孫圣福，陳 偉，陳 靜，田夫林，姜秀云，馬慧玲，劉麗平，藺曉月，王貴升，王苗利，徐 鴻（.山東省動物疫病預(yù)防與控制中心，山東濟(jì)南500；.濟(jì)南市動物疫病預(yù)防與控制中心，山東濟(jì)南50000）

?

2011
—2014年山東省獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測能力比對結(jié)果分析

孫圣福1，陳 偉2，陳 靜1，田夫林1，姜秀云1，馬慧玲1，劉麗平1，藺曉月1，王貴升1，王苗利1，徐 鴻1
（1.山東省動物疫病預(yù)防與控制中心，山東濟(jì)南250022；2.濟(jì)南市動物疫病預(yù)防與控制中心，山東濟(jì)南250000）

摘 要：2011至2014年，山東省組織全省獸醫(yī)系統(tǒng)部分實(shí)驗(yàn)室開展了檢測能力比對工作。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，2011至2014年，所有參加檢測能力比對項目的合格率分別為86.00%（172/200）、93.90%（200/213）、96.35%（211/219）、98.53%（269/273），表明山東省獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室體系的檢測能力逐步得到提升。

關(guān)鍵詞：獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室；檢測；能力比對

獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室是指隸屬于各級獸醫(yī)主管部門，承擔(dān)動物疫病檢測、診斷和監(jiān)測等任務(wù)的實(shí)驗(yàn)室。作為動物疫病預(yù)防與控制機(jī)構(gòu)的重要組成部分，獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室是養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展的強(qiáng)有力后盾和技術(shù)保障［1］。實(shí)驗(yàn)室檢測水平的高低直接影響到轄區(qū)內(nèi)動物疫病的防控水平和養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，因此，開展獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測能力比對是評價獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測技術(shù)水平的重要手段，也是加強(qiáng)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制的有效方法［2］。為提高獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測能力和技術(shù)水平，按照農(nóng)業(yè)部的要求，山東省組織了全省獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測能力比對

1 比對試驗(yàn)組織

根據(jù)農(nóng)業(yè)部要求，山東省動物疫病預(yù)防與控制中心在2011至2014年每年組織全省部分市、縣級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測能力比對工作。每年設(shè)置3～5個檢測項目。參加檢測能力比對的實(shí)驗(yàn)室包括17個市級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室、17個國家動物疫情測報站獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室以及部分縣級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室。根據(jù)市、縣級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測能力的不同，每個實(shí)驗(yàn)室參加3個項目的檢測能力比對。歷年來的檢測項目和參加的實(shí)驗(yàn)室數(shù)量見表1。

表1 2011—2014年山東省獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測能力比對項目

2 比對材料和方法

2.1 比對材料

所有參加實(shí)驗(yàn)室比對的試劑和樣品均由山東省動物疫病預(yù)防與控制中心準(zhǔn)備，保證相同試劑、相同樣品、相同時間。比對試驗(yàn)采用的試劑均來自國家參考實(shí)驗(yàn)室。比對試驗(yàn)樣品由中心實(shí)驗(yàn)室和國家參考實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)備，每個檢測項目設(shè)置5～6份。定量或半定量樣品設(shè)置了不同的滴度，定性樣品設(shè)置了陰性、陽性和弱陽性樣品，其中的1～2個樣品設(shè)置了重復(fù)。

2.2 比對方法

所有檢測項目采用的比對方法均采用國家標(biāo)準(zhǔn)或參考實(shí)驗(yàn)室推薦的方法。所采用的檢測項目、檢測方法及所參考的標(biāo)準(zhǔn)見表2。

2.3 結(jié)果評價標(biāo)準(zhǔn)

2.3.1 豬繁殖與呼吸綜合征病原。弱陽性盲樣和強(qiáng)陽性盲樣檢測結(jié)果應(yīng)為“陽性”。陰性盲樣的檢測結(jié)果應(yīng)為“陰性”。

2.3.2 口蹄疫抗體。盲樣檢測值與參考值偏差不超過2倍。

表2 檢測能力比對所采用的試驗(yàn)方法、標(biāo)準(zhǔn)

