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巨噬細(xì)胞系及PLEKHQ1基因敲除小鼠實(shí)驗(yàn)固定夾設(shè)計(jì)*

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［摘要］目的：設(shè)計(jì)研制巨噬細(xì)胞系及PLEKHQ1基因敲除小鼠實(shí)驗(yàn)固定夾，為小鼠尾部采血和注射實(shí)驗(yàn)提供安全、簡(jiǎn)易、方便及省時(shí)的實(shí)驗(yàn)工具。方法：采用50 ml注射器按圖紙開(kāi)槽打孔，制作成巨噬細(xì)胞系及PLEKHQ1基因敲除小鼠實(shí)驗(yàn)固定夾；使用50 ml塑料試管及合適尺寸的塑料底托，制作成小鼠實(shí)驗(yàn)固定夾底座。結(jié)果：該小鼠固定夾與目前市場(chǎng)銷(xiāo)售的小鼠固定夾相比較，具有制作簡(jiǎn)單、成本低廉、使用安全及操作簡(jiǎn)便省時(shí)等優(yōu)點(diǎn)。結(jié)論：該小鼠實(shí)驗(yàn)固定夾為小鼠進(jìn)行尾部靜脈采血及注射等實(shí)驗(yàn)操作提供了安全、便利的實(shí)驗(yàn)工具，極大的提高了實(shí)驗(yàn)的工作效率。

［關(guān)鍵詞］巨噬細(xì)胞系及PLEKHQ1基因敲除小鼠；實(shí)驗(yàn)；固定夾；設(shè)計(jì)

劉宏舉，男，（1979- ），本科學(xué)歷，助理工程師。解放軍第307醫(yī)院醫(yī)學(xué)工程科，從事醫(yī)療設(shè)備管理、維護(hù)及維修工作。

［First-author’s address］ Department of Engineering， The 307thHospital of Chinese People’s Liberation Army， Beijing 100071， China.

巨噬細(xì)胞系及PLEKHQ1基因敲除小鼠是現(xiàn)今使用量大，且研究詳盡的哺乳類(lèi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，而小鼠的尾部采血和注射操作，也是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中最常用的操作方法之一［1-2］。在抓取小鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)要求穩(wěn)和準(zhǔn)，否則容易被其咬傷或讓其逃脫［3］。本研究設(shè)計(jì)了一種簡(jiǎn)易的巨噬細(xì)胞系及PLEKHQ1基因敲除小鼠實(shí)驗(yàn)固定夾，為小鼠進(jìn)行尾部采血和注射等實(shí)驗(yàn)提供了安全便利的實(shí)驗(yàn)工具。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

采用50 ml一次性使用無(wú)菌注射器（廣東龍心醫(yī)療器械有限公司），50 ml圓底塑料試管（上海百賽生物技術(shù)有限公司），塑料底托15 cm×10 cm×3 cm。

1.2 實(shí)驗(yàn)固定夾制作方法

1.2.1 固定夾的制作

（1）按照設(shè)計(jì)圖紙進(jìn)行固定夾的制作，如圖1所示。

（2）在注射器針管壁開(kāi)槽，槽長(zhǎng)度貫穿整個(gè)針管，直至針管底部中心位置，槽寬度略大于小鼠尾部直徑，用來(lái)放置小鼠尾巴（如圖2所示）。

圖1 固定夾制作設(shè)計(jì)圖

圖2 針管壁及底部開(kāi)槽示意圖

（3）將針管安裝注射針的安裝頭切除。使用注射器的活塞芯管充當(dāng)擋板，可根據(jù)小鼠身體長(zhǎng)短靈活調(diào)節(jié)擋板位置，以便方便準(zhǔn)確的固定小鼠位置（如圖3所示）。

圖3 制作好的固定夾示意圖

1.2.2 固定夾底座的制作

（1）按照設(shè)計(jì)圖紙進(jìn)行固定夾底座的制作，如圖4所示。

圖4 固定夾底座制作設(shè)計(jì)圖

（2）將一只完好的50 ml的塑料試管縱向剖開(kāi)切去1/3，剩余2/3試管利用其自身韌性來(lái)充當(dāng)注射器夾子。將試管打孔穿釘后固定在15 cm×10 cm×3 cm的塑料底托上，其制作出來(lái)的固定夾底座重量適中，可以牢固地固定注射器（如圖5所示）。

圖5 小鼠固定夾安裝到底座示意圖

1.3 使用方法

1.3.1 小鼠的固定

（1）提起小鼠尾巴從注射器針管開(kāi)口處倒著拽入針管中，小鼠后肢隨著管壁會(huì)自然向前，想往后蹬腿使不上力，從而能安全方便的將小鼠放置在針管中（如圖6所示）。

