張茜　譚瑜　李雁群　鐘敏　胡雪瓊

摘要[目的]分析廣西特色植物蒜頭果（Malania oleifera）油脂中保健性脂肪酸的含量，探討利用蒜頭果種質(zhì)資源開(kāi)發(fā)保健油脂的價(jià)值。[方法]從廣西巴馬采集成熟蒜頭果果實(shí)，取新鮮的蒜頭果果仁，破碎并經(jīng)凍干制成干粉，再用石油醚采用索氏提取法提取油脂，提取的油脂經(jīng)硫酸-甲醇甲酯化后用GCMS分析各種脂肪酸含量。[結(jié)果]蒜頭果果仁油脂含量達(dá)65%（對(duì)果仁重）；油脂中神經(jīng)酸含量高達(dá)50.71%（占總脂肪酸）；油酸和亞麻酸含量達(dá)36.56%。[結(jié)論]蒜頭果油脂含有豐富的保健性脂肪酸，具有很高的利用價(jià)值，是生產(chǎn)保健油脂的極好資源。

關(guān)鍵詞 神經(jīng)酸；蒜頭果；脂肪酸組成；GCMS

中圖分類(lèi)號(hào) S789.5 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 0517-6611（2016）05-015-03

Abstract[Objective]The aim was to analyze the functional fatty acid composition in Malania oleifera fruit oil， discuss development and utilization value of germplasm resources.[Method]Selecting mature fruit from Bama， Guangxi， nut of fresh fruit was smashed and lyophilized to make dry powder， and then the dried fruit powder was extracted with petroleum ether in a Soxhlet extractor. The oil was gained by distilling the solvent under reduced pressure from the extract. The extracted oil was transesterified by sulfuric acid and methanol. The fatty acid methyl esters of the oil were analyzed by GCMS.[Result]The results showed that the oil content was above 65% in the fruit nut. Particularly， the content of nervonic acid was special high reaching at 50.71% approximately； moreover， the content of oleic acid and linolenic acid reached to 36.56%.[Conclusion]Malania oleifera oil contains abundant functional fatty acid with high utilization value， which is an excellent resource for production of functional edible oil.

Key words Nervonic acid； Malania oleifera； Fatty acid composition；GCMS

蒜頭果（Malania oleifera Chun et S.Lee）為一種常綠喬木，屬于鐵青樹(shù)科（Olacaceae）蒜頭果屬，主要分布于廣西樂(lè)山、隆林、凌云、鳳山、巴馬、百色等地和云南富寧、廣南、文山一帶，是一種稀有植物，為國(guó)家二級(jí)保護(hù)植物[1]。蒜頭果油中神經(jīng)酸含量很高，為總脂肪酸的65%左右[2]。了解蒜頭果油的脂肪酸組成，對(duì)于探討其作為保健性食用油脂和對(duì)其基因資源的利用具有重要意義。神經(jīng)酸（nervonic acid，NA）最早發(fā)現(xiàn)于哺乳動(dòng)物的神經(jīng)組織中，化學(xué)名為順15二十四碳單烯酸（cis15tetracosenic acid），又名鯊魚(yú)酸（selacholeic acid），是一種長(zhǎng)鏈單不飽和脂肪酸。

然而，到目前為止，在世界范圍內(nèi)尚未有大規(guī)模的生產(chǎn)技術(shù)，少量的神經(jīng)酸主要從有限的植物資源中提取，或者從菜籽油中提取含量極低的神經(jīng)酸。神經(jīng)酸最初是從鯊魚(yú)中大量提取。目前發(fā)現(xiàn)的神經(jīng)酸含量較高的植物有銀扇草、琉璃苣、大麻和一些槭科植物的種子，但這些植物產(chǎn)量低不足以用來(lái)生產(chǎn)神經(jīng)酸。蒜頭果種子含油量高，脂肪酸組成中神經(jīng)酸含量也高[2]。隨著我國(guó)社會(huì)老齡化的到來(lái)，未來(lái)在諸如老年癡呆等涉及神經(jīng)系統(tǒng)的老年疾病患者人數(shù)會(huì)大量增加，提高神經(jīng)系統(tǒng)的健康狀況十分迫切。

王建民等[3]對(duì)其神經(jīng)酸功能進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)神經(jīng)酸可以恢復(fù)神經(jīng)末梢活性，促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞的生長(zhǎng)發(fā)育。研究表明神經(jīng)酸可以在一定程度上緩解多發(fā)性硬化癥狀[4]。Oda等[5]表明，神經(jīng)酸對(duì)于由肥胖引起的人體機(jī)能的紊亂具有一定的抑制作用。另外，神經(jīng)酸對(duì)心血管系統(tǒng)疾病也有輔助治療作用。神經(jīng)酸在自然界中分布較少，其中蒜頭果果實(shí)中神經(jīng)酸含量遠(yuǎn)高于其他植物果實(shí)中神經(jīng)酸含量[2]。筆者通過(guò)分析廣西巴馬縣蒜頭果（Malania oleifera）油脂中保健性脂肪酸的含量，探討利用蒜頭果種質(zhì)資源開(kāi)發(fā)保健油脂的價(jià)值。