2.3.3 禽流感抗體。盲樣檢測值與參考值偏差不超過1個滴度。

2.3.4 豬瘟抗體（間接血凝）。盲樣檢測值與參考值偏差不超過1個滴度。

2.3.5 新城疫抗原。弱陽性盲樣和強(qiáng)陽性盲樣檢測結(jié)果應(yīng)為“陽性”；陰性盲樣的檢測結(jié)果應(yīng)為“陰性”。

2.3.6 口蹄疫非結(jié)構(gòu)蛋白抗體。弱陽性盲樣和強(qiáng)陽性盲樣檢測結(jié)果應(yīng)為“陽性”；陰性盲樣的檢測結(jié)果應(yīng)為“陰性”。

2.3.7 布魯氏菌病抗體。弱陽性盲樣和強(qiáng)陽性盲樣檢測結(jié)果應(yīng)為“陽性”；陰性盲樣的檢測結(jié)果應(yīng)為“陰性”。

2.3.8 豬瘟病原。弱陽性盲樣和強(qiáng)陽性盲樣檢測結(jié)果應(yīng)為“陽性”；陰性盲樣的檢測結(jié)果應(yīng)為“陰性”。

2.3.9 口蹄疫病原。弱陽性盲樣和強(qiáng)陽性盲樣檢測結(jié)果應(yīng)為“陽性”；陰性盲樣的檢測結(jié)果應(yīng)為“陰性”。

2.3.10 豬瘟病毒抗體（ELISA）。弱陽性盲樣和強(qiáng)陽性盲樣檢測結(jié)果應(yīng)為“陽性”；陰性盲樣的檢測結(jié)果應(yīng)為“陰性”。

3 結(jié)果分析

3.1 總體檢測結(jié)果

2011至2014年共開展了19個檢測項目的比對，不同檢測項目結(jié)果合格率從80.60%到100%不等，見表3。

3.2 不同檢測項目的檢測結(jié)果

根據(jù)檢測目的的不同，檢測項目分為血清學(xué)檢測和病原學(xué)檢測。血清學(xué)檢測能力比對了4種檢測方法，分別是ELISA、HI、IHA、試管凝集。病原學(xué)主要采用了RT-PCR方法或熒光RT-PCR。5種檢測方法基本涵蓋了目前實(shí)驗(yàn)室常用的檢測方法。這幾種檢測方法的檢測結(jié)果合格率有所不同，見表4。

表3 2011—2014年獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室比對試驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計分析

表4 不同檢測項目的檢測結(jié)果統(tǒng)計表

4 討論

從檢測結(jié)果來看，2011至2014年檢測結(jié)果合格率逐年上升，從2011年的86.00%至2014年的98.53%，提高了12個百分點(diǎn)。參加檢測能力比對的實(shí)驗(yàn)室數(shù)量也在逐年上升，從2011年的67個，到2014年達(dá)到了91個。2014年除了市級實(shí)驗(yàn)室、國家動物疫情測報站，還有17個縣級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室具備了病原學(xué)的檢測能力。農(nóng)業(yè)部2009年出臺了《獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室考核管理辦法》［3］，加強(qiáng)了獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)和管理。從以上的檢測結(jié)果來看，獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)的重要性逐漸引起了各級獸醫(yī)主管部門的重視，實(shí)驗(yàn)室的檢測能力和水平在逐年上升。

從不同檢測項目的檢測結(jié)果合格率來看，不同檢測方法的檢測合格率有所不同。定量檢測方法，如HI、試管凝集、IHA，檢測合格率較低；半定量檢測方法，如ELISA，檢測合格率次之；定性檢測方法，如PCR，合格率最高。定量和半定量試驗(yàn)對于規(guī)范操作步驟、控制檢測環(huán)境、嚴(yán)格結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)、標(biāo)定檢測試劑的要求較高，而定性檢測方法受操作過程和人員的影響較低。

