；苦皮藤、苦參、蒼耳子、甘遂乙提物對(duì)朱砂葉螨有較好的觸殺作用，將苦皮藤、百部、苦參、蒼耳子、甘遂按體積比2∶1∶1.5∶1.5∶1.5∶1.5配伍時(shí)，對(duì)朱砂葉螨殺蟲(chóng)活性較單味藥提取物增強(qiáng)，校正死亡率為96.5%。瑞香狼毒、藜蘆、蒼耳子、白芥子醇提物對(duì)甘藍(lán)蚜有較強(qiáng)的殺滅作用，將蒼耳子、百部、瑞香狼毒、藜蘆按體積比1∶1.5∶2∶2配伍時(shí)，其對(duì)甘藍(lán)蚜的活性增強(qiáng)，校正死亡率為93.1%。結(jié)論 中藥提取物經(jīng)配伍后，其殺蟲(chóng)活性增強(qiáng)。

關(guān)鍵詞：中草藥；提取物；配伍；朱砂葉螨；甘藍(lán)蚜；黏蟲(chóng)；殺蟲(chóng)活性

DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2016.07.014

中圖分類號(hào)：R285.5 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1005-5304（2016）07-0054-05

Comparison of Insecticidal Efficacy of Commonly Used TCM Pesticides and Preliminary Research on Compatibility LIU Juan-juan， JING Ming， CHEN Zheng-jun， CHEN Hui， LU Nian-hua， ZHANG Yan-xia （College of Pharmacy， Gansu University of Chinese Medicine， Lanzhou 730000， China）

Abstract： Objective To lay the foundation of new botanical pesticides by screening the insecticidal efficacy of 10 commonly used TCM pesticides. Methods Slide immersion method， trace intravenous drip method and insect body dipping method were respectively used to measure contact action of water extract and ethanol extract of the 10 commonly used TCM pesticides to Teranychus cinnbarinus， Brevicoryne brassicae and Mythimna separate， with herbal extracts to three kinds of insect pests of corrected mortality as observation indexes， Results Alcohol extracts for three kinds of insect pests were found to have contact action， and water extracts had no obvious effect. The Stemonae Radix alcohol extract had obvious contact action on three kinds of insect pests， and corrected mortality rates were 78.7%， 85.9%， and 96.7%， respectively； ethanol extracts of Angled Bittersweet， Sophorae Flavescentis Radix， Xanthii Fructus and Kansui Radix showed good contact action to Teranychus cinnbarinus，. The volume ratio of compatibility among Angled Bittersweet， Sophorae Flavescentis Radix， Xanthii Fructus and Kansui Radix was 2：1：1.5：1.5：1.5：1.5. The insecticidal activity to Teranychus cinnbarinus， was stronger than extracts of single herbs， and corrected mortality was 96.5%. Alcohol extracts of Stellera， hellebore， white mustard seed， and Xanthii Fructus showed good contact action to Brevicoryne brassicae. When the volume ratio of compatibility among Xanthii Fructus， Stemonae Radix， Stellera， and hellebore was 1：1.5：2：2， the activity to Brevicoryne brassicae increased. and corrected mortality was 93.1%. Conclusion The insecticidal activity will be enhanced after TCM extracts are under compatibility.

Key words： Chinese herbal medicine； extract； compatibility； Teranychus cinnbarinus； Brevicoryne brassicae； Mythimna separate； insecticidal activity

基金項(xiàng)目：國(guó)家科技支撐計(jì)劃（2011BAI05B0218）

通訊作者：景明，E-mail：jm@gszy.edu.cn

近年來(lái)從植物中尋找殺蟲(chóng)活性物質(zhì)是目前研究開(kāi)發(fā)無(wú)公害農(nóng)藥的重要途徑之一[1]。中草藥不僅具有醫(yī)療保健作用，而且還具有殺蟲(chóng)的作用[2]。我國(guó)自20世紀(jì)30年代開(kāi)始，曾對(duì)煙草、魚(yú)藤、巴豆、百部等殺蟲(chóng)植物進(jìn)行過(guò)比較廣泛的研究[3]。進(jìn)入20世紀(jì)90年代，對(duì)有殺蟲(chóng)活性的植物資源又作了進(jìn)一步的調(diào)查研究。對(duì)單味藥的研究較多，尤其是對(duì)其有效成分的研究[4]。王氏等[5]分別對(duì)蒼耳子用不同溶劑提取，發(fā)現(xiàn)不同溶劑提取物對(duì)菜粉蝶的作用各不相同。胡氏等[6]采用活體及盆栽試驗(yàn)研究水煎液提取的苦楝皮活性成分對(duì)蠐螬、金針蟲(chóng)殺蟲(chóng)效果，顯示苦楝皮水煮液對(duì)地下害蟲(chóng)有殺滅作用。本實(shí)驗(yàn)選取10種中藥，采用乙醇回流提取和水提取2種方法，選用標(biāo)準(zhǔn)試蟲(chóng)在實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行嚴(yán)格的生物測(cè)定，測(cè)定這些中藥的殺蟲(chóng)作用，為研制新的植物源農(nóng)藥奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 供試?yán)ハx(chóng)