1 材料與方法

1.1 材料

蒜頭果采自廣西巴馬縣。

1.2 儀器

石油醚（60～90 ℃）、無(wú)水乙醇、甲醇、硫酸、氫氧化鈉均為分析純，湛江市林達(dá)化學(xué)試劑公司；正己烷、色譜醇，上海化學(xué)試劑公司；脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)品，Sigma公司；真空冷凍干燥系統(tǒng) Free 12L，LABCONCO；TSQ Quantum XLS三重四極桿氣質(zhì)聯(lián)用儀，Thermo Fisher公司。

1.3 方法

1.3.1 原料處理。取蒜頭果果仁，將果仁破碎，加適量冰塊，將果仁打成漿狀，果漿置于-80 ℃冰箱中凍結(jié)，再用真空冷凍干燥機(jī)干燥，得到凍干的粉末，用于油脂提取。

1.3.2

蒜頭果油脂提取。準(zhǔn)確稱(chēng)取一定量的果仁凍干粉，用干燥濾紙包好放入索氏提取器中，用石油醚在75～85 ℃水浴中提取7 h左右，取提取液，蒸發(fā)回收溶劑石油醚，得到蒜頭果粗油。

1.3.3

果仁粗油的皂化和甲酯化。稱(chēng)取1 g NaOH溶解于10 mL無(wú)水乙醇中，加入2 g粗油至上述溶解后的溶液中，75 ℃水浴皂化1 h，取出加水，再加入HCl中和；取上述提取液200 μL于另一干凈的試管中，加入2 mL正己烷，取上清；再用1 mL正己烷再洗滌一次，將得到的上清液合并，蒸干；在得到的上清液中加入2 mL 1%硫酸-甲醇溶液后于75 ℃水浴30 min；取出后加入2 mL正己烷，取其上清液后，加入1 mL正己烷洗滌一次，合并得到的上清液，待有機(jī)溶劑揮發(fā)后取1 mL左右的液體待測(cè)。

1.2.4

果仁脂肪酸的GCMS分析條件。TSQ Quantum XLS三重四極桿氣質(zhì)聯(lián)用儀，Thermo Fisher公司生產(chǎn)；HP5MS，30.00 m×0.25 mm×0.25 μm色譜柱；程序升溫：初溫40 ℃保留3 min，以10 ℃/min升至150 ℃，保留5 min，再以2 ℃/min升至250 ℃，再換成10 ℃/min升至300 ℃，保留5 min；進(jìn)樣口溫度280 ℃，色譜-質(zhì)譜接口溫度280 ℃；載氣為氦氣；載氣流速1.0 mL/min；電離方式EI；電離能量70 eV；進(jìn)樣量1 μL。

2 結(jié)果與分析

2.1 蒜頭果果仁干粉制備

采集的新鮮蒜頭果果實(shí)質(zhì)量約60%為果皮和果肉，約40%為核。果核外面包裹一層堅(jiān)硬的殼，去除果核殼可得到果仁（圖1）。經(jīng)過(guò)冷凍干燥100 g新鮮果仁可得干粉52.96 g。

2.2 蒜頭果油脂的提取率

果仁油為黃色液體（圖2）。與果皮果肉油脂相比，果仁油純度高，雜質(zhì)少，具良好流動(dòng)性，有芳香味，油脂提取得率為65%（對(duì)果仁干物質(zhì)）。

2.3 蒜頭果果仁脂肪酸的GCMS分析

蒜頭果油經(jīng)甲酯化，用GC-MS儀分析，總離子流圖見(jiàn)圖3。通過(guò)與脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)品的色譜與質(zhì)譜圖相結(jié)合比較，辨識(shí)色譜峰，其中油酸和亞麻酸峰重疊，二十碳烯酸和二十碳三烯酸峰重疊，因此將它們的含量合并計(jì)算，但不影響神經(jīng)酸含量的計(jì)算。各脂肪酸定量按照標(biāo)準(zhǔn)品的色譜圖計(jì)算。

通過(guò)GC-MS分析，蒜頭果油各脂肪酸的含量見(jiàn)表1。由表1可知，神經(jīng)酸含量達(dá)50.71%，油酸和亞麻酸含量達(dá)36.56%。

3 結(jié)論與討論

研究表明，神經(jīng)酸可以作為多發(fā)性硬化癥、腎上腺髓質(zhì)萎縮癥[6]、視神經(jīng)脊髓炎癥[7]、急性彌漫性腦脊髓炎癥等脫髓鞘疾病以及Zellweger綜合癥[8]的輔助治療藥物或營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑[9]。血清中神經(jīng)酸水平低與突發(fā)性感音神經(jīng)性聾（SSNHL）具有顯著關(guān)系[10]，精神分裂癥[11]、精神病[12]、注意力缺失[13]等精神疾病與神經(jīng)酸水平過(guò)低也密切相關(guān)。