從檢測方法來看，主觀判定結(jié)果（眼觀判定結(jié)果）較客觀判定（儀器判定）結(jié)果的檢測合格率低，如HI、IHA、試管凝集等檢測方法需要操作員依據(jù)采用的標(biāo)準(zhǔn)或說明書進(jìn)行觀察判定結(jié)果。PCR由儀器進(jìn)行讀取結(jié)果，結(jié)合實(shí)驗(yàn)員主觀判定結(jié)果，而ELISA等由儀器設(shè)備讀取數(shù)據(jù)，判定結(jié)果。影響主觀判定結(jié)果的因素較多，與環(huán)境、操作者等因素相關(guān)，重復(fù)性較差，同樣的結(jié)果不同人判定，可能相差1～2個滴度；而影響客觀判定結(jié)果的因素少，與儀器設(shè)備的性能相關(guān)性大，重復(fù)性好。因此，在實(shí)驗(yàn)室檢測過程中，同樣情況下應(yīng)優(yōu)先選擇客觀判定結(jié)果的檢測方法。

從實(shí)驗(yàn)室建設(shè)來看，具備病原學(xué)檢測能力的實(shí)驗(yàn)室逐年增加，這也體現(xiàn)了獸醫(yī)主管部門對此的重視。為進(jìn)一步發(fā)揮獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室在動物疫病防控方面的重要作用，應(yīng)加強(qiáng)以下幾點(diǎn)工作：一是加強(qiáng)檢測技術(shù)人員的培訓(xùn)，應(yīng)當(dāng)加強(qiáng)生物安全、實(shí)驗(yàn)室管理、

檢測技術(shù)、結(jié)果判定和分析方面的培訓(xùn)工作，嚴(yán)格持證上崗，以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。二是加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室管理。山東省自2010年開展農(nóng)業(yè)部獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室考核，逐步規(guī)范了對實(shí)驗(yàn)室的管理。但實(shí)驗(yàn)室管理是一個逐步改進(jìn)和提高的過程，實(shí)驗(yàn)室的規(guī)范還需要一個漫長的過程。三是加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境和硬件的投入。檢測結(jié)果與人員、設(shè)備、環(huán)境、樣品、方法、試劑等密切相關(guān)，實(shí)驗(yàn)室檢測能力比對是在相同方法、相同試劑、相同樣品的前提下進(jìn)行比對，比對的是不同環(huán)境和設(shè)備條件下檢測人員的操作能力。只有把實(shí)驗(yàn)室環(huán)境和設(shè)備控制在滿足試驗(yàn)的條件下，人員經(jīng)過培訓(xùn)，才能達(dá)到滿意的效果。

參考文獻(xiàn)：

［1］董昕欣，劉偉，邴國霞，等.2014年全國省級獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測能力比對結(jié)果分析［J］.中國獸醫(yī)雜志，2014，50（10）：101-103.

［2］劉偉，董昕欣，李文京，等.全國省級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測能力比對結(jié)果分析［J］.中國動物檢疫，2012，29（10）：19-21.

［3］農(nóng)業(yè)部辦公廳.農(nóng)業(yè)部辦公廳關(guān)于印發(fā)《獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室考核管理辦法的通知》［Z］.農(nóng)醫(yī)發(fā)［2009］15號.北京：農(nóng)業(yè)部，2009-8-11.

（責(zé)任編輯：杜憲）

Analysis on Comparison of Testing Capability among Veterinary Laboratories in Shandong Province during 2011—2014

Sun Shengfu1，Chen Wei2，Chen Jing1，Tian Fulin1，Jiang Xiuyun1，Ma Huiling1，Liu Liping1，Lin Xiaoyue1，Wang Guisheng1，Wang Miaoli1，Xu Hong1
（1.Shandong Animal Disease Prevention and Control Center，Jinan，Shandong 250022；2.Jinan Animal Disease Prevention and Control Center，Jinan，Shandong 250000）

Abstract：The activities of Testing Capability Comparison were organized among veterinary laboratories at different levels in Shandong province from 2011 to 2014.The results showed that the pass rates were 86.00%（172/200）， 93.90% （200/213）， 96.35%（211/219） and 98.53%（269/273） from 2011 to 2014 respectively.It showed that testing capability of veterinary laboratory system in Shandong province has gradually been upgraded.

Key words：veterinary laboratory；detection；profi ciency comparison

中圖分類號：S851

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B

文章編號：1005-944X（2016）03-0052-04

DOI：10.3969/j.issn.1005-944X.2016.03.020