黏蟲(chóng)Mythimna separate引自甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院敏感體系，室內(nèi)自然條件下飼養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)時(shí)挑選整齊一致的幼蟲(chóng)供試。甘藍(lán)蚜Brevicoryne brassicae和朱砂葉螨Teranychus cinnbarinus均采自甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院應(yīng)用昆蟲(chóng)研究溫室。

1.2 供試中藥

百部、蒼耳子、苦參、丁香、甘遂、瑞香狼毒、藜蘆、苦皮藤、苦楝皮、雷公藤，甘肅中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院中藥房。

1.3 主要試劑與儀器

無(wú)水乙醇，分析純，天津市得思化學(xué)試劑有限公司。DHP-9272型電熱恒溫培養(yǎng)箱（上海一恒科學(xué)儀器有限公司），QE-10A型高速粉碎機(jī)（武義科技有限公司），R-210型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（瑞士BUCHI公司）。

1.4 中藥活性部位提取

將上述中藥在小型粉碎機(jī)上粉碎，過(guò)10目篩制成粗粉，每味中藥分別稱取40 g放入圓底燒瓶，分別用純水和80%乙醇電熱套加熱提取2次，第1次加8倍量溶劑，第2次加6倍量溶劑，每次提取時(shí)間為1 h；提取完畢后，抽濾，將2次濾液合并，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮，最后得到較濃油狀或漿狀的原粉粗體物，經(jīng)體積測(cè)量，濃縮液1 mL相當(dāng)于1 g原藥材，即濃度為1 g/mL。供生物測(cè)定試驗(yàn)使用。

1.5 生物測(cè)定方法

1.5.1 載玻片浸漬法 參照聯(lián)合國(guó)糧食及農(nóng)業(yè)組織推薦的測(cè)定螨類抗藥性的標(biāo)準(zhǔn)方法——載玻片浸漬法[7]加以改進(jìn)。粘在玻片雙面膠帶上的供試螨在溫度（26±1）℃、濕度60%～80%的室內(nèi)環(huán)境下放置4 h，然后用雙目解剖鏡檢查，剔除死亡和不活潑的個(gè)體，記載總的活螨數(shù)，將帶螨的一端浸入事先配好的藥液中，6 s后取出，迅速用剪好的三角濾紙將周圍多余的水吸干，溫度（26±1）℃、濕度60%～80%，光照明暗交替16 h/8 h培養(yǎng)48 h，每24 h檢查1次。用毛筆輕觸其身體，以螨足不動(dòng)者為死亡。每個(gè)濃度5個(gè)處理。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。

1.5.2 微量點(diǎn)滴法 參照文獻(xiàn)[8]微量點(diǎn)滴法并加以改進(jìn)。在培養(yǎng)皿中墊入濾紙，保濕，剪取新鮮油菜葉放入培養(yǎng)皿中。將每味中藥提取液分別稀釋5個(gè)不同系列濃度，由低濃度開(kāi)始給甘藍(lán)蚜給藥，用虹吸管取1 μL點(diǎn)滴在甘藍(lán)蚜背部，分別在24 h和48 h進(jìn)行觀察，用毛筆輕觸蟲(chóng)體，不動(dòng)者視為死亡。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。

1.5.3 蟲(chóng)體浸漬法 在培養(yǎng)皿中墊入濾紙，保濕，剪取新鮮小麥葉子放入培養(yǎng)皿中。將提取液稀釋為5個(gè)不同系列濃度，倒入小燒杯中，挑取同日齡同樣大小黏蟲(chóng)10只（每個(gè)濃度各10只），將其蟲(chóng)體浸漬在藥液中10 s，將其表面液體用濾紙吸干，然后用鑷子輕輕夾起，放入培養(yǎng)皿中，將培養(yǎng)皿放入25 ℃恒溫培養(yǎng)箱中，24 h和48 h檢查死亡情況，用毛筆輕觸身體，不動(dòng)者和不能爬行者視為死亡。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用Excel2003和SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，以校正死亡率來(lái)表示實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