蒜頭果分子量較高，黏度較大，采用傳統(tǒng)壓榨法進(jìn)行提油，出油率較低。丁俊峰等[14]采用微波輔助法進(jìn)行蒜頭果油的提取，具有副產(chǎn)物少、產(chǎn)率較高等優(yōu)點(diǎn)。黃開(kāi)響等[15]采用超臨界CO2萃取的方法，對(duì)蒜頭果葉進(jìn)行油脂提取，結(jié)果表明該方法適用于揮發(fā)性油脂的提取。該研究采用索氏抽提法，分別對(duì)蒜頭果仁、果皮、果肉進(jìn)行油脂提取，相較于其他方法，成本低，操作簡(jiǎn)單，對(duì)設(shè)備要求較低，出油率較高，更適用于實(shí)驗(yàn)室階段的研究。從蒜頭果脂肪酸組成可知，蒜頭果油中不僅神經(jīng)酸含量很高，油酸、亞麻酸含量也很高，具有作為保健食用油脂原料的良好前景，但也含有較高含量的芥酸，所以不能直接用于食用和藥用油脂，需做適當(dāng)?shù)木珶挕?/p>

該研究表明，蒜頭果果仁中油脂含量高，達(dá)65%（占果仁干物質(zhì)），神經(jīng)酸含量高達(dá)50.71%，是極好的神經(jīng)酸資源。但蒜頭果是國(guó)家二級(jí)保護(hù)植物，資源極其有限，目前尚不能推廣種植。另外，目前尚未有對(duì)蒜頭果仁和油脂進(jìn)行全面的成分分析和安全性評(píng)價(jià)的研究，對(duì)于蒜頭果油的藥用、食用安全性尚為得到論證，因此不能直接用于食品或藥品。

參考文獻(xiàn)

[1]傅立國(guó).中國(guó)植物紅皮書(shū)：稀有瀕臨植物：第一冊(cè)[M].北京：科學(xué)出版社，1992：480.

[2]馬柏林，梁淑芳，趙德義，等.含神經(jīng)酸植物的研究[J].西北植物學(xué)報(bào)，2004，24（12）：2362-2365.

[3]王建民.神經(jīng)酸對(duì)改善記憶的影響及在益智食品方面的應(yīng)用研究進(jìn)展[J].食品信息與技術(shù)，2004（4）：42.

[4]SANDHIR R，KHAN M，CHAHAL A.Localization of nervonic acid betaoxidation in human and rodent peroxisomes：Impaired oxidation in Zellweger syndrome and Xlinked adrenoleukodystrophy[J].Lipid research，1998，39：2161-2171.

[5]ODA E，HATADA K，KIMURA J，et al.Relationships between serum unsaturated fatty acids and coronary risk factors negative relations between nervonic acid and obesityrelated risk factors[J].International heart journal，2005，46（6）：975-985.

[6]CHIVAND I E，DAVIDSON B C，ERLWANGER K H.A comparison of the lipid and fatty acid profiles from the Kemels of the fruit（nuts）of Ximenia caffra and Ricinodendron rautanenii from Zimbabwe[J].Ind Crops Prod，2007，1：29-32.

[7]SARGENT J R，COUPLAND K，WILSON R.Nervonic acid and demyelinating disease[J].Medical hypotheses，1994，42（4）：237-242.

[8]TANAKA K，SHIMIZU T，OHTSUKA Y，et al.Early dietary treatments with Lorenzo's oil and docosahexaenoic acid for neurological development in a case with Zellweger syndrome[J].Brain Dev，2007，29：586-589.

[9]BETTGER W J，DIMICHELLERANALLI E，DILLINGHAM B，et al.Nervonic acid is transferred from the maternal diet to milk and tissues of suckling rat pups[J].J Nutr Biochem，2003，14：160-165.

[10]CADONI G，SCORPECCI A，CIANFRONE F，et al.Serum fatty acids and cardiovascular risk factors in sudden sensorineural hearing loss：A casecontrol study[J].Annals of otology，rhinology and laryngology，2010，119 （2）：82-88.

[11]ASSIES J，LIEVERSE R，VREKEN P，et al.Significantly reduced docosahexaenoic and docosapentaenoic acid concentrations in erythrocyte membranes from schizophrenic patients compared with a carefully matched control group[J].Biol Psychiatry，2001，49：510-522.

[12]EVANS D A，BENNETT D A，WILSON R S，et al.Incidence Alzheimer disease in a biracial urban community：Relation to apolipoprotein E allele status[J].Arch Neurol，2003，60：185-189.

[13]CHEN J R，HSU S F，HSU C D，et al.Dietary patterns and blood fatty acid composition in children with attentiondeficit hyperactivity disorder in Taiwan[J].J Nutr Biochem，2004，15：467-472.

[14]丁俊峰，曹建華，林建超，等.微波輔助提取蒜頭果果油的工藝研究[J].食品工業(yè)，2008（5）：3.

[15]黃開(kāi)響，賴(lài)家業(yè)，袁霞，等.蒜頭果葉揮發(fā)油提取工藝及其成分分析研究[J].廣西大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2008，33（B06）：88-91.