圖6 小鼠放置演示圖

（2）將小鼠尾部放入針管底部開(kāi)槽位置，然后一只手抓住尾巴，另一只手將活塞芯管安裝回注射器中，根據(jù)小鼠身長(zhǎng)推至頭部位置。注射器內(nèi)部光滑，活塞阻尼合適，小鼠不能推動(dòng)活塞，起到固定小鼠身體作用，隨即便可開(kāi)始對(duì)小鼠進(jìn)行尾部采血或注射等實(shí)驗(yàn)工作（如圖7所示）。

圖7 調(diào)整活塞固定小鼠位置示意圖

1.3.2 斷尾采血

實(shí)驗(yàn)者左手中指和食指輕輕夾住小鼠尾中下部，拇指輕輕按住尾尖前部；右手持手術(shù)剪，從尾尖約1 cm處進(jìn)行斷尾采血。采血量足夠后，手指捏緊鼠尾切口處，使用6%的液體火棉膠涂敷止血。

2 實(shí)驗(yàn)固定夾應(yīng)用效果

巨噬細(xì)胞系及PLEKHQ1基因敲除小鼠實(shí)驗(yàn)固定夾取材容易，制作簡(jiǎn)單，操作方便，效果明顯，能很好的固定被實(shí)驗(yàn)的小鼠，輕易將小鼠尾巴完全暴露在外，方便實(shí)驗(yàn)者進(jìn)行操作［4-5］。使用此固定夾固定小鼠，既保證了在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，實(shí)驗(yàn)者不易被小鼠咬傷，又保證了整個(gè)采血或注射實(shí)驗(yàn)過(guò)程中小鼠不會(huì)逃跑或被激怒，小鼠尾部采血和注射實(shí)驗(yàn)可順利進(jìn)行［6-7］。同時(shí)，放置小鼠動(dòng)作操作簡(jiǎn)便易行，也減輕了實(shí)驗(yàn)者的工作量，極大提高了工作效率［8-10］（如圖8所示）。

圖8 小鼠固定后示意圖

3 結(jié)論

巨噬細(xì)胞系及PLEKHQ1基因敲除小鼠實(shí)驗(yàn)固定夾只用注射器和試管進(jìn)行制作，故制作成本低廉，為實(shí)驗(yàn)研究節(jié)約了大量資金。固定夾長(zhǎng)度可隨意調(diào)整，滿(mǎn)足不同大小實(shí)驗(yàn)鼠的需求，使用范圍廣。而固定夾操作簡(jiǎn)便省時(shí)，一人可獨(dú)立完成操作，減少操作人員，提高了工作效率。此外，小鼠進(jìn)入固定夾的方式新穎快捷，減少了小鼠被激惹的可能性，在實(shí)驗(yàn)中不會(huì)發(fā)生小鼠殘傷及死亡等情況，也不會(huì)發(fā)生實(shí)驗(yàn)者被小鼠咬傷現(xiàn)象［11-12］。巨噬細(xì)胞系及PLEKHQ1基因敲除小鼠實(shí)驗(yàn)固定夾的設(shè)計(jì)，為實(shí)驗(yàn)研究順利進(jìn)行提供了安全便利的實(shí)驗(yàn)工具，極大提高了實(shí)驗(yàn)的工作效率。

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①解放軍第307醫(yī)院醫(yī)學(xué)工程科 北京 100071

［文章編號(hào)］1672-8270（2016）05-0124-03 ［中圖分類(lèi)號(hào)］ R197.39

［文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼］A

DOI:10.3969/J.ISSN.1672-8270.2016.05.038

作者簡(jiǎn)介

收稿日期：2015-08-15

*基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金（31400739）“PH結(jié)構(gòu)域蛋白PLEKHQ1協(xié)調(diào)巨噬細(xì)胞遷移與激活的機(jī)制研究”

Design and development of a fixed holding apparatus for mice of macrophage system and PLEKHQ1 gene knockout

LIU Hong-ju， ZHANG Peng-fei， ZHANG Luo

China Medical Equipment，2016，13（5）:124-126.

［Abstract］ Objective: To develop a fixed clamp apparatus for Macrophage system and PLEKHQ1 gene knockout mice， in order to provide a safe， simple， convenient and time-saving experimental tool for mice tail blood collection and injection. Methods: Clamp for macrophage system and PLEKHQ1 gene knockout mice was made by 50 ml syringe with slot according to the drawing. Clamp base was made by 50 ml plastic tube and appropriate size of the plastic tap. Results: Compared with current mice clamp in the market， the mice fixed clamp was a simple， low-cost， safe， easy and timesaving tool. Conclusion: The mice clamp for mice tail blood collection and injection provided a safe and convenient tool， and greatly improved the efficiency of the experiment.

［Key words］Macrophage system and PLEKHQ1 gene knockout mice； Experiment； Fixed clamp apparatus； Design