2 結(jié)果

2.1 載玻片浸漬法對(duì)朱砂葉螨的觸殺作用

中藥醇提物作用優(yōu)于中藥水提物，中藥水提物幾乎無(wú)作用，見(jiàn)表1。苦皮藤、苦參、蒼耳子、甘遂、百部醇提物分別對(duì)朱砂葉螨具有很強(qiáng)的觸殺作用，毒力較強(qiáng)。從校正死亡率分析，在相同濃度下，苦皮藤、苦參、蒼耳子、甘遂、百部對(duì)朱砂葉螨觸殺作用較其他5味藥強(qiáng)。當(dāng)這5味藥醇提物按照一定比例配伍后，單味藥稀釋100倍，其校正死亡率明顯高于單味藥醇提物，見(jiàn)表2。

2.2 微量點(diǎn)滴法對(duì)甘藍(lán)蚜的觸殺作用

醇提物作用明顯優(yōu)于水提物，瑞香狼毒、百部、藜蘆、蒼耳子乙醇提取物對(duì)甘藍(lán)蚜有較強(qiáng)的殺滅作用，見(jiàn)表3。從校正死亡率分析，瑞香狼毒、百部、藜蘆、蒼耳子醇提物在相同的濃度下校正死亡率明顯高于其他幾味藥和中藥水提物，將這4味藥醇提物按照一定比例配伍后，復(fù)合物校正死亡率明顯高于單味藥，見(jiàn)表4。

2.3 采用蟲(chóng)體浸漬法對(duì)黏蟲(chóng)的觸殺作用

10味中藥水和醇提物對(duì)黏蟲(chóng)的觸殺實(shí)驗(yàn)中，只有百部醇提物對(duì)黏蟲(chóng)具有觸殺作用，且毒力較強(qiáng)，其他幾味中藥水和醇提物均無(wú)作用。5次重復(fù)實(shí)驗(yàn)后其校正死亡率為96.7%。

3 討論

采用10種中藥提取物，以載玻片浸漬法、微量點(diǎn)滴法、蟲(chóng)體浸漬法分別實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明，中藥水提物對(duì)害蟲(chóng)無(wú)抑制作用和觸殺作用；但醇提物作用較好，百部對(duì)黏蟲(chóng)、蚜蟲(chóng)、朱砂葉螨均有觸殺作用，苦皮藤、苦參、蒼耳子、甘遂醇提物對(duì)朱砂葉螨觸殺作用較好，瑞香狼毒、百部、藜蘆、蒼耳子對(duì)甘藍(lán)蚜觸殺作用較好；經(jīng)混配后其觸殺作用增強(qiáng)。

10種常用殺蟲(chóng)中藥分別來(lái)自不同的科，其不但在治療疾病的時(shí)候有很好的療效，而且由于它們的偏性，對(duì)植物蟲(chóng)害也有防治作用。其中，瑞香狼毒、藜蘆、甘遂、雷公藤、蒼耳子均為有毒性的中藥，以其毒性來(lái)防治病蟲(chóng)害早有研究，其單味藥及從中分離出來(lái)的化學(xué)成分對(duì)害蟲(chóng)有觸殺作用。有研究顯示，藜蘆堿、苦參堿、魚(yú)藤酮和煙堿苦參堿對(duì)害蟲(chóng)具有較強(qiáng)的胃毒和觸殺作用[7-8]，但中藥混配作用觸殺害蟲(chóng)的實(shí)驗(yàn)報(bào)道目前較少。本實(shí)驗(yàn)經(jīng)過(guò)單味藥篩選后，經(jīng)中藥混配研究，發(fā)現(xiàn)中藥混配其藥效明顯強(qiáng)于單味藥，其藥效學(xué)機(jī)理及有效成分有待進(jìn)一步研究。

另外，本實(shí)驗(yàn)僅為室內(nèi)毒力測(cè)定，未涉及田間藥效，為準(zhǔn)確評(píng)價(jià)所試藥劑對(duì)害蟲(chóng)的毒殺作用，今后應(yīng)對(duì)田間防效試驗(yàn)做進(jìn)一步研究。

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（收稿日期：2015-11-18）

（修回日期：2015-11-28；編輯：華強(qiáng)）